Water-insoluble chitosan with molecular weight of 2,000,000, 500,000, 80,000, and 40,000 and more than 90% of degree of deacetylation were used to test antibacterial activity of chitosan against a pathogenic bacteria, methicillin resistant Staphylococcus aureus(MRSA), which is being issued in the world. As experimental method, Agar plate Smear Method and Agar plate Contact Method were used. The moleculur weight of chitosan didn't exert significant influences on its antibacterial activity against MRSA but chitosan having molecular weight 40,000, 80,000 and 150,000 showed the excellent antibacterial activity. The antibacterial efHciency was excellent in applying it after chitosan was dissolved in acetic acid solution, while the antibacterial efficiency was not expressed nearly in case of applying after chitosan was dissolved in neutral water. Therefore, it is considered that chitosan can show the antibacterial efficiency only if a positive ion status of -NH₃/sup +/ is maintained. MIC of chitosan/acetic acid solution and cotton fabrics finished with chitosan/acetic acid solution showed in concentration of 0.05%.
This study was performed to compare the performance of Sanita-Kun dry medium culture plate with those of traditional culture medium and Petrifilm dry medium culture plate for the enumeration of the mesophilic aerobic bacteria in milk, ice cream, ham, and codfish fillet. Mesophilic aerobic bacteria were comparatively evaluated in milk, ice cream, ham, and codfish fillet using Sanita-Kun aerobic count (SAC), Petrifilm aerobic count (PAC), and traditional plate count agar (PCA) media. According to the results, all methods showed high correlations of 0.989~1.000 and no significant differences were observed for enumerating the mesophilic aerobic bacteria in the tested food products. SAC method was easier to perform and count colonies efficiently as compared to the PCA and PAC methods. Therefore, we concluded that the SAC method offers an acceptable alternative to the PCA and PAC methods for counting the mesophilic aerobic bacteria in milk, ice cream, ham, and codfish fillet products.
We compared the efficacy and applicability of a modified formalin-ether concentration technique (M-FECT) to the conventional FECT (C-FECT) and the agar plate culture (APC) method for the detection of Strongyloides stercoralis larvae. For this purpose, we used 600 human fecal specimens collected in an endemic area of southern Thailand. In the M-FECT, we used 2 layers of wire meshes, instead of gauze, to avoid the loss by absorption/adhesion of larvae to the gauze during filtration, and we reduced the exposure time of S. stercoralis larvae in stool samples to formalin. By such simple modifications, the efficacy of M-FECT has become comparable to APC and was much better than that of C-FECT for the diagnosis of strongyloidiasis.
This experiment was performed to investigate effects of zinc containing solution on the major normal flora Staphylococccus aureus, Streptococus mutans and Candida albicans and to observe the variation according to anionic change and concentration difference. Zinc chloride, zinc iodide and zinc acetate solution were added to werially diluted broth culture so that each final concentration might be 0.25%, 0.5%. 1%. After that, 100ul of each aliquot was spreaded on each selective media plate( Mannitol Salts Agar plate for Staphylococcus aureus, Mitis Salivarius Agar plate for Streptococcus mutans and Sabouraud Destrose Agar plate for Candida albicans). The % killing was calculated bu CFU count after incubation under the appropriate condition. 1. zinc iodide, zinc chloride, and zinc acetate solutions showed inhibitory effects on Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans and Candida albicans. 2. The inhibitory effects on Staphylococcus aureus were ranked in order of ainc iodide, zinc chloride and zinc actate. 3. The inhibitory effects on Streptococcus mutans were ranked in orfer of zinc iodide, zinc chloride and zinc acetate. 4. the inhibitory effects on Candida albicans showed no difference among zinc iodide, zinc chloride and zinc acetate. 5. The inhibitory effects of zinc chloride and zinc acetate on Staphylococcus aureus and Streptococcus mutnas showed increasing pattern as the concentration increase. But the inhibitory effects of zinc iodide on Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans showed no apparent difference according to concentrations and it was the case with the inhibitory effects of zinc iodide, zinc chloride and zinc acetate on Candida albicans.
Total 29 Monascus strains were isolated from Ang-Khak and 4 of them were selecte based on the relative intensity of soluble red pigment and growth rate. The optimum growth temperature of the selected isolates was 32.5$^{\circ}C$ on malt extract agar(MEZ) plate. The optimum growth pH was 5.0 on czapek yeast extract agar plate, while it was pH 6.2 or 6.5 on MEA plate. Isolate No. 116, especially, showed the strongest animicrobial activity aganist Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus but much less aganist Escherichia coli and Enterobacter aerogenes. The maximun antimicrobial activity of isolate No. 116 against St. aureus was achieved at initial pH 5.3 on rice extract broth. The acitivity was increased with increasing amount of culture broth concentrate of isolate No. 116.
The present study was performed to reveal the current status and risk factors of Strongyloides stercoralis infections in the villages of Kenethao district, Xayaburi Province, Lao PDR. Fecal specimens were collected and examined for S. stercoralis using Koga-agar plate culture technique. Among 516 individuals, the prevalence of S. stercoralis and hookworm infection was 44.2% and 17.1%, respectively. Co-infection was detected in 13.2% of the cases. The prevalence did not significantly differ between males and females (P=0.193). However, the prevalence of S. stercoralis infection increased significantly with age (P=0.041). Of the risk factors examined, both performing farming activities (P=0.001) and walking barefoot when going outside of the house (P=0.003) showed significant correlations with S. stercoralis infections. Our results suggest that S. stercoralis is highly endemic in this area. The National Helminth Control Program of Lao PDR should take actions to control S. stercoralis infection. In addition, provision of health education about the benefits of wearing shoes would be important for reducing infection in the study area. Moreover, the application of high-sensitivity diagnostic approaches is needed to obtain the true impact of S. stercoralis infections in all rural communities in order to provide surveillance activities in Lao PDR.
The arylsulfatase gene (astA, 984 bp ORF) from the P. carrageenovora genome was amplified by PCR and subcloned into the pET21a vector. When the constructed plasmid pAST-A1 (6.4 kb) was introduced into E. coli BL21(DE3), the transformant on the LB plate containing IPTG showed a hydrolyzing activity for 4-methylumbelliferyl sulfate and p-nitrophenyl sulfate. The highest arylsulfatase activity (2.1 unit/ml) was obtained at 10 mM IPTG. Most arylsulfatase activity was found in the cell lysate, whereas no significant activity was detected in the culture supernatant. The molecular weight of the recombinant enzyme was estimated to be 33.1 kDa by SDS-PAGE. After the reaction of agar with arylsulfatase for 12 h at $40^{\circ}C$, the gel strength of the agar increased by 2-fold, and 73% of the sulfate in the agar had been removed. This result suggests that arylsulfatase expressed in E. coli could be useful in the production of electrophoretic grade agarose.
In virucidal efficacy testing, the chemical inactivation cannot be determined for all viruses due to the difficulties or the inability to culture sufficiently or the risk of exposure to the viruses. Therefore, disinfectants against these viruses could be evaluated by different methods and surrogate viruses are used as alternative. In this study we developed a method for efficacy testing of veterinary disinfectants using one of the candidate surrogate viruses, bacteriophage MS2, as part of the research on the selection of surrogate viruses for efficiency of efficacy testing of veterinary disinfectants. This method is based on the Animal and Plant Quarantine Agency (APQA) guidelines for efficacy testing of veterinary disinfectants. Bacteriophage and disinfectant are reacted in suspension in accordance with the APQA guidelines and then a newly established double agar layer method is applied for the efficacy test. The double agar layer method is summarized as follows: 1) The bottom agar with 1.5% agar is boiled and cooled before poured into petri dishes at volume of 20 mL, and dried under biological safety cabinet. 2) The top agar with 0.7% agar is boiled and kept at 50℃ before E. coli culture was seeded. 3) The serially diluted bacteriophage MS2-disinfectant mixtures 0.05 mL and E. coli host 0.01 mL (OD600 0.2~0.3) are mixed with 5 mL of top agar and incubate them at 50℃ for 5 min for reaction. 4) The resulting mixture is poured over top of a bottom agar plate and rocked sufficiently to ensure that the top agar covers the entire surface of the bottom agar. 5) The double agar layer is then placed under biological safety cabinet to allow the agar layer to solidify and subsequently incubated at 37℃ for 24 hr. 6) Following incubation, the plates may be inspected for plaques and record results.
Purpose: The emergency of multi-drug resistant stains of bacteria represents a challenge in the field of plastic surgery. Especially, MRSA(methycillin-resistant Staphylococcus aureus) and Pseudomonas aeruginosa have strong pathogenicity as well as multi-drug resistance so that they have become a lot more problematic strains. This study has been planned to reduce the bacterial burden by applying $Acticoat^{(R)}$(Smith & Nephew Healthcare, Hull, England)dressing into the chronic wounds infected by multi-drug resistant strains and to facilitate their healing. Methods: Nanocrystalline silver dressings($Acticoat^{(R)}$) were applied to chronic wound infected by MRSA or Pseudomonas aeruginosa. Multi-drug resistant bacteria were smeared over a slide glass using sterilized cotton swabs and gram stains were performed directly before and after applying $Acticoat^{(R)}$ dressings at 1, 24, 48 and 72 hours. The gram-stained slides were observed using an optical microscope magnified 1000 times(${\times}1000$). The bacterial counts of the control group(0 hour) were compared to those of the experimental groups(1, 24, 48, and 72 hour). Paired T-test was used to assess a statistical significance. MRSA was cultured in two BAPs(blood agar plate) and two MacConkey plates with streak plate method. None were interventions on one culture plate, while on the other culture plate, $Acticoat^{(R)}$ was placed in a square shape and cultured for 72 hours at $37^{\circ}C$, then plates were examined. Pseudomonas aeruginosa was cultured in the same manner as MRSA. Results: There are the large amount of declination of bacterial counts with statistical significance after $Acticoat^{(R)}$ dressing. The bacteria grew in culture plate without specific intervention, but no bacteria grew in culture plate with applying of $Acticoat^{(R)}$ dressing. Conclusion: We believe that $Acticoat^{(R)}$ dressing could be used as an effective method of treating chronic wounds which are infected by multi-drug resistant organisms.
To investigate the antibiotic constituents of Korean basidiomycetes the carpophores of the wood-rotting basidiomycetes were collected from several locations of Korea, and from them 17 mycelial strains were isolated on potato-dextrose-agar plates supplemented with tetracycline ($20\;{\mu}g/m{\ell}$. The isolated strains were shake-cultured in glucosepeptone-yeast extract medium and then the antibacterial activities of the culture filtrates were assessed by disc-plate method. Among them, 12 strains (70.6%) were active, and basidiomycete strain LMCB-109 (Daedalea quercina) and LMCB-116 showed potent activities against all the six bacterial target organisms including Serratia marcescens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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