Background: Our previous study showed that purified protein derivative (PPD)-stimulated pleural mononuclear cells (PMC) from tuberculous pleurisy (Tbp) produced significantly more $IFN-{\gamma}$ (10- to 70-fold) after in vitro PPD stimulation than freshly isolated pleural cells from malignant pleurisy. The present study was designed to determine whether blocking the CD40-CD40 ligand (CD40L) interaction decreases $IFN-{\gamma}$ production by altering IL-12 levels. Methods: IL-12 and $IFN-{\gamma}$ production after neutralizing anti-CD40L antibody treatment was compared to the efficacy of anti-CD80, anti-CD86, and a combination of anti-CD80 and CD86 (CD80+86) monoclonal antibodies (mAb). These activities were measured by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), after in vitro stimulation with PPO antigen (Ag). Results: Neutralization of CD80, CD86 and CD80+86 did not decrease $IFN-{\gamma}$ and IL-12 production in Tbp-PMC, whereas neutralization of CD40L significantly depressed IL-12 p40 and $IFN-{\gamma}$. In addition, neutralization of CD40L completely inhibited IL-12 p40 and $IFN-{\gamma}$ mRNA expression. Conclusion: The CD40-CD40L interaction might play a major role in IL-12 and $IFN-{\gamma}$ production in Tbp-PMC, thus contributing to protective immunity in human tuberculosis.
Scrub typhus and murine typhus are common endemic febrile illness in the fall in Korea. Scrub typhus is caused by Orientia tsutsugomushi, murine typhus is caused by Rickettsia typhi. Trombiculid mites are known as both the vector and the reservoir host of O tsutsugamushi, the mites which transmit O tsutsugomushi have been reported to be Leptotrombidium pallidum and L scutellare. The author carried out an epidemiological study of scrub typhus and murine typhus in Kyodong-Myeon, Kanghwa-Gun, Incheon in relation to the residents and the host rodents, such as their distribution, seroepidemiology, and population density of chigger mites. 1. Out of 900 residents, 33(3.7%) showed positive reaction to O tsutsugamushi, 24(2.7%) to R typhi. 2. In the seropositives to O tsutsugamushi or R typhi, between the sixties and the seventies of the age were dominant. 3. In the seropositives to O tsutsugamushi serotypically Gilliam was dominant. 4. Among the total 42 field rodents trapped by the sherman traps, 18 rodents were Apodemus agrarius(42.9%), 13 rodents were Crocidura lasiura(31.0%), 5 rodents were Musmusculus(11.9%), 2 rodents(4.8%) were Crocidura suaveolens, Rattus norvegicus, Tscherskia triton, respectively. 5. Out of 42 field rodents, 25 were parasitized by 4,419 chigger mites, showing 59.5% of the infestation rate and 98.8 of the chigger index. L pallidum parasitized in A agrarius, C lasiura, M musculus, R norvegicus and T triton, and L scutellare parasitized only C lasiura. 6. Antibodies in the sera of field rodents against O tsutsugamushi and R typhi were investigated by indirect immunofluorescent antibody technique. Positive rate of antibody against O tsutsugamushi were 11.9(5 of 42) and all of the positive is A agrarius. Antibody against R typhi was not detected. These results might provide the basic information for the management of scrub typhus and murine typhus in Kyodong-myeon, where the epidemiological studies on scrub typhus and murine typhus was not carried out enough.
This experiment was performed to clarify the concentration of rice stripe virus in the rice Plant leaves by serological test, and was attempted to inspect the virus carrier among small brown planthopper by antibody-sensitized hemagglutination test. The antiserum was prepared by injecting intervenously into the external marginal vein of the ear of a rabbit. The precipitin titer of it was 1 : 16. The rough virus fluid prepared from diseased leaves was centrifuged at 10.000 rpm, and then the supernatant solution was treated at $55^{\circ}C$ for 5 minutes and the solution clarified by removing the agglutinate was used as the antigen solution. Antibody-sensitized erythrocyte solution was prepared from sheep erythrocytes sensitized by rice stripe virus with tannic acid, and its agglutination titer was 1 : 512. The virus concentrations in flag leaves or first leaves just below them showing different symptoms was high with progressing the severity of symptoms. And the concentrations of the virus in leaves of varieties of the rice plant showing same degree symptom were lower in suscetible varieties, Sadominori, Palgoeng, Mangyong and Nihonbare, than in the resistant one, Tongil, but in Yooshin which was known as the resistant, lower rather than in Tongil. The reacton of antibody-sensitized hemagglutination test to inspect the virus carrier, was so highly sensitive that this reaction was recognized as a method which is able to Identify the carrier accurately in short time.
Unlike most bacteria, Treponema pallidum subspecies cannot be readily isolated or sustained in cell culture for numerous generations. In korea, two non treponemal tests are currently considered as standard; the VDRL slide test and RPR card test. These tests are based on an antigen composed of an alcoholic solution containing measured amount of cardiolipin, cholesterol, and sufficient purified lecithin to produce reactivity. The nontreponemal reagin tests measure immunoglobulin M (IgM) and IgG to lipoidal material released from damaged host cells as well as to lipoprotein-like material and possibly by cardiolipin released from the treponemes. The object of the evaluation was to evaluate the performance of the Mediace RPR kit on the automated biochemistry analyzer system as a method for screen method of syphilis as well as to identify BFP possibility. For evaluation of routine screening test, a total 2,380 specimens tested by Mediace RPR from 28th Oct, 2007 to 22th Feb, 2008. For evaluation of BFP possiblility, we measured samples which have potential BFP reaction in Syphilis test such as ANA (anti-nuclear antibody) positive (135 samples), CRP (C-reactive protein) positive (100 samples), RF (Rheumatoid factor) positive (26 samples), and other potential BFP cases (17 samples) including total 278 samples. These samples were tested quantitative test Mediace RPR with Hitachi 7600 P module. For comparison with current manual test, VDRL slide test were performed. Of these 2380 specimens, 2350 were negative, 30 were positive, and one were positive with TPHA. Both methods agreed for 2356 (98.9%) samples. Of the 30 samples showed positive results over 1.0 R.U, 6 samples showed positive results with VDRL test. Of these 6 samples, 1 samples showed positive with TPHA test. The combination of the Automated Biochemistry analyzer and VDRL test for retest can be increase efficiency of syphilis screening test.
Han Young Shin;Chunk Sang Jin;Ahn Kang Mo;Shin Kwane;Choi Hay Mie;Lee Sang Il
Korean Journal of Community Nutrition
/
v.10
no.3
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pp.264-270
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2005
Breastfeeding has been known as the best feeding practice to prevent allergies including atopic dermatitis (AD) However, the benefit on the prevention of allergic disease is still controversial. The objectives of this study were to examine the rate of sensitization to the protein of eggs, cow's milk and soy in exclusively breastfed infants and to evaluate antigen-antibody reaction between breast milk and serum of AD infant. Data on feeding and food hypersensitivity were obtained for 62 AD infants (32 male, 30 female) aged < 6 month who had visited Samsung Medical Center from September 2001 to May 2003. Food hypersensitivity was determined by measuring specific IgE to egg, cow's milk and soy. Specific IgE levels > 0.7 kU/L by CAP assay (Pharmacia, Uppsala, Sweden) were considered positive. The rates of sensitization in breastfed infants were $41.9\%$ (26/62) to egg, $30.6\%$ (19/62) to milk and $18.0\%$ (11/62) to soy. Immunoblotting analyses were performed using breast milk with the matched serum of seven AD infants (4 male/3 female). Binding patterns of AD infant's IgE to breast milk extract showed visible specific band for immunoglobulin, especially in case of a lactating mother who did not completely restricted ingestion of egg, milk and soy. These results indicate that sensitization to food allergen develops via breast milk feeding. Breast milk feeding should be recommended in infants at risk of developing allergic disease, but maternal intake of highly allergenic food might be restricted for prevention and treatment of food allergy among the babies with AD.
To evaluate the immunomodulatory activity of a water extract (KMF-WE) of Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum) fruit, we examined its ability to induce humoral and cellular immune response against keyhole limpet hemocyanine (KLH). Immunized mice with KLH admixed with KMF-WE (KLH/KMF-WE) showed significant induction of KLH-specific antibodies compared to mice immunized with KLH alone. The assay for determining isotypes of antibodies revealed that KMFWE augmented KLH-specific-IgG1 and -IgG2a production. In vitro T lymphocyte proliferation analysis against KLH revealed that the splenocytes of mice immunized with KLH/KMF-WE showed a significantly higher proliferative ability than those from mice immunized with KLH alone. The culture supernatants of splenocytes, which were harvested from mice immunized with KLH/KMF-WE, showed higher levels of both Th-1 type (IL-2, IFN-${\gamma}$) and Th-2 type (IL-4) cytokines in response to KLH stimulation compared to those from mice immunized with KLH alone. Also, in delayed-type hypersensitivity (DTH) assay, mice immunized with KLH/KMF-WE showed a significantly higher reaction to KLH than mice treated with KLH alone. These results suggest that KMF-WE possess immunoadjuvant activity to enhance both antigen-specific humoral and cellular immune responses against protein antigens (KLH).
Kim, Eun-Gyeong;Park, Ho-Jung;Son, Byeong-Guk;Jung, Myeong-Ho;Heo, Jung-Ho;Hwang, Bo-Won
Korean Journal of Veterinary Service
/
v.33
no.4
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pp.345-351
/
2010
Toxoplasma gondii is a species of parasitic protozoa in the genus Toxoplasma. The definitive host of T. gondii is the cat, but the parasite can be carried by the vast majority of warm-blooded animals, including humans. It is often found in the tissues of food animals including pigs and sheep. To determine the regional prevalence of infection with T. gondii, bloods (n=300) from domestic pigs and tissues (n=200) from slaughter pigs in Gyeongnam province were tested using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and a polymerase chain reaction (PCR) for detection of antibody and antigen. A total of 115 sero-positive pigs were identified for a prevalence rate of 38.3%. Of the 50 herds from domestic pigs tested, 34 had at least one sero-positive pig for a herd prevalence rate of 68.0%. Sero-positive rates of pigs in fattening farm were higher than that of pigs in breeding company. Sero-positive rates of sows were higher than that of growing pigs. Seasonally, sero-positive rates of pigs were highest in winter (80.0%) and lowest in spring (23.8%). According to farm size, sero-positive rates of pigs were higher in small size farms (${\leq}$2,000) than that of big size farms (>2,000). However, none of the bloods (n=300) from domestic pigs and tissues (n=200) from slaughter pigs were positive for T. gondii specific DNA by PCR.
Canine sarcoptic mite (Sarcoptes scabiei var. canis) burrow usually in the stratum corneum of the skin of dogs and rabbits. Antigens from the burrowing mites induce cutaneous inflammatory reaction and humoral and cell-mediated immune response in the host. The effect of immunization induced by somatic antigens of house dust mite (Dermatophagoides spp.) has been evaluated to control the canine sarcoptic mite in this experiment. Twelve common antigens (187, 142, 126, 120, 109, 92, 80, 68, 51, 30, 25, 17 kDa) were found using SDS-PAGE with silver staining and Western blot between canine sarcoptic mite and house dust mite. In order to evaluate the immunologic effect of these common antigens 10 New Zealand white rabbits were divided as 4 groups such as negative control (group I), positive challenged control (group II), vaccinated (group III), and vaccinated-challenged (group IV) groups. Group II was artificially infested with about 1,000 canine sarcoptic mites and group III and IV were immunized with somatic antigens of house dust mite. In addition group IV was artificially infested with about 1,000 canine sarcoptic mites and group II, IV were treated with ivermectin. At the 8 weeks of the vaccination with common antigen, the antibody titers of all groups of II, III and IV had been increased. Both infestation score and live canine sarcoptic mite counts of group IV were lower than group III. Infestation score of group II become 0 by 2 weeks and group IV by 4 weeks after infestation. These results suggest that house dust mite, which is easy to culture in vitro, can be a vaccine candidate for protection of canine sarcoptic mite infestation.
Background: Although a skin test is the primary option for detecting allergen-specific IgE in clinics, the serum IgE immunoassay is also important because it allows for the diagnosis of allergy without any accompanying adverse effect on the patient. However, the low detection limit of IgE levels by immunoassay may restrict the use of the method in some occasions, and improving its sensitivity would thus have a significant implication in allergy-immunology clinics. Methods: In this study, we attempted to detect specific serum IgE by using immuno-polymerase chain reaction (IPCR) which combines the antigen-antibody specificity of enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) with the amplification power of PCR. Results: Our results demonstrated that Blo t5-specific serum IgE can be detected by IPCR with a 100-fold higher sensitivity than ELISA, and cross-reactivity of serum IgE to other mite allergens is able to be analyzed by using only $0.3{\mu}l$ of serum sample. Use of real-time IPCR seemed to permit more convenient determination of specific serum IgE as well. Conclusion: We believe that IPCR can serve as a valuable tool in determining specific serum IgE, especially when the amount of serum sample is limited.
US3 gene is a member of the human cytomegalovirus (HCMV) immediate early gene. Although the precise functions of the US3 gene in HCMV replication and pathogenesis are not known, it has been reported to play a role in inhibiting major histocompatibility class I antigen presentation. For further knowledge of US3 gene expression, rabbit polyclonal antiserum of the US3 gene product was used for indirect immunofluorescence assay. In permissive human foreskin fibroblast (HFF) cells, US3 gene expression was detectable as crescent or half-moon shape in the perinuclear region at immediate early times after virus infection. HFF cells infected with mutant HCMV lacking US3 open reading frames were negative for US3 immunofluorescence assay. Double immunofluorescence assay using monoclonal antibody to gamma adaptin (specific for the Golgi complex) and rabbit anti-US3 antiserum revealed that US3 gene product could be localized to the Golgi complex. At later time after HCMV infection, US3 gene products were detected as globular aggregates in the cytosol. These aggregates were positive for gamma adaptin and stained with preimmune serum, suggesting a nonspecific reaction to the Golgi complex. Northern blot analysis revealed that transcription of US3 was observed only during immediate early times after virus infection (until 6 h postinfection). Therefore US3 gene expression appears to be confined to immediate early time and its gene products are localized to the Golgi complex as crescent shaped forms in the perinuclear cytoplasm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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