• 제목/요약/키워드: acid-stable ${\alpha}-amylase$

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Novel $\alpha$-Glucosidase from Extreme Thermophile Thermus caldophilus GK24

  • Nashiru, Oyekanmi;Koh, Suk-Hoon;Lee, Se-Yong;Lee, Dae-Sil
    • BMB Reports
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    • 제34권4호
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    • pp.347-354
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    • 2001
  • $\alpha$-Glucosidase of an extreme thermophile, Thermus caldophilus GK24 (TcaAG), was purified 80-fold from cells to a homogeneous state and characterized. The enzyme exhibited optimum activity at pH 6.5 and $90^{\circ}C$, and was stable from pH 6.0 to 85 and up to $90^{\circ}C$. The enzyme had a half-life of 85 minutes at $90^{\circ}C$. An analysis of the substrate specificity showed that the enzyme hydrolyzed the non-reducing terminal unit of $\alpha$-1,6-glucosidic linkages of isomaltosaccharides and panose, $\alpha$-1,3-glycosidic bond of nigerose and turanose, and $\alpha$-1,2-glycosidic bond of sucrose. The gene encoding the TcaAG was cloned, sequenced, and sequenced in E. coli. The nucleotide sequence of the gene encoded a 530 amino acid polypeptide and had a G+C content of 68.4% with a strong bias for G or C in the third position of the codons (93.6%). A sequence analysis revealed that TcaAG belonged to the $\alpha$-amylase family. We suggest that this monomeric, thermostable, and broad-acting $\alpha$-glucosidase is a departure from previously exhibited specificities. It is, therefore, a novel $\alpha$-glucosidase.

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국내 주요 화본과 조사료의 영양성분 간 상관관계 (Correlation between Nutrient Components of Grass Roughages Mainly Used in Korea)

  • 김명화;서인준;김준선;이상락
    • 한국초지조사료학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.169-176
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    • 2005
  • 본 연구에서는 국내에서 반추가축용 조사료 원으로 많이 사용하고 있는 화본과 수입조사료 6종(bermuda grass hay, klein grass hay, oat hay, orchard grass straw, tall fescue straw and timothy hay)에 대하여 최근 NRC의 nutrient requirements of daily cattle(7th revised edition, 2001)에서 권장하는 사료의 영양성분 분석방법에 따라 일반조성분과 함께 heat-stable $\alpha-amylase$ treated neutral detergent fiber (aNDF), acid detergent fiber (ADF), acid detergent lignin(ADL), neutral detergent insoluble crude protein(NDICP)과 acid detergent insoluble crude protein(ADICP) 등의 함량을 분석하고 영양성분간의 Pearson의 상관계수를 산출하였다. 조사료에 따라 다소 차이는 있으나 oat hay는 CP와 NDICP(p<0.05), CP와 ADICP(p<0.01)의 상관관계가 높게 나타났고, orchard grass straw는 CP와 NDICP의 상관관계가 높게 나타났다(p<0.05). Tall fescue straw도 CP와 NDICP의 상관관계가 높게 나타났으며(p<0.01), timothy hay는 CP와 ADICP의 상관관계가 높게 나타났다(p<0.05). Klein grass hay는 CF와 aNDF (p<0.01), oat hay는 CF와 ADF(p<0.05), orchard grass straw는 CF와 ADL(p<0.05), tall fescue straw는 CF와 aNDF(p<0.01), CF와 ADF(p<0.01), timothy hay는 CF와 aNDF(p<0.01), CF와ADF(p<0.05), CF와 ADL(p<0.01)에서 높은 상관관계를 나타내었다. 이렇게 영양성분 간에 상관관계가 높은 성분들 간에는 앞으로 조사료의 영양성분에 영향을 미치는 제 요인들을 고정하여 상관관계를 조사하고, 분석점수를 많이 하여 회귀식을 만들 수 있다면 수입조사료 평가에 실질적인 적용이 가능할 것으로 생각된다.

Aspergillus ustus의 Exo-dextranase의 특성에 관한 연구 (Characterization of Exo-dextranase from Aspergillus ustus)

  • 이건주;이형환
    • 한국균학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.15-21
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    • 1983
  • 정제된 Aspergillus ustus의 dextranase 특성을 조사하기 위하여 최적 pH 최적온도 및 열 안정성 금속이온의 영향 및 분해산물을 조사하였다. 기질로는 dextran을 사용했다. 조사결과 dextranase의 활성 최적 pH는 6.5였으며, 작용 최적온도는 $40^{\circ}C$이고, $30^{\circ}C{\sim}35^{\circ}C$에서 비교적 분해능이 좋았고, 열 안전성은 $50^{\circ}C$에서 1시간 처리한 경우 약 91%의 잔존역가를 나타내고, $70^{\circ}C$에서는 약 38%의 잔존역가를 나타내 $50^{\circ}C$까지는 안정한 것으로 나타났다. 금속이온 등의 영향은 cysteine, ascorbic acid와 EDTA에서 상승작용을 나타내고, $Cu^{2+},\;KCN,\;Co^{2+}$에서는 약한 저해 작용을 나타내고, $Hg^{2+}는 완전히 저해되었다. 덱스트란을 분해시킨 분해산물은 glucose와 isomaltotriose및 그 이상의 분자량을 가지는 oligosaccharide로 구성되어 있고, 치아부착 다당류에 대한 분해도 덱스트란과 유사하였다.

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발아조건 및 건조방법이 발아현미의 이화학적 특성에 미치는 영향 (Effect of Germination Condition and Drying Methods on Physicochemical Properties of Sprouted Brown Rice)

  • 김선림;손영구;손종록;허한순
    • 한국작물학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.221-228
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    • 2001
  • 1. 현미를 상온저장시 2주까지는 발아율에 차이가 없으나, 저장 3주후부터는 발아율이 급격히 감소되어 발아율이 80%에 미치지 못하기 때문에 발아현미의 재배를 위해서는 도정후 2주 이내의 현미를 사용하는 것이 바람직한 것으로 판단되었다. 2. 24시간 침종처리가 무침종에 비하여 현미의 초기발아율이 약 2-3%증가되었고, $25^{\circ}C$는 현미의 발아율과 생육상태가 좋았을 뿐만 아니라 부패발생도 적었다. 3. 동결건조된 발아현미는 열풍건조된 발아현미와는 달리 호분층 및 내배유부분의 분리현상이 발생되었고, 배유의 전분 저장세포뿐만 아니라 전분립간의 균열현상이 관찰되었다. 4. 열풍건조는 동결건조 보다 유리하였고, 55$^{\circ}C$로 48시간 건조시 발아현미의 불쾌취가 제거되었다. 5. 조단백 및 amylose는 발아일수가 경과함에 따라 함량의 변화가 미미하였으나 조회분, 조섬유 및 유리당은 발아일수가 경과함에 따라 감소되었고, 조지방과 총아미노산의 함량은 증가하였다. 6. $\alpha$-amylase활력은 발아 5일부터 급격히 증가하다가 발아 8일부터 감소되는 경향이었다. 7. 유리당의 함량은 발아기간(0-8일)중 지속적으로 감소되는 경향이었으며 sucrose와 glucose의 감소가 현저하였고 발아 5일 이후 fructose와 maltose는 증가되었다.

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비단백질성 항균물질을 생산하는 김치발효용 내산성 Hetero 발효형 유산균주 선발 (Selection of Acid-tolerant and Hetero-fermentative Lactic Acid Bacteria Producing Non-proteinaceous Anti-bacterial Substances for Kimchi Fermentation)

  • 김혜림;이종훈
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제41권1호
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    • pp.119-127
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    • 2013
  • 선행연구에서 김치발효 후기의 우점종으로 알려진 Lactobacillus sakei의 생육을 저해하는 Leuconostoc 속 23균주와 Weissella 속 45 균주를 김치로부터 분리, 동정하였다. 발효 후기까지 생존할 수 있는 김치발효용 hetero 발효형 종균 선발을 위하여 이들 균주에 대한 내산성을 평가한 결과, Lc. mesenteroides CK0128, W. cibaria CK0633, W. cibaria KK0797 균주가 acetic acid와 lactic acid 혼합용액을 이용하여 pH를 4.3으로 조정한 MRS broth에서 상대적으로 높은 생존율을 보였고, 다량의 세포 외 다당류를 생산하였다. 세균주가 생산하는 항균물질의 분자량은 3,000 Da 이하로 추정되며 Staphylococcus aureus와 Lb. sakei에 대한 생육저해를 나타내었다. 분획한 3,000 Da 이하의 조항균물질 모두가 $121^{\circ}C$, 15분의 열처리에도 항균활성을 유지함으로써 항균물질의 열에 대한 높은 안정성이 확인되었다. pH의 감소에 따른 항균활성의 증가가 pH 5 이하의 산성조건에서 확인되어, 이들 항균물질은 pH 5 이하의 산성조건에서 활성을 갖는 것으로 추정된다. ${\alpha}$-amylase, lipase, pepsin, proteinase K 처리가 항균활성에 아무런 영향을 미치지 않는 것으로 보아 이들 균주가 생산하는 항균물질은 탄수화물, 지질을 포함하지 않으며, 비단백질성 물질로 추정된다. 또한, 선발균주가 생산하는 비단백질성 항균물질은 식중독균의 생육을 효과적으로 저해하였다.

Polymerization of Sugar by Extrusion

  • Hwang, Jae-Kwan;Kim, Chul-Jin;Chong-Tai, Kim
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제2권4호
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    • pp.296-300
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    • 1997
  • Glucose syrup and lactose, mixed with citric acid as a polymerizing catalyst, was processed using twin screw extruder, in which 40 of L/D(length/diameter) ratio was designed to provide sufficient retention in extruder for polymerization of sugars. The polymerization yields of glucose syrup were 36.90%, 55.44% and 77.10% at 160, 180 and 20$0^{\circ}C$, respectively, while those of lactose were 26.45%, 38.16% and 45.86% at the same temperatures. Gel permeation chromatography exhibited that the higher molecular weight fractions were increased with extrusion temperature, which also led to increasing hydrodynamic intrinsic viscosity. Both uco-oligosaccharides and lacto-oligosaccharides produced by extrusion of glucose syrup and lactose were stable for thermal treatments over a wide range of pH3.0~11.0. In addition, $\alpha$-amylase and amyloglucosidase treatment of gluco-oligosaccharides did not affect the solution viscosity, indicating the random linkage rather than $\alpha$-1, 4 linkages of glucose and thus the potential applications as a dietary fiber. In this research it was clearly observed that twin screw extrusion can be successfully utilized to produce gluco-oligosaccharides and lacto-oligosaccharides rapidly and continuously in conjunction with selective control of polymerized composition.

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Bacteriocin Produced by Pediococcus sp. in Kimchi and Its Characteristics

  • Kwon, Dae-Young;Koo, Min-Seon;Ryoo, Chae-Ran;Kang, Chang-Hoon;Min, Kyung-Hee;Kim, Wang-June
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제12권1호
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    • pp.96-105
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    • 2002
  • A bacteriocin-producing strain identified as Pediococcus acidilactici was isolated from kimchi. The bacteriocin was identified to belong to the pediocin family and exhibited bactericidal activity against most Gram-positive bacteria as well as some Gram-negative bacteria. The bacteriocin was stable up to $80^{\circ}C with wide pH ranges (5.0-10.0). The bactericidal activity remained unchanged after treatment with nonproteolytic enzymes such as nuclease and ${\alpha}$-amylase, however, it was destroyed after treatment with protease. The bacteriocin was effectively extracted by the pH-mediated adsorption-desorption method and purified effectively by semi-preparative RP-HPLC. The molecular weight of the bacteriocin was 4,622, as determined by electrospray mass spectrometry. The amino acid sequence consisted of 44 amino acid residues with four cysteines. The high solubility and pH stability of the isolated pediocin provide definite advantages over nisin and other bacteriocins in regards to its potential applications.

Bactericidal Effect of Bacteriocin of Lactobacillus plantarum K11 Isolated from Dongchimi on Escherichia coli O157

  • Lim, Sung-Mee;Im, Dong-Soon
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.151-158
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    • 2007
  • 동치미로부터 분리한 유산균 (68 균주) 중 Escherichia coli O157에 대한 항균 효과를 나타내는 균주는 Lactobacillus plantarum K11로 동정되었다. 분리균주 La. piantarum K11이 생산한 박테리오신의 항균 활성은 대수증식기 후반부에 12,800 BU/mL로 최대 활성에 이르렀다. 항균 활성은 pepsin, protease, proteinase K, papain, chymotrypsin 및 trypsin 처리에 의해 완전히 소실되었으나, catalase, ${\alpha}-amylase$, lysozyme 및 lipase에 의해서는 영향을 받지 않았으므로 단백질성 물질임을 확인하였다. 게다가, 이 활성은 pH 3.0-9.0의 조건하에서나 -20, 4 및 $25^{\circ}C$에서 30일간의 저장 동안에도 안정하였다. 또한 $100^{\circ}C$에서 30분간 가열처리에도 비교적 안정한 편이었고, chloroform이나 hexane 처리에도 활성에 변함이 없었다. 분리 균주의 박테리오신은 Bacillus spp., Listeria spp. 및 Staphylococcus spp. 등의 일부 식중독균의 억제효과는 나타나지 않았으나, Enterobacter aerogenes와 E. coli 등의 장내세균의 억제에는 효과적이었으며, 특히 640 BU/mL의 박테리오신 처리에 의해서 10시간 배양만에 E. coli O157이 완전하게 사멸되었다.

Bacillus polyfermenticus SCD의 생균제로서의 특성 (Chayacterization of Bacillus polyfermenticus SCD as a Probiotic.)

  • 전경동;김혜진;이광호;백현동;강재선
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.359-366
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    • 2002
  • B. polyfermenticus SCD와 상업적으로 사용되는 생균제들의 pH 2.0, 3.0에서 내산성을 비교한 결과, 2시간에서의 생존율은 pH 2.0, 3.0에서 각각 85.6과 92.6%의 생존율을 나타내었으며 4시간에서도 각각 62.8%와 81.2%의 높은 생존율을 나타내었다. B. polyfermenticus SCD의 인공담즙산에 대한 내성을 확인한 결과, 인공담즙산이 함유되지 않은 대조구($3.2$\times$10^{7}$ CFU/ml)보다 균수($6.5$\times$10^{7$ CFU/ml)가 더 많이 증식되었다. 또한 B. polyfermenticus SCD는 비타민 $B_1$, $B_2$를 생산하고 장내유해균웨 의한 비타민 B군의 분해를 억제하여 영양을 공급한다. 게다가 비타민 C를 다량 생산하여 공급하므로 비타민 C의 항산화작용에 의한 피부노화 방지 및 항암작용 등의 여러 가지 효능들도 기대할 수 있다. B. polyfermenticus SCD의 소화력을 다른 Bacillus sp.과 비교했을 때 지방소화력은 비슷한 활성을 나타내었으나, 전분 소화력은 약 2배, 단백소화력은 약 25배의 높은 소화력을 가지고 있었다. B. polyfermenticus SCD는 낮은 pH에서도 안정성이 확보되었으며 저장온도는 가혹조건($40^{\circ}C$, RH 70%)에서 26.8%거 비교적 낮은 안정성을 나타내었을 뿐 저온 및 실온에서는 매우 안정하였다. 그리고 수중에서와 5% glucose용액, 고농도의 NaCl 에서도 매우 높은 안정성을 나타내어 식품을 포함한 다양한 형태의 제품에 적용했을 때에도 그 안정성이 탁월하여 응용성이 크다고 할 수 있겠다. B. polyfermenticus SCD복용에 따른 장내균총의 변화에서는 Salmonella, E. coli, Staphylococcus등 유해균의 유의성 있는 감소효과를 나타내었으며, 유익균과의 공생작용과 유익균에 대한 생육촉진작용을 나타내었다. 장내 암모니아의 변화에서는 복용 중에 유의성 있는 감소효과를 보였다. 이상의 결과로서 B. polyfermenticus SCD의 생균제로서의 특성은 기능성 식품의 개발 등 산업적으로 매우 유용하다고 판단된다.