Zygotic embryos were excised from immature and mature seeds of the Himalayan yew, Taxus wallichiana. The embryos germinated precociously when kept in darkness for 5 weeks and developed into full seedlings within 10-12 weeks. The highest rate of embryo germination ($81\%$) was obtained in modified Lloyd & McCown' s woody plant medium containing macro and micronutrients at half strength supplemented with $1\%$ activated charcoal, which supported both the best embryonic growth ($43\%$) and seedling development ($32\%$). However, the supplementation of basal media with kinetin, thidiazuron, 6-benzyl aminopurine or $GA_3$ had no effect on the germination of the embryos. The embryos derived from immature seeds germinated but the frequency of embryonic growth was better in mature seeds. Stratification of seeds effected precocious germination of embryos. Seeds kept at $4^{\circ}C$ for 1 week germinated earlier and at a higher frequency irrespective of the stage of seed maturity, while the germination rate declined with prolonged cold treatment for 1 month at that same temperature. Analysis of taxanes in germinating seedlings revealed that root tissues contained high levels of taxol, 10-deacetyl-baccatin ill and baccatin ill as compared to shoots. Thus embryo culture technique appears to overcome the lengthy dormancy requirement of T. wallichiana seeds.
Successful embryonic development is dependant on temporal and stage-specific expression of appropriate genes. However, information on specific gene expression during early cleavage before zygotic gene activation (ZGA) is lacking. In the present study, we compared gene expression between porcine parthenotes 2-cell and blastocyst embryos to identify the genes that are specifically or prominently expressed by employing annealing control primers (ACP)-based Gene Fishing RCR. (omitted)
Kim, Dong-Hee;Chun, Ju Lan;Lee, Ji Hye;Kim, Keun Jung;Kim, Eun Young;Lee, Bo Myeong;Zhuang, Lili;Kim, Min Kyu
Korean Journal of Agricultural Science
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v.43
no.1
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pp.52-60
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2016
In animal reproduction, the quality of oocytes and embryos has been evaluated by the expression of specific molecules. Follistatin (FST), which was isolated from follicular fluid, binds and bio-neutralizes the TGF-${\beta}$ superfamily members. Previous studies using the bovine model showed FST could be an important molecular determinant of embryo developmental competence. However, the effect of FST treatment on porcine embryo developmental competence has not been established. In this study, the effect of exogenous FST on porcine embryo developmental competence was investigated during in vitro culture. FST (10 ng/ml) treatment induced a significant decrease in the rate of cell arrest at the 4-cell stage. The expression levels of DNA-methyltransferase 1 (DNMT1), histone deacetylase 1 (HDAC1), and histone deacetylase 2 (HDAC2) were decreased in 4-cell stage embryos. FST treatment also resulted in significant improvements in developmental competence of embryos in terms of blastocyst formation rate and OCT-4 mRNA levels, the latter being related to pluripotency. In conclusion, during in vitro culture, FST treatment significantly ameliorated 4-cell block during embryonic development and improved embryo developmental competence. Therefore, FST treatment may potentially have a functional role in porcine embryogenesis that is broadly applicable to enhance in vitro embryo development.
Picea koraiensis, called Korean spruce, is an evergreen tree and found mostly in northeast Asia. In this study, plant regeneration via somatic embryogenesis from open-pollinated immature zygotic embryos of nine geno-types of elite trees was established. Immature zygotic embryos were cultured onto RJW medium modified from 505 medium with $21.48{\mu}M$ NAA, $2.22{\mu}M$ BA, and $2.32{\mu}M$ KT. The average frequency for all nine genotypes was 74.2%. Embryogenic calluses of the nine genotypes of elite trees were subcultured on RJW basal medium containing $8.06{\mu}M$ NAA, $1.11{\mu}M$ BA, and $1.16{\mu}M$ kinetin. The calluses of three lines, $3^{\sharp}$, $9^{\sharp}$, and $2^{\sharp}$, were actively proliferated but others were not. Somatic embryogenesis was induced from the embryogenic callus in genotypes of $3^{\sharp}$, $9^{\sharp}$, and $2^{\sharp}$ on RJW medium with ABA and $60g\;l^{-1}$ sucrose. Cotyledonary somatic embryos were subjected to a drying process. The drying of embryos by uncapping the culture bottle for 5 days on a clean bench resulted in a high frequency of germination of somatic embryos (87% in RJW medium). However, plantlet conversion from germinated embryos was greatly reduced and the optimal medium for plant conversion was 1/2 WPM or 1/2 BMI medium. In conclusion, we have, for the first time, established a plant regeneration system via somatic embryogenesis in the Korean spruce, which can be applied for rapid micropropagation of elite trees.
Wang X.;Proctor J.T.A.;KrishnaRaj S.;Saxena P.K.;Sullivan J.A.
Journal of Ginseng Research
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v.23
no.3
s.55
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pp.148-163
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1999
The efficacy of three auxins, viz. 2,4-0, NAA and dicamba, were compared for the induction of somatic embryogenesis in American ginseng (Panax quinquefolium L.). Somatic embryos (SEs) formed on ginseng cotyledonary, zygotic embryo and shoot explants after 8 weeks of induction by the auxin stimuli. Significantly more somatic embryos were induced by culture of any of the ginseng explants on media supplemented with $5{\mu}M$ 2,4-0 than any other auxin treatment. Shoots derived from somatic embryos had the greatest regenerative potential and zygotic embryos the least. Explants generated from green (unstratified) seeds gave similar or higher frequency of embryogenesis as the explants derived from stratified seeds. Histological and SEM studies confirmed that the regenerimts were somatic embryos. Somatic embryos germinated and developed into normal plants in $3\~6$ months. About $10\%$ of plantlets from second generation SEs formed flowers within 10 weeks, particularly on media supplemented with $GA_3$ The development of a regeneration system for ginseng through somatic embryogenesis is a necessary first step for mass propagation and genetic improvement of American ginseng.
Zygotic embryos of Stewartia korean Nakai were cultured to determine the effects both of BA and NAA on adventitious shoot induction. Multiple shoots (about 11 per explant) were formed when the embryos were treated with 1.0 mg/L BA alone. On the other hand, NAA appeared to inhibit shoot induction when treated with BA. Adventitious shoots looked differ in form and color by the combinations of BA and NAA treated. When both BA and NAA were present, the shoots became short and developed dark color. The highest rooting was observed at 0.5mg/L NAA. The results could be useful for the establishment of in vitro regeneration system for Stewartia koreana Nakai.
Yoon Jae-Ho;Song Won-Seob;Lee Mee Sook;Shin Dong-il;Yang Deok Chun
Korean Journal of Plant Resources
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v.18
no.1
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pp.123-130
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2005
High salt concentrations in the ginseng nursery soil environment of Korea is one of important reducing factors for the stable production of quality ginseng. These studies were accomplished for check the response on germination of ginseng seed, somatic embryogenesis of zygotic embryo, and biosynthesis of ginsenoside from ginseng hairy root against NaCl. Ratio of germination was at the $3\%\;and\;84.5\%$ on the basic media with 0.1M and free of NaCl repectedly, but $0\%$ at the upper of 0.2M NaCl. Somatic embryogenesis from zygotic embryo were the highest when immatured embryo was cultured on free of NaCl concentration, and which was intend to decrease at treatment of NaCl. However, in case of using the matured embryo, treatment of 0.05M NaCl resulted in better embryogenesis than NaCl free media. Red pigment was synthesized from ginseng hairy root cultured on the medium with various NaCl concentration(from 0.04 to 0.08M) and its pigment was analyzed as spectrum of anthocyane by spectrophoto- meter scanning. This cell line biosynthesized lots of crude saponin and total ginsenoside than other cell lines, also had 2 times of panaxadiol than panaxatriol.
Interspecific crossing was conducted to obtain hybrid lilly with better quality of adapting to the unfavorable environment using oriental Lilium spp. as a female parent. Average interspecific crossing rate between oriental and asiatic lines by cut-style pollination was as low as 29%. Although the average germination rate of zygotic hybrid embryo between oriental 'Rodolfa' ${\times}$ asiatic 'Toronto' was increased from 76.6% to 78.3%. on 114 or 1/6 strength MS medium compared to the control, the rate of zygotic embryos formation between oriental 'Farolito' ${\times}$ asiatic 'Buff Pixie' was significantly enhanced up about 86~90% on 1/2 strength MS medium. Meanwhile, germination rate of interspecific hybrid embryo between oriental 'Snow Cristal' ${\times}$ asiatic 'Royal Trinity' showed up 100%. Germination rate of interspecific hybrids slightly increased by addition of $0.5-1.0mg{\cdot}L^{-1}$ GA. Germination rate of zygotic embryos between oriental 'Farolito' ${\times}$ asiatic 'Buff Pixie' and oriental 'Belcanto' ${\times}$ L. callosum was highest on the MS medium containing $0.01mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin, as 66.6% and 45.2% respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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