Objectives: Bee venom (BV) is a complex mixture of proteins and contains proteins such as phospholipase and melittin, which have an effect on blood clotting and blood clots. The mechanism of action of honey bee venom (HBV, Apis mellifera) on human plasma proteins and its anti-thrombotic effect were studied. The purpose of this study was to investigate the anti-coagulation effect of BV and its effects on blood coagulation and purification. Methods: Crude venom obtained from Apis mellifera was selected. The anti-coagulation factor of the crude venom from this species was purified by using gel filtration chromatography (sephadex G-50), and the molecular weights of the anti-coagulants in this venom estimated by using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Blood samples were obtained from 10 rabbits, and the prothrombin time (PT) and the partial thromboplastin time (PTT) tests were conducted. The approximate lethal dose (LD) values of BV were determined. Results: Crude BV increased the blood clotting time. For BV concentrations from 1 to 4 mg/mL, clotting was not observed even at more than 300 seconds, standard deviations $(SDs)={\pm}0.71$; however, clotting was observed in the control group 13.8 s, $SDs={\pm}0.52$. Thus, BV can be considered as containing anti-coagulation factors. Crude BV is composed 4 protein bands with molecular weights of 3, 15, 20 and 41 kilodalton (kDa), respectively. The $LD_{50}$ of the crude BV was found to be $177.8{\mu}g/mouse$. Conclusion: BV contains anti-coagulation factors. The fraction extracted from the Iranian bees contains proteins that are similar to anti-coagulation proteins, such as phospholipase $A_2(PLA_2)$ and melittin, and that can increase the blood clotting times in vitro.
Purpose: In this study, we evaluated anti-inflammatory activity and anti-thrombosis effect of Manbunbang(MBB) prescribed to chronic PID patients. Methods: We studied inhibitory effect of platelet aggregation, suppression effect of GPIIb/IIIa activity and inhibitory effect of $TXB_2$ and $PGE_2$ biosynthesis which were caused by ADP, epinephrine, collagen and arachidonic acid in vitro. And suppression of pulmonary embolism, changes of related factors in dextran coagulation condition model and anti-oxidative effect of oxidative damage were studied in vivo. Results: MBB extract showed LD50 of $200\;{\mu}g/ml$ or higher in mouse lung fibroblast cells, and significantly decreased the GPT and GPT level in dextran coagulation condition model compared to the control. MBB extract showed dose-dependent inhibition effect on platelet coagulation induced by ADP, epinephrine, collagen, arachidonic acid. MBB extract showed dose-dependent inhibition effect on GPIIb/IIIa activities compared to the control. MBB extract significantly suppressed TXB2 and PGE2 biosynthesis compared to the control. MBB extract suppressed pulmonary embolism triggered by collagen and epinephrine by 37.5% compared to the control. MBB extract significantly suppressed the decrease of speed of bloodstream caused by blood coagulation in dextran coagulation condition model compared to the control. Concluson : The results strongly suggest the anti-inflammatory activity of Manbunbang through anti-thrombus. Various applications using Manbunbang on inflammatory diseases are anticipated. Anti-oxidative efficacy comparison data between the Manbunbang prescription and the drug compositions may be used as important clinical information, and further investigation of anti-oxidative activities of Chrysanthemum indicum and Rhemaniae Radix should be followed.
흑생강은 생강과 초본과 뿌리식물로 태국 및 라오스에서는 크라차이담으로 불리며, 뿌리는 향신료와 차로 이용되어 왔다. 말린 뿌리는 위장장애, 통풍, 이질, 알러지 치료 및 강장용으로 전통적으로 이용되어 왔으며, 최근에는 항비만, 항산화, 항염증, 혈전 용해 활성 등의 다양한 유용 생리활성이 보고되어 있다. 본 연구에서는 흑생강의 혈액순환 개선 활성을 확인하기 위해, 흑생강 지하부의 ethanol 추출물 및 열수 추출물을 조제하고 각각 이의 순차적 유기용매 분획물인 hexane 분획물, ethylacetate (EA) 분획물, butanol 분획물 및 물 잔류물을 조제하여 각각의 성분을 분석하였고, 혈전 생성과 관련된 항응고 활성, 혈소판 응집저해 활성 및 적혈구 용혈활성을 평가하였다. 그 결과, ethanol 추출물의 EA 분획물 5 mg/ml 농도에서 TT, PT, aPTT를 각각 1.22, 1.49 및 15배 이상 연장시켜 강력한 항응고 활성을 나타냄을 확인하였으며, ethanol 및 열수 추출물의 EA 분획물 모두에서 동량의 아스피린보다 강력한 혈소판 응집저해 활성을 확인하였다. 또한 상기 EA 분획물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않았다. 본 연구 결과는 흑생강의 혈전 생성 억제 활성에 대한 최초의 보고이며, 흑생강의 EA 분획물이 인간 적혈구 용혈활성 없이 강력한 항응고 및 혈소판 응집저해 활성을 나타내어 신규의 항혈전제로 이용 가능함을 제시하고 있다.
마가목의 열매인 마가자는 생식하거나 다류, 발효주로 제조되어 음용되며, 한방에서는 고혈압 및 관절염 치료 등에 사용되고 있다. 본 연구에서는 현재까지 보고되지 않은 마가자의 항혈전 활성을 평가하기 위해 울릉도 마가자의 ethanol 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물을 조제하고 이의 혈액응고 저해 및 혈소판 응집저해 활성을 평가하였다. 그 결과, 마가자의 ethanol 추출물의 ethylacetate 분획에서 강력한 트롬빈, 프로트롬빈, 혈액응고인자 저해와 함께, 혈소판 응집저해 활성을, hexane 분획에서는 아스피린보다 강력한 혈소판 응집저해 활성을 확인하였다. 또한 마가자의 추출물 및 분획물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구 용혈활성이 없음을 확인하여, 마가자의 활성분획물이 신규의 항혈전제로 사용 가능함을 제시하였다.
Tenebrio molitor, rich in protein, is used as an alternative protein source. Many studies have evaluated Tenebrio molitor larvae (TML) for anti-obesity effects, fatty liver relief, antithrombosis, and antioxidant effects. In this study, we prepared an experimental diet by adding Tenebrio molitor larvae oil (TMLO) to feed and administered it to adult male ICR mice for six weeks. The study assessed the weight gain of mice, prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT), blood coagulation time, and the activities of coagulation factor VII and coagulation factor XII. The weight gain of mice was suppressed in the groups fed with TMLO, indicating a potential anti-obesity effect. The blood coagulation time was delayed in the TMLO-fed groups, as evidenced by amplified PT and aPTT values. Furthermore, the activities of coagulation factor VII and coagulation factor XII were diminished in the TMLO-treated groups, indicating a potential thrombosis relieving effect. The concentrations of thromboxane B2 and serotonin declined in the TMLO-fed groups, signifying potential blood circulation effects. Finally, blood triglyceride and LDL-cholesterol concentrations were reduced in the TMLO-fed groups. In summary, TMLO supplementation may have an inhibitory effect on liver damage and blood clot formation caused by obesity.
Purpose: In this study, we investigated the anti-thrombotic efficacy of "Eungapbang-gagam(EGB)" currently used in clinical treatment of PID Methods: We studied inhibitory effect of platelet cohesion, suppressive effect of GPIIb/IIIa activity, inhibitory effect of $TXB_2$ and $PGE_2$ biosynthesis, and oxidative damage suppression effects of "EGB" in vitro. Also, suppression of pulmonary embolism and changes of related factors in dextran coagulation condition model were studied in vivo. Results: In this study, EGB extract showed dose-dependent inhibitory effect on platelet coagulation induced by ADP, epinephrine, collagen, arachidonic acid. Also it showed dose-dependent inhibition effect on GPIIb/IIIa activities compared to the control group. EGB extract significantly suppressed the decrease of speed of bloodstream caused by blood coagulation in dextran coagulation condition model and increased the number of platelets and amount of fibrinogen, and decreased the APTT in dextran coagulation condition model compared to the control group. EGB extract showed dose-dependent decrease of oxidative damages caused by DPPH and superoxide anion radicals, whereas dose-dependent increase of superoxide dismutase like activity was observed compared to the control group. Conclusion: We confirmed the anti-thrombosis and anti-oxidative efficacy of "Eungapbang-gagam". Various clinical applications of "Eungapbang-gagam" as well as use of data for the construction of EBM is anticipated.
블랙커런트는 장미목 범의귀과의 낙엽관목으로, 즙이 많은 검은 열매와 잎을 주스, 잼, 젤리, 시럽 등으로 가공하여 식용하고 있다. 본 연구에서는 블랙커런트(오스트리아산)의 착즙액과 이의 순차적 유기용매 분획물인 hexane 분획물, ethylacetate (EA) 분획물, butanol 분획물 및 물 잔류물을 조제하여 각각의 성분 분석, 항산화 활성, 혈전 생성과 관련된 항응고 활성 및 혈소판 응집저해 활성을 평가하였다. 그 결과, 착즙액과 폴리페놀 및 플라보노이드 고함유 분획인 EA 분획물에서 강력한 DPPH 음이온, ABTS 양이온, nitrite 소거능과 환원력을 확인하였다. EA 분획의 $RC_{50}$ (활성 radical을 50% 제거하는 데 소요되는 시료의 양)는 각각 136.3, 66.2 및 $115.5{\mu}g/ml$ 값을 나타내어 vitamin C가 나타내는 $RC_{50}$의 각각 1/10, 1/16 및 1/7.7에 해당하는 항산화력을 나타내었다. 또한 착즙액과 이의 EA 분획물, butanol 분획물은 아스피린에 필적하는 강력한 항응고 활성을 나타내었으며, 특히 EA 분획물과 butanol 분획물은 아스피린보다 우수한 혈소판 응집억제활성을 나타내었다. 혈소판 응집을 50% 저해할 수 있는 아스피린 농도는 0.395 mg/ml인 반면, EA 분획 및 butanol 분획은 각각 0.192 및 0.261 mg/ml로 나타났다. 상기의 활성 분획물은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않았다. 이러한 결과는 블랙커런트의 강력한 항산화, 항응고, 혈소판 응집저해 활성을 이용한 신규의 항혈전제 개발 및 이용이 가능함을 제시하고 있다. 본 연구는 블랙커런트의 항혈전 활성에 대한 최초의 보고이다.
Objective : This experimental study was carried out to investigate anti-coagulation effects and mechanism of Hongdeung-tang on the dissentimenated intravascular coagulation Methods : Each 10 rats were classified as normal gorup, control group and treated group. The control group was given a 0.5mg/ml endotoxin intra-vein injection and was occurred Disseminated Intravascular Coagulation(DIC). The treated group were orally administrated 1ml Hongdeung-tang concentration once a day for 6 days and then it was treated the same as the control group. We took the blood from heart and were investigated number of Platelet and white blood cell(WBC), fibrinogen concentration, prothrombin time(PT), activated partial thromboplastin time(APTT), interleukin-6(IL-6), Tumor Necrosis $Factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$, Prostaglandin $E2(PGE_2)$ from them. Results : There were a statistically significant increase of platelet and fibrinogen concentration in the treated group compared to the treated group. The PT was a significantly reduced in treated group compared to the control group. There was no significant change in numbers of WBC and APTT between control and treated group. On the contrary, the number of PT, IL-6, $TNF-{\alpha}$, $PGE_2$ were significantly decreased in treated group compared to the control group. Conclusion : DIC which was occurred by endotoxin intravenous injection seems to related to the increase of IL-6, $TNF-{\alpha}$, $PGE_2$ and Hongdeung-tang has an effect that supress those factors. we can assume Hongdeung-tang has an anti-coagulation effect by those supressing effect.
함초를 이용한 고부가가치 기능성 음료 개발 연구의 일환으로, 성숙한 함초의 잎, 줄기, 씨를 대상으로 ethanol 추출물을 조제하고 이들의 항산화 및 항혈전 활성을 평가하였다. 추출물의 총 폴리페놀 함량은 잎 > 줄기 > 씨의 순으로, 총 플라보노이드 함량은 잎 > 씨 = 줄기 순으로 나타났다. 총당 및 환원당 함량은 잎과 줄기에서 유사하게 나타났으며, 씨 추출물은 잎 추출물의 1/10 정도의 낮은 총당 및 환원당 함량을 나타내었다. 추출물의 항산화 활성을 RC50로 계산한 결과, DPPH 음이온 소거능, 환원력과 nitrite 소거능은 잎 > 씨 > 줄기, ABTS 양이온 소거능은 잎 = 씨 > 줄기 순으로 나타났다. 항응고 활성 평가결과, 씨 추출물에서 우수한 트롬빈 저해, 혈액응고인자 저해가 나타났으며, 모든 추출물에서 혈소판 응집저해활성 및 인간 적혈구 용혈활성은 나타나지 않았다. 본 연구는 함초 잎과 씨를 이용한 항혈전제 개발이 가능함을 제시하고 있다.
Objective : The purpose of this study is to compare anti-thrombotic activities of 4 Rhubarb species. Methods : Rhubarb has been used as medical and edible resources worldwide for the therapy of cancer, constipation and inflammation, etc. To compare the anti-thrombotic activities among the species within rhubarb, we investigated and compared the inhibitory properties of water extracts from R. palmatum(RPE), R. officinale(ROE), R. nobile(RNE), and R. franzenbachii (RFE) on the fibrinolysis, blood coagulation and platelet aggregation. APTT and PT, blood coagulation time, were measured by apparatus of auto blood coagulation analysis that called ACL-7000. The measurement of fibrinolysis was measured and compares with the width of clear zone from melted fibrin plate. The platelet aggregation was measured and compared with inhibition rate of aggregation. Results : We found out the best species from rhubarb showing the significant fibrinolytic, anti-coagulant and anti-platelet aggregation activity. Our results show that Rheum nobile (RNE) has the most effective anti-thrombotic activity among 4 tested rhubarb. Conclusions : This study, therefore, RNE will be able to be used the development of drug which is thrombosis treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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