Li, Y.;Ma, Q.G.;Zhao, L.H.;Guo, Y.Q.;Duan, G.X.;Zhang, J.Y.;Ji, C.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.27
no.6
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pp.907-915
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2014
Alpha-lipoic acid (${\alpha}$-LA) is not only involved in energy metabolism, but is also a powerful antioxidant that can protect against hepatic oxidative stress induced by some drugs, toxins, or under various physiological and pathophysiological conditions. Here, we investigated the effect of ${\alpha}$-LA against liver oxidative damage in broilers exposed to aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$). Birds were randomly divided into four groups and assigned different diets: basal diet, 300 mg/kg ${\alpha}$-LA supplementation in basal diet, diet containing 74 ${\mu}g/kg$$AFB_1$, and 300 mg/kg ${\alpha}$-LA supplementation in diet containing 74 ${\mu}g/kg$$AFB_1$, for 3 weeks. The results revealed that the addition of 300 mg/kg ${\alpha}$-LA protected against the liver function damage of broilers induced by chronic low dose of $AFB_1$ as estimated by a significant (p<0.05) change in levels of plasma total protein, albumin, alkaline phosphatase and the activities of liver glutamic-oxalacetic transaminase and glutamic-pyruvic transaminase. The histopathological analysis also showed that liver tissues were injured in the $AFB_1$ diet, but this effect was alleviated by the addition of 300 mg/kg ${\alpha}$-LA. Additionally, $AFB_1$ induced a profound elevation of oxidative stress in birds, as indicated by an increase in malondialdehyde level, a decrease in glutathione peroxidase activity and a depletion of the glutathione content in the liver. All of these negative effects were inhibited by treatment with ${\alpha}$-LA. Our results suggest that the inhibition of $AFB_1$-induced excess production of lipid peroxides and the maintenance of intracellular antioxidant status may play important roles in the protective effects of ${\alpha}$-LA against $AFB_1$-induced oxidative damage in the liver.
We used fluorescence detector to analyse total aflatoxins (G1, G2, B1, B2) with TFA (Trifluoroacetic acid) derivation method and PHRED (Photochemical reactor enhanced detection) method. PHRED method was superior in reproduction and convenience, but TFA derivation method was superior in selectivity and sensitivity. The recovery rate of aflatoxin B1, B2, G1 were more than 80%, and G2 was more than 70%. The detection limit of B1, B2, G1 and G2 were respectively 0.05, 0.05, 0.2 and $0.1\;{\mu}g/kg$. Confirmed method was used to analyse total aflatoxins in total 316 items as 9 kinds 137 dried fruits and 10 kinds 179 spices. By the result, Aflatoxins were detected in 27 dried fruits (19.7%) and in 87 spices (48.6%).
Total aflatoxin ($B_1+B_2+G_1+G_2$) maximum levels of 15 ${\mu}g/kg$ ($B_1=10\;{\mu}g/kg$) were set for grain, beans, peanut, nuts & their processed food (grinding, cutting etc.), processed cereal product & processed bean product, confectionaries (peanut or nut-containing food), soybean paste, red pepper paste, dried red pepper, processed com products for popcorn and steamed rice. The maximum levels for aflatoxin $M_1$ are 0.5 ${\mu}g/kg$ for raw milk and milks before manufacturing processing. The patulin maximum level is 50 ${\mu}g/kg$ in apple juice and apple juice concentrate (including concentrate to use as raw material and converted by concentration multiple). The ochratoxin A is managed at the maximum levels of 5 ${\mu}g/kg$ in wheat, barley, rye, coffee beans and roasted coffee, 10 ${\mu}g/kg$ in instant coffee and raisin, 2 ${\mu}g/kg$ in Grape juice, concentrated grape juice as reconstituted and wine. The fumonisins ($B_1+B_2$) maximum levels are 4000 ${\mu}g/kg$ in com, 2000 ${\mu}g/kg$ in com processed food (grinding, cutting etc.) and com powder, 1000 ${\mu}g/kg$ in processed com products. Standards for mycotoxins in food have been established and the mycotoxin risk in food is managed reasonably and scientifically, based on risk assessment and exposure analysis.
For screening antimutagenic effects, the effects of 95 medicinal plants on the mutagenicity of aflatoxin $B_1$$(AFB_1)$ and benzo(a)pyrene [B(a)P] were investigated using the SOS chromotest with Escherichia coli PQ37. The mutagenicity induced by $AFB_1$ or B(a)P was reduced over 26% by 2 kinds and 8 kinds of medicinal plant, respectively. Eight plants (Bupleurum falcatum, Corydalis ternata, Gasfrodia elata, Ostericum koreanum, Pinellia ternatia, Poncirus trifoliata, Prunus armeniaca and Rehmannia glutinosa) were also shown to have inhibitory effects on both $AFB_1$ and B(a)P. The mutagenicity induced by $AFB_1$ or B(a)P was increased over 20% by 46 kinds and 2 kinds, respectively, and 8 medicinal plants (Chrysanthemum indicum, Cinnamomum cassia, Cyperus rotundus, Morus bombycis, Patrinia scabiosaefolia, Petasites japonicus, Polygonum multiflorium, Thyja orientalis) increased significantly the mutagenicity of both mutagens. However the 8 plants themself did not show the mutagenicity in SOS Chromotest with S-9 mix alone. This result suggests that the above 8 plants may have the co-mutagenic activities. In two bacterial mutation system, SOS Chromotest and Ames test, the mutagenic or antimutagenic activities of some medicinal plants wire similar except Ostricum koreanum, Eugenia caryophyllata and Scutellaria baicalensis.
Substantial amount of caryophyllene oxide (CPO) is present in the essential oils of traditionally-used folk medicinal plants and herbal spices. The CPO, produced via chemical and/or enzymatic reaction of caryophyllene (CP), has largely being used as a flavoring component and exhibited a variety of biological activities. Now, we report the antimutagenic activity of CPO determined by Ames's preincubation test. S-9 fraction was prepared from the liver of rats treated with Arochor 1254. Anatoxin $B_1\;(AFB_1)$ and 2-amino-3-methylimidazo[4,5-f]quinoline (IQ) were used as mutagens. Reduction of mutagenicity of $AFB_1$ or IQ for S. typhimurium TA98 and TA100 by CPO was found to be a dose-dependant manner. CPO (500 ${\mu}g/plate$) reduced mutagenicity of AEB1 for S. typhimurium TA98 and TA100 to 89% and 71%, respectively. For IQ, similar results were observed against S. typhimurium TA98 and TA100, resulting in the inhibition percentage of 77% and 51%, respectively. CP also reduced mutagenicity of AEB1 and IQ for S. typhimurium TA98 and TA100, but the reduction rate was somewhat lowered relative to that of CPO. These results indicate that CPO could be developed as a potent antimutagenic flavoring agent.
A 50 day feeding trial was conducted with White Leghorn (WL) laying hens, 42 weeks old, to determine if feeding of varying levels of aflatoxin (AF), ochratoxin A (OA) or their combinations has any effect on their performance and egg quality parameters. Feeding of $T_4$, $T_7$, $T_8$, $T_9$ and $T_10$ caused significant reduction in feed intake of hens. Hen day egg productions were significantly reduced at all the levels of toxins except 0.5 ppm of AF. Maximum reduction in egg production was noticed at 2 and 4 ppm of AF and OA, respectively. Average body weight and egg weight were not affected by toxin feeding. The feed efficiency in terms of net feed efficiency and feed consumed per dozen egg produced was significantly reduced at higher levels of both the toxins and their combinations. Feed consumption for production of 1 kg egg mass remained uninfluenced due to aflatoxin feeding whereas significant increase in the value of the same was noticed at 4 ppm level of OA and combination of 1 and 2 ppm of AF and 2 and 4 ppm of OA ($T_9$ and $T_10$), respectively. Various levels of OA (1-4 ppm) and all the combination of two toxins ($T_8$, $T_9$ and $T_10$) significantly altered the shape index of eggs in laying hens. The shell thickness was significantly reduced by higher level of AF (2 ppm), OA (2 and 4 ppm) and their combination. Albumen index, Haugh Unit and yolk index remained unchanged due to incorporation of toxins in the diet. It is concluded that AF, OA either singly or in combination at higher levels could depress the performance in terms of egg production and feed efficiency significantly. The egg quality parameters i.e. shape index and shell thickness were also significantly affected.
Kim, Soohee;Kim, Kwang-Nam;Kim, Hyobi;Song, Jae-Young;Park, Sung-Won
Korean Journal of Poultry Science
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v.43
no.2
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pp.111-118
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2016
Mycotoxins are secondary metabolites produced by molds, such as Aspergillus, Fusarium and Penicillium, that have adverse effects on animals and humans. Aflatoxin, ochratoxin, zearalenone, fumonisin and deoxynivalenol are the mycotoxins of greatest agro-economic importance and cause acute disease called mycotoxicoses. Mycotoxicosis in poultry birds results in decreased meat/egg production, immunosuppressant, and hepatotoxicosis. Some of toxins or their metabolites may be retained in animal or human tissues and induce health problems. This study was designed to develop a sensitive liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the simultaneous detection and quantification of mycotoxins, such as aflatoxin $B_1$, aflatoxin $M_1$, ochratoxin A, zearalenone, fumonisin B and deoxynivalenol, in chicken liver and kidney tissues. The mycotoxins were extracted and purified using modified QUECHERS methods, separated by LC and detected by an electrospray ionisation interface (ESI) and tandem MS. Good precision and linearity were observed for most of six mycotoxins. The recovery test for each mycotoxin in liver and kidney tissues mostly indicated good average recovery rates between 80.94% and 98.10% and the coefficient of variation mostly under 13.78%, except for aflatoxin $M_1$ and fumonisin $B_1$. The limit of detection (LOD) for six mycotoxins was $7.6{\sim}145.79{\mu}g/kg$ in liver tissues and $6.07{\sim}197.20{\mu}g/kg$ in kidney tissues. The quantification limits (LOQ) for 6 mycotoxins were in the range $23.04{\sim}441.78{\mu}g/kg$ in liver tissues and $18.40{\sim}597.59{\mu}g/kg$ in kidney tissues, respectively. The developed multi-mycotoxin method in this study permits simultaneous, simple, and rapid determination of several co-existing mycotoxins in chicken liver and kidney tissues.
Kim, Sung-Hee;Cha, Sang-Ho;Karyn, Bischoff;Park, Sung-Won;Son, Seong-Wan;Kang, Hwan-Goo
Toxicological Research
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v.27
no.2
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pp.125-131
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2011
Through the present study, we produced a monoclonal antibody against aflatoxin B1 (AFB1) using AFB1-carboxymethoxylamine BSA conjugates. One clone showing high binding ability was selected and it was applied to develop a direct competitive ELISA system. The epitope densities of AFB1-CMO against BSA and KLH were about 1 : 6 and 1 : 545, respectively. The monoclonal antibody (mAb) from cloned hybridoma cell was the IgG1 subclass with ${\lambda}$-type light chains. The $IC_{50}s$ of the monoclonal antibody developed for AFB1, AFB2, AFG1 and AFG2 were 4.36, 7.22, 6.61 and 29.41 ng/ml, respectively, based on the AFB1-KLH coated ELISA system and 15.28, 26.62, 32.75 and 56.67 ng/ml, respectively, based on the mAb coated ELISA. Cross-relativities of mAb to AFB1 for AFB2, AFG1 and AFG2 were 60.47, 65.97 and 14.83% in the AFB1-KLH coated ELISA, and 59.41, 46.66 and 26.97% in the mAb coated ELISA, respectively. Quantitative calculations for AFB1 from the AFB1-Ab ELISA and AFB1-Ag ELISA ranged from 0.25 to 25 ng/ml ($R^2$ > 0.99) and from 1 to 100 ng/ml ($R^2$ > 0.99), respectively. The intra- and inter-assay precision CVs were < 10% in both ELISA assay, representing good reproducibility of developed assay. Recoveries ranged from 79.18 to 91.27%, CVs ranged from 3.21 to 7.97% after spiking AFB1 at concentrations ranging from 5 to 50 ng/ml and following by extraction with 70% methanol solution in the Ab-coated ELISA. In conclusion, we produced a group specific mAb against aflatoxins and developed two direct competitive ELISAs for the detection of AFB1 in feeds based on a monoclonal antibody developed.
Totally, one hundred and sixty 1-day-old Ross 308 broiler chicks were fed with a diet containing 0, 0.5, 1.0, and 2.0 mg of aflatoxin $B_1(AFB_1)/kg$ of feed for 21 days. Body weight was lower for the $AFB_1$-treated broilers than for the control group. At 14 and 21 DPF, the broilers fed with 2.0 mg of $AFB_1/kg$ of feed weighed significantly lower than those of the other groups (p<0.05). Relative liver weights increased significantly in a dose-dependent manner, and relative spleen weights were significantly high in the chicks fed with 2.0 mg of $AFB_1/kg$ of feed at 21 DPF (p<0.001). Biochemical analyses showed that total protein and albumin levels decreased significantly at 7 and 14 DPF for the chicks of the group fed with 2.0 of mg $AFB_1/kg$ of feed, compared with those fed with 0.5 and 1.0 mg of $AFB_1/kg$ of feed (p<0.05). AST and ALT levels increased significantly at 14 and 21 DPF (p<0.05), and the AST levels, particularly, increased dose-dependently (p<0.05). Histopathological analyses showed that the liver tissues of the $AFB_1$-treated chicks showed significant lesions, including hemorrhage, hepatocyte necrosis, inflammatory cell infiltration, and fatty degeneration. The severity of both hepatocyte necrosis and inflammatory cell infiltration appeared to increase dose- and time-dependently. Similarly, hepatic fibrosis increased dose-dependently (p<0.05). The results of this study could improve our understanding of parameters used for evaluating aflatoxicosis in poultry.
The inhibitory effects of various extracts from Chinese pepper on the mutagenicity and the growth of MG-63 human osteosarcoma cells were studied. Chinese pepper was extracted with methanol and then the methanol extract was further fractionated by using hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol. The methanol extract of Chinese pepper revealed the strong antimutagenic activity on the aflatoxin B1(AFB1) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Ames mutagenicity test and SOS chromotest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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