In the production of a low cost bacterial insecticide, it is important to produce a high spore concentration using low price substrates. Experiments were carried out to investigate the effects of the addition of mineral salts and glucose, and of dissolved oxygen concentration on the cell growth and spore formation of Bacillus thuringiensis var aizawai using a cheap wheat and soybean meal in the batch culture. The maximum viable cell number was 1.2${\times}$109 CFU/mL at 12 hr culture and spore yield was 54.2% at 74 hr culture using an industrial medium containing 20 g/L wheat meal and 30 g/L soybean meal under 1.0 vvm aeration and 200 rpm agitation. The cell growth and the spore formation were not enhanced by the addition of mineral salts in industrial medium, whereas th addition of 10g/L glucose decreased the cell growth and spore formation. We could obtain a maximum viable cell number of 2.2${\times}$109 CFU/mL and spore number of 1.9${\times}$109 CFU/mL at the dissolved oxygen concentration of 60% of saturation. The spore concentration was enhanced approximately by 2 times as compared to the dissolved oxygen concentration of 50%. In the bench-scale culture, the maximum viable cell and spore number were 2.5${\times}$109 CFU/mL, and 2.2${\times}$109 CFU/mL, respectively under 1.0 vvm aeration and 400 rpm agitation. The spore yield was 88% based on the maximum viable cell number. As a result, it was confirmed that the production of high spore concentration could be obtained by a bench-scale culture using an industrial medium.
Kim, Young-Rim;Cho, Min-Su;Oh, Se-Mun;Kim, Sung-Woo;Youn, Young-Nam;Yu, Yong-Man
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.14
no.2
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pp.123-132
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2010
Six populations of the diamondback moth, Plutella xylostella, were collected from the different national areas for resistance and reared in laboratory for two sensitive population. These populations of P. xylostella were examined the developed resistance against commercial products of Bacillus thuringiensis. There were 3 products with B. thuringiensis subsp. kurstaki including Tyuneup$^{(R)}$, Thuricide$^{(R)}$ and Geumulmang$^{(R)}$ and 2 products with B. thuringiensis subsp. aizawai including Tobagi$^{(R)}$ and Scorpion$^{(R)}$. The sensitive population of diamondback moths were provided from National Academy of Agricultural Science (NP) and Highland Agriculture Research Center (GR population) and field populations were caught from 6 different national areas. Resistance against Tyuneup$^{(R)}$ was developed 4.8 and 2.5 times in SP and HS compared with GR population of diamondback moth, respectively. In case of Geumulmang$^{(R)}$, it was developed 9.9 and 6.8 times in SP and NM population compared with NP population, respectively. Otherwise, Tobagi$^{(R)}$ was showed higher resistance in HS than any other population compared with GR population, however, Scorpion$^{(R)}$ that is a same strain with Tobagi$^{(R)}$, was showed only double resistance to SP population. It was supposed that the development of resistance to B. thuringiensis might be caused by the continuous application of the specific commercial product at the specific area. So, we need to use the commercial products of B. thuringiensis in rotation with different B. thuringiensis strains. In the other hand, when HS population with highest resistance were reared in laboratory, their resistance ratio was rapidly dropped to 1.1 times at second generation. We have to examined the resistance mechanism of the diamondback moth to B. thuringiensis strains.
For the environment-friendly control of beet armyworm, Spodoptera exigua, in spring onion fields, we have examined an alternative application method. Twenty-five insecticides registered for spring onion were tested for control effect against the beet armyworm in the laboratory, then the best 9 chemical and a single biological insecticides were selected and compared with 2 new isolates of Bacillus thuringiensis in a polyvinyl house. After that, 4 chemical and 3 B. thuringiensis treatments were used in the field for the control of beet armyworm in the spring onion. Two application methods are used: one is triple treatments with the same chemical and the other is alternative application with different chemicals and B. thuringiensis for 7 days intervals. Indoxacarb WP - chlorfluazuron EC - B.t. var. kurstaki CAB141 and indoxacarb WP - methoxyfenozide + spinosad SC - Chlorfluazuron EC - B.t. var. aizawai CAB109, B.t. var. kurstaki CAB141 showed greater than 78% mortality of beet armyworm larvae and greater than 43% damage decrease in spring onions infested by beet armyworm. These results showed that alternative applications had higher control effect than any other applications. It was suggested that alternative applications with microbial biological agents such as B. thuringiensis might minimize the development of insecticide resistance and might be used as the environment-friendly control of the beet armyworm.
Kim, Jong Cheol;Yu, Jeong Seon;Song, Min Ho;Lee, Mi Rong;Kim, Sihyeon;Lee, Se Jin;Kim, Jae Su
Korean journal of applied entomology
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v.55
no.4
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pp.319-327
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2016
Chemical pesticides have been used to control persimmon pests, however the overuse of the pesticides caused insect resistance, followed by failure in pest management and residual problems. Herein we investigate the potential of eco-friendly organic pesticides (EFOP) on the control persimmon pests, Stathmopoda masinissa (persimmon fruit moth) and Riptortus pedestris (bean bug). Ten commercially available plant-derived organic pesticides and one microbial pesticide were sprayed on the target insects in laboratory conditions. The chemical pesticide, buprofezin+dinotefuran wettable powder served as a positive control. In the first bioassay against persimmon fruit moth, alternatively Plutella xylostella larvae were used due to the lack of persimmon fruit moth population from fields, and three organic pesticides showed high control efficacy, such as pyroligneous liquor (EFOP-1), the mixture of Chinese scholar tree extract, goosefoot and subtripinnata extracts (EFOP-2) and Bacillus thuringiensis subsp. aizawai NT0423 (EFOP-11). When the three selected organic pesticides were treated on the persimmon fruit moths, the EFOP-2 treatment showed the highest control efficacy: 27.7% (5 days), 13.3% (7 days) and 6.7% (10 days) of survival rates. In the bioassay against bean bugs, the mixture of Chinese scholar tree, goosefoot and subtripinnata extracts (EFOP-2 and EFOP-9) and the extracts of sophora and derris (EFOP-10) showed high control efficacy, particularly the highest in the treatment of EFOP-2: 20.0% (5 days) and 16.7% (10 days) of survival rates. These results suggest that the mixture of Chinese scholar tree, goosefoot and subtripinnata extracts (EFOP-2) has high and multiple potential in the management of the persimmon pests.
LEE, YUNG KEUN;Faust, Robert M.;KANG, SEOK KWON;McCawley, Patricia E.;Meyers-Dowling, Carol L.
Korean journal of applied entomology
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v.24
no.1
s.62
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pp.45-50
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1985
The use of a modified procedure for the isolation of extrachromosomal DNA of low to high molecular weight, followed by agarose gel electrophoresis of the crude lysates, provided a simple screening procedure for detecting plasmids ranging in molecular weights from approximately 1 to more than 135 megadaltons from serovars of Bacillus thuringiensis. The procedure provides for a relatively large-volume stable lysate for isolation of plasmids for restriction endonuclease mapping and cloning procedures. The method was used for screening of plasm ids in 6 differenentially effective serovars of B. thuringiensis toxic to dipteran and lepidopteran insects. Relatively large plasmid DNAs of masses above 50 megadaltons (Mdal) were isolated from all of the serovars examined using this technique. The number of extrachromosomal DNAs detected in serovars of B. thuringiensis was 8 for israelensis, 10 for kurstaki, 13 for aizawai, 2 for dendrolimus, 1 for finitimus, and 6 for yunnanensis. Smaller plasmid DNAs were isolated in four of the six serovars that ranged in mass down to approximately 2 Mdal.
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