들잔디(Zoysia japonica Steud.)의 최적 조직 배양 조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 최적 캘러스 유도 및 효율적인 식물체 재분화에 미치는 몇 가지 요인의 영향을 조사하였다. 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도율은 3mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 배지에서 85%로 가장 높았으며 NAA 또는 IAA를 첨가한 처리구보다 높게 나타났다. 배발생 캘러스로부터 식물체 재분화는 0.1 mg/L 2,4-D와 5 mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 73.3%로 가장 높게 나타났다. 기본배지의 종류에 따른 배양효율의 차이는 배발생 캘러스 유도에는 MS 배지가, 식물체 재분화에는 N6배지가 가장 효과적이었다. 재분화 된 식물체는 1/2 MS rooting 배지에서 뿌리를 형성되어 pot에 이식하였을 때 정상적으로 분화되어 생장하였다. 본 연구를 통하여 확립된 단기간 고효율 재분화 시스템은 분자육종을 통한 신품종 들잔디의 개발에 유용하게 응용되어질 수 있을 것이다.
The use of zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.) in the transition zone is limited because of a lack of cold hardiness although zoysiagrass has many advantages compared to other warm-season and cool-season grasses. Late-fall N fertilization is often applied for darker green color of turfgrass in early spring and more extensive root growth without rapid top growth. The objective of the study was to evaluate the effects of late fall N application and turf cover for zoysiagrass spring green-up. Clear polyvinyl chloride (PVC) film was used for turf cover. The amount of N applied were 5 and $10g\;N\;m^{-2}$ for the low and high N rate treatments, respectively. Covered zoysiagrass had greater turfgrass color and quality in early spring than non-covered zoysiagrass. The high N rate had 0.6 to 2.3 greater turfgrass quality than the low N rate on 7 of 9 rating dates. Slow-release N as late fall fertilization is more effective for turfgrass color and quality than fast-release N in spring. Turf cover could reduce the period of yellow zoysiagrass, and the earlier time of spring green-up could be advanced by increasing turfgrass quality and growth of zoysiagrass.
The seeds of Zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.) were soaked with GA3 50 ppm and primed with CaCl2 at -1.0 MPa for 4days at 23$^{\circ}C$ to identify presoaking and priming regimes that may improve germination in saline condition and with PEG 8000 at high temperature. Presoaked, primed, and untreated seeds were then germinated at 30 and $35^{\circ}C$. NaCl salinity stress consistently decreased the rate of germination of zoysiagrass seed. GA3 or CaCl2 alleviated the inhibitory effect of salinity on germination. However, total percent germination (G) and T50 of untreated control seeds significantly decreased and prolonged at $30^{\circ}C$ and $35^{\circ}C$ as NaCl salinity stress increased. Presoaked seeds with GA3 50 ppm for 4 days at $23^{\circ}C$ had significantly higher germination and lower T50 than untreated or primed with CaCl2 at -1.0 MPa for 4days at $23^{\circ}C$m and overcame the inhibitory effect of germination derived from PEG 8000. In addition, presoaked seed had higher, faster, and more uniform germination than untreated seeds after sowing in growing media in greenhouse.
Zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.), also called Korean or Japanese lawngrass, is the most popular warm-season turfgrass in Korea and is widely used for home lawns, parks, roadsides, golf courses and athletic fields. Its use is rapidly expanding in Korea and the other countries, due to its excellent characteristics which include tolerance to heat, drought and salinity. As the utilization area of this turfgrass increases, there is an increase in the demand for improved cultivars with disease and insect tolerance or with herbicide-tolerance or with extended greening periods. Conventional breeding methods have been used to improve the traits described above with limited success. However, with the advances in biotechnology, genetic transformation can be utilized for turfgrass improvement. In this paper, we review recent progress in biotechnological improvement of zoysiagrass and discuss future molecular breeding of this species.
Zoysia japonica Steud.(Zj) is a typical warm-season Korean lawn grass, which is used in many places such as river banks, roadside and soccer fields in Korea. Recently, it has also been used in school yards and the Saemangeum reclaimed land to reduce water pollution. Although the cultivated area of turfgrass is steadily increasing worldwide, it grows fast requiring frequent mowing and is difficult to grow in shady areas and the cold region. Therefore this study aims searching for useful gene(s) to develop abiotic stress tolerant and dwarf zoysiagrass. We isolated Ycf4 gene based on the sequence from Oryza sativa Japonica through RT-PCR and RACE PCR. Ultimately, open reading frame (ORF) of ZjYcf4 was 558bp long, encoding a protein of 186 amino acid residues. NCBI blast results showed that the ZjYcf4 protein is evolutionarily closely related to Ycf4 protein from Zoysia macrantha and Setaria italica (100% and 98%, respectively). To determine whether ZjYcf4 was involved in environmental stress in wild-type zoysiagrass, expression patterns of the gene were analyzed by real-time PCR under salt, cold and dark conditions. They were analyzed after each stress treatment for 3 hours. In salt and cold stresses, the expression was higher compared to control (3-fold and 1.5-fold, respectively), although there was a 1.6-fold decrease in expression under dark stress treatment. As reported previously, we suggest that ZjYcf4 gene affects abiotic stress such as salt, cold and dark.
들잔디 (Zoysia japonica Steud.)의 성숙종자 유래의 캘러스를 사용하여 캘러스 생장 및 재분화에 적합한 몇 가지 조건과 캘러스 유형에 따른 재분화 효율을 검토하였다. 종자로부터 캘러스 유도는 2 mg/L 2,4-D, 0.2 mg/L BAP, 4 mg/L thiamine-HCl, 100 mg/L $\alpha$-ketoglutaric acid를 포함한 MS 배지에서 가장 좋았다. 캘러스 증식은 0.5 mg/L 2,4-D, 0.05mg/L BAP, 4 mg/L thiamine-HCl, 100 mg/L $\alpha$-ketoglutaric acid를 포함한 MS 배지가 가장 좋았다. 식물체의 재분화는 3% maltose, 1 mg/L BAP 또는 1 mg/L TDZ를 포함한 MS배지에서 좋았다. 캘러스의 Type과 빈도는 2,4-D와 BAP 조합과 농도에 따라 크게 영향을 받았고, 형태적으로 4가지 Type이 뚜렷하게 나타났다. Type I, II, III 캘러스는 계대배양으로 신초가 형성된 반면, 물기가 많은 캘러스인 Type IV에서는 뿌리만이 분화되었다. 이 중 Type I 캘러스는 신초의 재분화율이 82%로 가장 높고 albino체의 출현빈도가 4%로 가장 낮았다. 이와같이 캘러스를 유형별로 구분하여 배양함으로써 잔디 캘러스로부터 식물체의 재분화를 높일 수 있었다.
본 연구는 예초 직후에 prohexadione-calcium을 처리하여 잔디의 생장 상태를 조사하였다. 한국잔디로 조성된 잔디밭이나 골프장을 효과적으로 관리하기 위하여 한국잔디의 예초 직후 prohexadionecalcium의 농도를 달리하여 엽면 처리한 결과 무처리와 비교하여 잎의 생장이 현저히 감소되는 것으로 나타났으며 prohexadione-calcium의 1회 처리로도 그 효과가 처리후 50일까지 잎의 생장이 46~50%정도 감소되는 것으로 나타났고, 엽폭도 처리농도가 높을수록 무처리에 비하여 좁아졌다. Prohexadionecalcium 처리후 건물중의 변화를 보면 처리후 2주후 부터 무처리에 비하여 현저하게 감소하는 것으로 나타났는데, 처리 농도가 높을수록 건물중이 작았으며 처리 40일까지도 건물중의 증가가 무처리에 비하여 유의하게 감소하는 것으로 나타났다. 또한 엽색도는 prohexadione-calcium의 처리구가 무처리구에 비하여 높았다.
들잔디의 품질과 줄기 밀도 향상을 위한 적정 규산질비료 시비량을 구명하기 위하여 본 연구가 수행되었다. 2012년부터 2014년까지 3년간 들잔디 재배지 포장시험을 수행하였다. 지상부와 지상 포복경의 생체중과 건물중, 지상부 줄기 개수, 지상 포복경 길이 등은 규산질비료 100, 200과 $400kg\;10a^{-1}$로 시비량이 증가함에 따라 수치가 증가하였다. 그러나 규산질비료 시비량 200과 $400kg\;10a^{-1}$ 처리구간에는 통계적으로 유의적인 차이를 보이지 않았다. 규산질비료 시비량이 증가할수록 토양 내 pH, EC, 토양 내 유효규산 함량이 높아지는 경향을 보였다. 들잔디 생육 증가 및 토양의 화학성을 고려한 적정 규산질비료 살포량은 $200kg\;10a^{-1}$로 판단되었다.
한국들잔디는 운동경기장이나 골프 코스 등에 폭넓게 쓰이는 난지형 잔디이다. 많은 품종은 영양체로 번식한다. 이 연구는 배아세포 유도와 식물체 재생을 위한 적정 배양액 개발과 배양조건을 연구하여, 한국잔디의 육종과 번식을 위한 세포배양 체계 확보를 목적으로 하였다. 그 결과 $Cu^{++}\;2.5mgL^{-1}$를 유도 배양액에 첨가하는 것이 캘러스 유도를 위한 최적 농도 조건 이였음을 보여주었다. Sub-culture의 횟수의 증가는 캘러스의 질을 향상시켰다. 세포 부유배양을 위한 최적 용량은 2.5에서 10mL 사이였으며 본 연구에서 58%의 식물체 재생산비율을 보였다.
The aim of this study is selection of the male-sterile plant for inhibiting transgene flow through gamma-irradiation ($^{60}Co$) at the pollination and fertilization cycle of herbicide-tolerant genetically modified (GM) zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.). High frequencies of plant mutations were obtained about 18% from $M_1$ generation at the doses (10 to 50 Gy). We also found that some $M_1$ plants showed male-sterile plants using de-husked seeds and comparison of stainable pollen using $KI-I_2$ solution. Besides the effects of irradiation on pollination and fertilization cycle, various other mutations like dwarf, cold tolerance, increasing grains and mass were observed. Four of dwarfism plants were selected through comparison of morphological characteristic between control and mutants during 4 years. These results demonstrated that the gamma-irradiation on pollination and fertilization cycle is very effective to induce the various mutations, and the male-sterile mutants are useful for controlling transgene flow and developing of high quality turfgasses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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