This study describes a novel strategy to regulate the metabolic flux for lactic acid production in Lactobacillus casei. The ldhL gene encoding L-lactate dehydrogenase (L-LDH) was overexpressed in L. casei, and a two-stage oxygen supply strategy (TOS) that maintained a medium oxygen supply level during the early fermentation phase, and a low oxygen supply level in the later phase was carried out. As a consequence, a maximum L-LDH activity of 95.6 U/ml was obtained in the recombinant strain, which was over 4-fold higher than that of the initial strain. Under the TOS for L. casei (pMG-ldhL), the maximum lactic acid concentration of 159.6 g/l was obtained in 36 h, corresponding to a 62.8% increase. The results presented here provide a novel way to regulate the metabolic flux of L. casei for lactic acid production in different fermentation stages, which is available to enhance organic acid production in other strains.
This study was carried out to clear up the cause of low-acid producing phenomenon occurred In non-fat dry milk during liquid-yoghurt fermentation by Lactobacillus case, and to present its improving methods. All samples of non-fat dry milks which were low in TCA-soluble peptides showed low-acid production, but those high in TCA-soluble peptides showed high-acid production. The addition of trypsin-hydrolysate of Na-caseinate to non-fat dry milk showed some improving effect on acid production but that of papain-hydrolysate did not show any improving effect and that of bacterical neutral protease-hydrolysate showed some inhibitory effect. The improving effects on growth and acid production of lactic acid bacteria were more prominent when the trypsin-hydrolysate of Na-caseinate was added. to such fermenting system in which the levels of TCA-soluble peptides and the proteolytic ability of starter bacteria were abnormally low. The liquid-yoghurt made with non-hydrolysed Na-caseinate and defective non-fat dry milk showed precipitate occurrence but that with trypsin-hydrolysate of Na-caseinate and defective non-fat dry milk did not make any precipitate during storage as with normal non-fat dry milk.
Jae-Yong Lee;Dong-Gyu Yoo;Yu-Bin Jeon;Se-Hui Moon;Ok-Hee Kim;Dong-Hyun Lee;Cheol-Hyun Kim
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.41
no.1
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pp.34-43
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2023
Hydrolysis of whey-derived proteins using lactic acid bacteria (LAB) utilizes the mass culture method and fermentation of LAB to produce effective bioactive peptides. Whey protein has the biological potential of its precursors, but the active fragments may not be released depending on the hydrolysis method. As an alternative to these problems, the nutritional and bioactive functionality of the hydrolysis method have been reported to be improved using LAB for whey protein. Peptide fractions were obtained using a sample fast protein liquid chromatography device. Antioxidant activity was verified for each of the five fractions obtained. In vitro cell experiments showed no cytotoxicity and inhibited nitric oxide production. Cytokine (IL [interleukin]-1α, IL-6, tumor necrosis factor-α) production was significantly lower than that of lipopolysaccharides (+). As a result of checking the amino acid content ratio of the fractions selected through the AccQ-Tag system, 17 types of amino acids were identified, and the content of isoleucine, an essential amino acid, was the highest. These properties show their applicability for the production of functional products utilizing dietary supplements and milk. It can be presented as an efficient method in terms of product functionality in the production of uniform-quality whey-derived peptides.
For optimal production of L-tryptophan using a regulatory mutant of Escherichia coli the relationship between product formation and acid production was investigated. Experimental results showed that the production level of L-tryptophan was lowered as the specific acid production rate increased. In order to reduce the amount of acid produced during the fermentation, a controlled fed-batch fermentation was employed. In this fed-batch process, the feed rate of the nutrient feed medium was controlled in relation to the oxygen level in the culture and thus the growth of the cells was regulated in such n way that the oxygen demand of the culture could not exceed the oxygen sup-ply. When E. coli cells were cultivated in a controlled fed-batch mode of tormentor operation, the specific acid production rate was significantly reduced and L-tryptophan production was increased as much as five times that obtained in a conventional fed-batch fermentation.
An optimal composition of medium for hyaluronic acid production and some characteristics of its from Streptococcus zooepidemicus were investigated. The hyaluronic acid from S. zooepidemicus was reached maximum level in the BY-medium containing 0.1% beef extract, 0.1% yeast extract, 3.0% glucose, 2.0% peptone, 0.1% NaCl and $0.5%CaCO_3$ (pH 7.5) at $37^{\circ}C$ for 36 hours with shaking. Addition of $CaCO_3$ to the medium was necessary to neulralize the lowered pH which was resulted from hyaluronic acid production. Molecular weights of extracelluar and cellular hyaluronic acid produced by the strain were $1-1.4{\times }10^6$ and $5{\times}10^6$, respectively. The amount of extracellular hyaluronic acid was 91.9% of total hyaluronic acid produced and the vest was all intracellular.
The Pseudomonas sp. strain NGK1 (NCIM 5120) was immobilized in calcium alginate, agar, and polyacrylamide gel matrices. The salicylic acid-producing capacity of freely suspended cells was compared with immobilized cells in batches with a shake culture and continuous culture system in a packed bed reactor. Freely suspended cells ($4\times10^{10}cfu/ml$) produced 12 mM of salicylic acid, whereas cells immobilized in calcium alginate ($1.8\times10^{11}$cfu/g beads), agar ($1.8\times10^{11}$cfu/g beads), and polyacrylamide ($1.6\times10^{11}$cfu/g beads) produced 15, 11, and 16mM of salicylic acid, respectively, from naphthalene at an initial concentration of 25 mM. The continuous production of salicylic acid from naphthalene was investigated in a continuous packed bed reactor with two different cell populations. The longevity of the salicylic acid-producing activity of the immobilized cells from naphthalene was also studied in semi continuous fermentations. The immobilized cells could be reused 18, 13, and more than 20 times without losing salicylic acid-producing activity in calcium alginate-,agar-, and polyacrylamide-entrapped cells, respectively. The study reveals a more efficient utilization of naphthalene and salicylic acid production by the immobilized Pseudomonas sp. strain NGK1 as compared to the free cells.
Gamma-amino butyric acid (GABA) is a kind of pharmacological and biological component and its application is wide and useful in Korea specially, becoming aging society in the near feature. GABA is request special dose for the purposed biological effect but the production of concentrated GABA is very difficult due to low concentration of glutamic acid existed in the fermentation broth. To increase GABA concentrate using fermentation technology, high content of glutamic acid is required. For this reason, various strains which have the glutamic acid decarboxylase (GAD) and can convert glutamic acid to GABA, were isolated from various fermented foods. Most of GABA producing strains are lactic acid bacteria isolated from kimchi, especially added monosodium glutamate (MSG) as a taste enhancer. Optimizing the formulation of culture media and the culture condition, GABA conversion yield and amounts were increased. Finally GABA concentration of fermentation broth in batch or fed batch fermentation reached 660 mM or 1000 mM, respectively. Furthermore formulation of culture media for GABA production developed commercially. Many studies about GABA-rich product have been continued, so GABA-rich kimchi, cheese, yogurt, black raspberry juice and tomato juices has been also developed. In Korea many biological effects of GABA are evaluated recently and GABA will be expected to be used in multipurpose.
Strains of four Bacillus spp. were respectively inoculated into sterilized soybeans and the free amino acid profiles of the resulting cultures were analyzed to discern their metabolic traits. After 30 days of culture, B. licheniformis showed the highest production of serine, threonine, and glutamic acid; B. subtilis exhibited the highest production of alanine, asparagine, glycine, leucine, proline, tryptophan, and lysine. B. velezensis increased the γ-aminobutyric acid (GABA) concentration to >200% of that in the control samples. B. sonorensis produced a somewhat similar amino acid profile with B. licheniformis. Comparative genomic analysis of the four Bacillus strains and the genetic profiles of the produced free amino acids revealed that genes involved in glutamate and arginine metabolism were not common to the four strains. The genes gadA/B (encoding a glutamate decarboxylase), rocE (amino acid permease), and puuD (γ-glutamyl-γ-aminobutyrate hydrolase) determined GABA production, and their presence was species-specific. Taken together, B. licheniformis and B. velezensis were respectively shown to have high potential to increase concentrations of glutamic acid and GABA, while B. subtilis has the ability to increase essential amino acid concentrations in fermented soybean foods.
Sikka, P.;Saxena, N.K.;Gupta, R.;Sethi, R.K.;Lall, D.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.14
no.11
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pp.1634-1637
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2001
Allantoin and uric acid were estimated in milk to study the association between the levels of these purine derivatives and milk production per day under given feeding regimens. Keeping the stage of lactation, parity and initial milk yield in view thirty lactating buffaloes were randomly selected from early lactating group. All the animals were fed 30 kg green, 2 kg straw and 5 kg concentrate mixture on per animal/day basis at basal level up to 8 1 produce. 1 kg concentrate mixture, soaked cotton seed and boiled cotton seed was fed for every 2 I milk, respectively in Group I (control), Group II and Group III animals. Average milk Allantoin and Uric acid levels were $120{\pm}11.7g/ml$ and $4.03{\pm}0.63g/ml$, respectively in milk. Cotton seed feeding enhanced the milk production significantly (p<0.01) in comparison to concentrate mixture fed control group animals. A significant difference (p<0.01) in milk allantoin levels was found over the different feeding management at higher level of production group animals. Study also revealed a significant negative correlation between the milk allantoin and production per day r=-0.43 (p<0.05).
Recombinant Escherichia coli BLR(DE3) harboring the hemA gene from Rhodobacter capsulatus under the control of a constitutive promoter, which we constructed previously, was used for the extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA). The effects of several factors on ALA production were investigated in flask culture. ALA production by the recombinant E. coli was more efficient at $30^{\circ}C$ than $37^{\circ}C$. The glycine concentration had an important effect on cell growth. Glycine and succinic acid concentration of 5-10 and 10-20 g/L, respectively, resulted in high ALA production. In addition, the partial replacement of succinic acid by sodium glutamate increased the ALA production. The ALA production was inhibited by the presence of glucose in the medium. Using the optimal conditions, an ALA concentration of 8.2 g/L was achieved in jar fermentation without an added inducer or ALA dehydratase inhibitor; this is the highest reported concentration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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