양막은 다양한 생체재료로 이용되어 왔으며 생체적합성과 환부의 치료효능이 우수한 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 양막을 갈아 양막스폰지를 제조하고 중간엽줄기세포를 배양한 뒤 누드마우스이식을 통하여 콜라젠스폰지와 비교하여 골형성유도능에 대한 연구를 실시하였다. 연구결과 세포의 부착과 증식면에서는 두 시료가 유사하였으나, 체내에 이식한 결과 양막스포지군에서 좀 더 많은 콜라젠 분비와 칼슘이 침착되었음을 확인하였다. 그리고 면역화학염색 결과 골형성 시 필요한 오스테오칼신과 오스테오넥틴이 좀 더 발현된 것을 관찰할 수 있었다. 따라서 양막은 골형성유도를 향상시킬 수 있는 가능성이 있음을 알 수 있었다.
이식을 위해 사용하는 사람 양막은 기증자로부터 수혜자에게 바이러스, 세균, 진균과 같은 감염성 위해인자를 전파할 위험이 있다. 따라서 적절한 소독 및 멸균 공정을 통해 이식용 양막 내재 또는 혼입 가능한 감염성 위해인자를 완벽하게 불활화하여야 한다. 본 연구에서는 인체조직은행에서 사용하고 있는 소독 공정과 멸균 공정의 바이러스 및 세균, 진균 불활화 효과를 검증하기 위해 국제적 가이드에 따라 5종의 바이러스[human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), bovine herpes virus (BHV), bovine viral diarrhoea virus (BVDV), hepatitis A virus (HAV), porcine parvovirus (PPV)]와 2종의 세균(Escherichia coli, Bacillus subtilis), 1종의 진균(Candida albicans)을 생물학적 지표로 사용하였다. 양막에 각 생물학적 지표를 첨가한 후 70% 에탄올 소독 공정, 감마선 조사 공정, 산화에틸렌 가스 멸균 공정을 실시한 다음 각 바이러스, 세균, 진균을 회수하여 정량한 후 불활화 정도를 비교하였다. 70% 에탄올 처리 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV 같은 외피 바이러스는 처리 시간 2.5분 안에 불활화되었지만, HAV와 PPV 같은 비-외피 바이러스는 에탄올에 매우 큰 저항성을 나타내었다. 감마선 2.5 kGy 조사에 의해 HIV-1, BHV, BVDV는 검출한계 이하로 완벽하게 불활화되었다. HAV와 PPV는 각각 5 kGy와 25 kGy 조사에 의해 검출한계 이하로 불활화되었다. 산화에틸렌 가스 처리에 의해 본 연구에 사용한 모든 바이러스가 검출한계 이하로 불활화되었다. 70% 에탄올 처리 공정에서 E. coli와 C. albicans는 모두 5분 안에 완벽하게 사멸하였다. 하지만 B. subtilis는 큰 저항성을 나타내었다. 감마선 조사 공정과 산화에틸렌 가스 멸균 공정에서 E. coli, B. subtilis, C. albicans 모두 완벽하게 불활화되었다.
The extrafetal transfer of $Li^{+}$ in amniotic fluid was studied in 45 pregnant rabbits. LiCl solution was administered either intravenously to mother or directly into the amniotic sac and monitored the appearance and disappearance of $Li^{+}$ in the amniotic fluid, then calculated the transfer rate of $Li^{+}$ of extrafetal origin. To study the transplacental $Li^{+}$ transfer, a solution of 150 mM LiCl was infused continuously via maternal vein (initial dose: 0.7 mmol/kg, maintaining dose: 0.03 mmol/kg/min) and the $Li^{+}$ concentration was measured in maternal blood and amniotic fluid after 60 and 120 minutes of infusion. Change in the volume of aminotic fluid was determined by Congo red dilution method at the same time. Effects of duration of gestation was not considered in this study. Extrafetal transport of $Li^{+}$ into the amniotic fluid was estimated by comparing the $Li^{+}$ concentration and volume of amniotic fluid determined before and after ligating the placental vessels. Extrafetal $Li^{+}$ transport from the amniotic fluid was determined by observing the time dependent disappearance of $Li^{+}$ and Congo red in amniotic fluid after injecting 0.5 ml solution of 15 mM or 90 mM LiCl and 50 mg/ml Congo red. Following are the results obtained: 1) During infusion of LiCl through maternal vein the ratio of the aminotic $Li^{+}$/maternal plasma $Li^{+}$ increased significantly along with the increment of fetal weight. 2) The volume of amniotic fluid of larger fetuses than 20.5 gm increased significantly during administration of LiCl while that of smaller fetuses did not change. 3) After umbilical cord ligation the $Li^{+}$ concentration of amniotic fluid of larger fetuses than 20.5 gm was decreased to $59.9{\pm}10.3%$ and $56.9{\pm}42.9%$$(mean{\pm}S.D.)$ of those of control group after 60 and 120 minutes of LiCl infusion respectively. In amniotic fluid of smaller fetuses than 20.5 gm, there was no significant difference between control and ligation groups. 4) The disappearance rate of Congo red in the amniotic fluid was $45.2{\pm}8.2%/hr$. 5) The disappearance rate of $Li^{+}$ after intraamniotic injection of LiCl depended on the amount injected. On injecting $7.5\;{\mu}mol$ LiCl, $Li^{+}$ disappeared rapidly from the amniotic fluid and the rates after 60 min and 90 min were $97.0{\pm}2.8,\;98.5{\pm}2.0%$ respectively. On injecting $45\;{\mu}mol$ LiCl, the rates were $56.0{\pm}15.4,\;78.9{\pm}14.5%$ at 60 and 90 min. 6) From the above results it was concluded: a) $Li^{+}$ transfer into the amniotic fluid increased along with the fetal growth and one half of $Li^{+}$ influx is through the extrafetal route even after the maturation of fetal kidney. b) One half of the $Li^{+}$ transfer from the amniotic fluid was through swallowing of fetus, while the remaining half was transfered rapidly through amniotic membrane, which was concentration limited.
Kim, Hyunji;Son, Daegu;Choi, Tae Hyun;Jung, Samhyun;Kwon, Sunyoung;Kim, Junhyung;Han, Kihwan
Archives of Plastic Surgery
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제40권1호
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pp.11-18
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2013
Background To minimize the inflammatory reaction and improve healing, a new modified dermal substitute composed of an atelocollagen, chondroitin-6-sulfate, and amniotic membrane (AM) was applied to full-thickness skin defects in a pig. Atelocollagen was extracted from bovine skin, and two modified dermal substitutes were generated according to the cross-linking type. Methods The AM-collagen dermal substitutes were characterized and compared with currently used dermal substitutes in a pig skin defect model. There were five experimental groups: dehydrothermal (DHT) cross-linking atelocollagen with the AM on the top (AM-DHT), DHT and chemical cross-linking atelocollagen with the AM on the top (AM-DHT/chemical), Terudermis, Integra, and AlloDerm. After $3{\times}3cm$ full-thickness skin defects on the back of a pig were created, each dermal substitutes dermal substitutes was randomly grafted on the defects. Two weeks after grafting, autologous partial-thickness skin was over-grafted on the neodermis. The take rate of the dermal substitutes, skin, and histological sections were all assessed at 1, 2, and 4 weeks postoperatively. Results More rapid healing and a higher take rate were evident in the AM-DHT and Terudermis groups. Histological examination revealed fewer inflammatory cells and more fibroblast hyperplasia in these two groups. Four weeks after surgery, the amount of newly formed collagen was significantly more appropriate in the AM-DHT group. Conclusions These observations provide supporting evidence that a newly developed amniotic-collagen dermal substitute may inhibit inflammatory reactions and promote wound healing.
Background Chitosan (CS) is a well-known antimicrobial dressing material. Moreover, widely used amniotic membranes contain growth factors beneficial for wound healing. Herein, we created a novel amnion-conjugated CS-alginate membrane dressing and tested its wound healing potency in a diabetic swine model. Methods The bovine amniotic powder growth factor contents were evaluated by protein assay, and the powder's wound healing effects were assessed in vitro by HaCaT cell scratch closure. In vivo, two minipigs developed streptozotocin-induced diabetes. Serial serum glucose measurements and intravenous glucose tolerance tests were performed to confirm their diabetic status. Twelve square-shaped wounds created on each pig's back were randomly divided into control (n = 4), CS (n = 4), and amnion-CS (AC; n = 4) groups and treated accordingly with different dressings. Wound healing in each group was assessed by measuring wound contraction over time, capturing wound perfusion with indocyanine green (ICG) angiography, and histologically analyzing inflammatory markers. Results Amniotic powder elution promoted HaCaT cell migration in the scratch wound model, suggesting its beneficial in vitro wound healing effects. In vivo, the CS and AC groups showed earlier wound contraction initiation and reepithelialization and earlier wound perfusion improvement by ICG angiography than the control group. Additionally, the wound size of the AC group at week 3 was significantly smaller than those in the control group. There was no significant difference in the numbers of acute and chronic inflammatory cells between the groups. Conclusion The amnion-conjugated CS-alginate membrane, as well as CS dressing alone, could be a favorable dressing option for diabetic wounds.
The aim of this study was to examine the presence of ${\beta}$-endorphin in female reproductive organs. A total of 104 fresh tissue samples were obtained from normal ovary, tube, endometrium, placenta, amniotic membrane and umbilical cord, and immunostained by the method using biotin-streptoavidin amplified system. The results were as follows: 1. In reproductive age, corpus luteum only showed ${\beta}$-endorphin immunostained cells but no cells in ovaries during proliferative phase of menstrual cycle were stained. 2. Secretory endometrium revealed positive reactions in the cytoplasm of glandular epithelial cells and around the vessels, while proliferative endometrium negative reactions. 3. All the tissues of menopausal women were negative to ${\beta}$-endorphin antibody. 4. In the pregnant women, there are no ${\beta}$-endorphin containing cells in the placenta, amniotic membrane and umbilical cord regardless of gestational age.
The present study was conducted to investigate gelatinolytic activities in HAM and to determine whether there are any changes in gelatinolytic activity profiles when the cells are cultured in hepatogenic medium. Placenta was obtained during caesarean section of the volunteers, with informed consent. HAM were isolated from amniotic membrane using collagenase type A HAM were cultured in hepatogenic medium for 3 weeks and the conditioned media were obtained at day 7, 14 and 21. The zymographic pattern of gelatinolytic activity of the HAM did not undergo a change during passages. When the HAM were cultured in a fibronectin-coated dishes in a hepatogenic medium, there was no significant difference of the gelatinase pattern between before and after culture. However, when bFGF was added to the culture, a dramatic increase of 62kDa and 59kDa gelatinases was observed. Interestingly, when ITS instead of FN was present, HAM-conditioned medium also showed a similar increase of both gelatinases. Immunoblotting analysis demonstrated that both 62kDa and 59kDa gelatinases were the active form of MMP-2 resulting from the turnover of MMP-2 proform. Futher study will be necessary to determine the relationship between bFGF and active MMP-2 during hepatogenesis of HAM.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제47권4호
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pp.279-285
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2021
Objectives: Wound healing is an integral part of any surgical procedure. Appropriate wound closure is critical to any successful surgical procedure, especially intraoral procedures. Various factors aid in wound healing, both pharmacological and non-pharmacological. Dehydrated human amniotic/chorionic membrane (dHACM) is an emerging bioinert material that contains anti-inflammatory properties, angiogenetic properties, osteogenic potential, and various growth factors. The purpose of this study was to evaluate the efficacy of wound healing properties of dHACM in bilateral alveoloplasty patients. Materials and Methods: A prospective split-mouth study was conducted on 10 patients. Site A received sutures with dHACM and site B was sutured without dHACM. Wound healing was assessed with the Landry, Turnbull, and Howley Index. Results: Sites A and site B were compared. A P<0.05 and a test value of 22 was obtained, indicating a statistical difference between the two sites. Conclusion: Our study showed better healing with dHACM than without.
4년령 중성화한 수컷 시츄견이 우안에 녹는 궤양이라는 기왕력으로 전북동물의료센터에 내원했다. 안과 검사결과 우안에 각막 전체의 70%에 해당하는 각막 연화를 동반한 각막 천공이 관찰되었다. 또한 홍채 탈출과 섬유소 응괴가 각막 천공 중앙부에서 관찰되었다. 좌안의 위협 반사와 대광 반사는 정상이었다. 각막 결손 부위가 너무 컸기 때문에 각결막 판을 이용한 방법이나 각막 직접 봉합을 배제하였으며 말양막이식술을 시행하기로 결정했다. 말양막은 각막 윤부에 전체 각막을 다 덮을 수 있도록 9-0 나일론 봉합사를 이용하여 봉합을 실시했다. 양막이식 후 79일 째 육아조직과 색소침착이 다소 남아있었으나 우안의 위협 반사와 눈부심 반사는 모두 정상이었다. 비록 색소 침착과 육아조직이 각막에 남아있기는 했지만 개에서 말양막이식술은 녹는 궤양으로 기인한 각막 천공에서 시행해 볼 수 있는 유용한 치료법으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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