초파리의 번데기 시기에 NaCl을 처리하였을때 우활율과 SD작용에 변동이 있는가를 보기 위하여 6가지 계통, 즉 SD 계통 4가지와 다른계통 2가지를 써서 6가지 농도의 NaCl사육배지를 만들어 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 우화율(즉 NaCl에 대한 저항성)은 계통간이나 NaCl의 농도간이나 다같이 매우 유의적인 차이를 보이고 있다. 2. 우화율은 NaCl 농도가 높을수록 낮아지는 경향이 있으며, 이 저하는 완만한 편이고 발생의 각 단계중에서 번데기 시기가 NaCl의 영향을 가장 적게 받는다. 3. SD계통의 우화율은 다른 계통에 비하여 대체로 낮은 편인데, 이것은 SD계통이 NaCl에 대한 저항성이 다른 계통에 비하여 약한 것을 말한다. 4. SD작용의 척도라고 볼 수 있는 k 값은 NaCl의 농도간에 유의한 차가 없으나 계통간에는 유의적인 차이를 보이고 있으며, Original-SD 계통의 k값은 Recombinant-SD계통의 k값보다 높고 또한 안정성을 나타내고 있다. 5. NaCl은 SD작용에 영향을 미치지 못하며 발생의 어느 단계에 NaCl을 처리하거나 관계없이 일단 우화만 되면 SD작용에는 변동이 없다.
Monosodium glutamate는 많이 쓰이고 있는 화학조미료이다. 인간을 비롯하여 생쥐, 원숭이(Rhesus monkey), 초파리등의 동물에 대한 MSG의 영향을 실험 검토하여 MSG가 해롭다 또는 그렇지 않다는 상반된 여러 보고가 있다. 초파리(Drosophila melanogaster)의 발생에 대한 MSG의 영향을 조사하여 이렇듯 엇갈린 보고를 검토 확인할 목적으로 여러가지 농도의 MSG와 cane sugar media(대조구)에 두 계통의 초파리(Oregon-R와 Sinchon-I)를 사육해서 우화해 나온 $F_1$초파리의 수를 조사 검토한 결과는 다음과 같다. 1) MSG의 처리는 초파리의 어느 계통에서나 다 같이 그 농도가 증가함에 따라 발생에 억제적 효과를 나타내는 동시에 10% 이상의 농도에서는 성층의 생육조차 불가능하였다. 2) Cane sugar는 초파리 발생에 억제적이라기 보다 오히려 촉진적 효과를 보이는 것같다. 3) MSG나 cane sugar처리구에서 다 같이 Sinchon-I이 Oregon-R보다 $F_1$ 산출수가 많았는데 이것은 Sinchon-I이 Oregon-R보다 생식 및 생존력이 강함을 암시하여 그 원인으로서 사육하는 동안 근친교배되는 기간의 차이라고 생각된다. 4) Muller-5 test는 부정적 결과를 나타냈는데 이것은 MSC가 mutagenic effect가 없음을 시사하고 있다. 5) MSG의 초파리 발생에 대한 억제적 효과에 관한 생리학적 기구는 아직 미지의 문제인데 이것은 조만간 해결하여야 할것이다.
Spirometru erinocei의 유충인 sparganum에서 추출한 조항원 단백질을 항원으로 하여 sparganosis, cysticercosis, hydatidosis환자의 IgG 항체와 정상인의 IgG 항체를 혈청반응시켜 ELISA와 EITB에 의해 교차반응을 일으키는 비 특이항원 성분과 종특이항원 성분을 추구하였다. 1. sparganum에서 0.01 M PBS (PH 7.4)로 추출한 조항원 단백질을 SDS-PAGE로 전개하여 290 Kd에서 23 Kd범위의 분자량을 가진 25개의 단백질이 분획되었다. 2. sparganum의 조항원을 항원으로하여 ELISA로 sparganosis, cysticercosis, hydatidosis 환자의 190 항체와의 혈청 반응치는 sparganosis환자에게서는 0.44 $\pm$ 0.07에서 1.90 $\pm$ 0.03으로 negative control normal sera의 0.D (0.15 $\pm$ 0.03)를 기준으로 하였을 때 모두 양성이며 민감도(sensitivity)가 100 %이었으며 cysticercosis, hydatidosis환자혈청에서 양성반응이 나타났으며 교차반응도 있었다. 3. EITB에서는 spargancsis환자의 IgG항체에 의해 16개의 항원성분이 인지되었으며 이 중 6개의 항원성분이 정상인의 혈청에서도 인지되어 교차반응을 일으키는 항원성분이었으며 cysticercosis환자혈청에서 인지된 4개의 항원성분 중 2개의 항원성분이 sparganosis 환자혈청에서 인지된 것과 같았으며 hydatidosis환자의 190항체에 의해 인지된 19개의 항원성분 중 12개의 항원성분이 sparganosis환자혈청에서 인지된 항원 성분과 같았다. 4. 290 Kd, 200 Kd, 28 Kd의 항원성분은 sparganosis환자의 196항체에서만 인지되었고 228 Kd, 152 Kd, 66 Kd항원성분은 hydatidosis환자의 19G항체에서만 인지되었으며 66 Kd항원성분은 sparganosis, cysticercosis, hydatidosis, 정상인의 혈청에서 모두 인지되었다. We studied the serological reaction between the specific and nonspecific antigenic components from metacestode (plerocercoid) of spiromeko erimacei and IgG antibodies in sparganosis, cysticercosis. hydatidosis patients and normal human sera by ELISA and EITB. We prepared the crude extracts of sparganlim from snake, Matrix tigrina laterolis and used as antigenic components. By SDS-PAGE, we detected a total 25 peptide bands (fractions) with 290 Kd to 23 Kd molecular weight, and 8 bands of these detected bands developed strongly by silver stain. In serological test, ELISA, we recognized the cross-reaction of antigenic components reacting with IgG antibodies in heterogenous sera, cysticercosis and hydatidosis patients sera. The crude antigenic components of sparganum showed the high sensitivity in sparganosis, hydatidosis patients sera, but showed lower sensitivity in cysticercosis patients sera than the sparasanosis, hydatidosis patients sera. Sixteen antigenic components of these 25 separated bands were recognized by antibodies In sparsanosis patients sera,8 antigenic components in normal human sera, 4 antigenic components in cysticercosis patients sera and 19 antigenic compoenents in hydatidosis patients sera. The crude antigenic compnenets with 290 Kd, 200 Kd, 125 Kd and 28 Kd molecular weight was only recognized in sparganosis patients sera, but 64 Kd antigenic component was nonspecific antigenic components which were also cross-reacted with sparganosis, hydatidosis, cysticercosis patients sera and normal human sera.
양서류 여포를 배양할 때 외부에서 cAMP를 첨가하면 호르몬에 의한 난자의 성숙이 억제된다는 많은 보고가 있었다. 그러나 실제 외부의 cAMP가 여포내로 들어간다는 보고는 아직 없다. 본 연구에서는 배양액내의 cAMP가 여포내로 침투해 들어가는 현상과 들어간 cAMP의 분해과정을 radioimmunoassay로 조사하였다. 개구리 여포를 배양하면서 배양액에 난자의 성숙을 억제하는 농도의cAMP(2.5 mM)를 첨가한 후 일정시간 간격으로 여포내 축척된 cAMP의 농도를 조사한 결과 2시간에서 이미 기본수준(여포당 약 3 p mole)의 수십배로 증가하였다.(여포당 90 p mole). cAMP를 포함한 배양액에서 6시간 배양 후 보통 배양액으로 옮겨 배양하면서 일정 시간마다 여포내 cAMP의 농도를 측정한 결과 6시간 내에 cAMP농도가 여포당 160 p mole에서 약 10 p mole로 급격히 낮아졌다. 그러나 18시간 후에도 기본 수준으로까지 내려가지는 않았다. 이러한 cAMP의 감소과정이 progesterone이나 isobuty methylxanthine (IBMX)에 크게 영향을 받지 않았다. 배양중인 여포를 forskolin(9 u m)으로 자극했을 때에는 기본 수준의 약 3배정도로 cAMP의 농도가 증가하였다. 본 결과는 배양액내의 cAMP가 여포내로 투과해 들어가고 이들은 곧 여포에 의해 분해된다는 것을 시사하고 있다.
高麗人蔘抽出液의 효과를 관찰하고자 실시되었다. 대조군은 15일 동안에 관찰되었으며 인삼투여군은 Sarcoma-180에 감염된 마우스에 인삼추출액을 매일 경구투여하여 15일째에 관찰 비교하였다. 그 결과는 아래와 같다. 1) 肉腫癌쥐에 있어서 癌감염후 15일간 赤血球와 血小板의 수에는 有意性變化가 없었으나, 白血球는 初期에 증가되다가 中期 이후부터는 급격히 감소하였다. 그러나 人蔘抽出液處理群에서는 심한 감소현상은 나타나지 않았다. 이는 白血球가 生體防禦의 작용을 한다는 이론에 人蔘抽出液이 이를 보조해 준 것으로 판단된다. 2) 肉腫癌쥐의 血淸蛋白은 非選擇性 蛋白漏出型 血淸蛋白盆畵像을 보였다. 人蔘抽出液處理群에서도 비슷한 현상을 보였으나 對照群에 비하여 심하지는 않았다. 이는 人蔘抽出液이 肉腫癌쥐에 肉腫癌의 發育에 있어서 약간의 遲延性 내지는 免疫性을 가지게 하는 것으로 사료된다. 3) 肉腫癌쥐에 있어서의 serum cholesterol의 함량은 中期까지는 증가되다가 末期에서는 감소되었다. 그러나 人蔘抽出液處理群에서는 약간의 증가현상을 보였다. 末期에 감소되는 현상은 여러 가지 원인중 특히 攝食量의 부족에 기인되는 것으로 추측되는바, 인삼추출액이 담癌體에 대하여 약간의 耐性을 가지게 함으로서 攝食量이 줄지 않음에 기인되는 것으로 추측된다. 4) 肉腫癌쥐의 serum total lipid는 癌이 진전됨에 따라서 증가되었다. 그리고 $\\alpha-, \\beta-$lipoprotein은 감소현상을 보였으나 pre $\\beta$-lipopotein은 급격히 증가되었다. 人蔘抽出液處理群에서는 對照群에서의 初期의 값을 보여주었다. 이러한 현상 역시 人蔘抽出液이 위와 같은 이론에 의해서 生體를 보호해 준 것으로 추측되며 肉腫癌에 대하여 약간의 耐性을 갖게한 결과로 판단된다.
포유류의 난소내 여포의 폐쇄기작을 알아보기 위하여 본 실험을 행하였다. 정상과 폐쇄를 형태적으로 판정한 돼지의 난소내 개개 중여포의 여표액내 스테로이드 호르몬과 단백질을 방사면역측정법과 SDS-전기영동으로 각각 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Progesterone은 여포성숙기의 여포액내 폐쇄여포에서 높은 농도를 나타내었고testosterone의 경우 황체기의 정상여포 및 여포성숙기의 폐쇄여포에서 높은 농도를 나타내었다. estradiol은 여포성숙기의 폐쇄여포에서 정상여포에 비해 현저히 낮았다. 여포액내 존재하는 단백질의 SDS-PAGE 결과, 혈청에 존재하지 않는 4종의 단백질을 확인하였다. 난소주기에 따라 112K, 141K의 단백질이 확인되었고, 폐쇄여포액내 특이하게 존재하는 23K, 24K의 단백질도 확인할 수 있었다. 이상의 결과로 보아 난소주기에 따라 여포액재에 존재하는 스테로이드 호르몬의 농도와 단백질의 조성이 서로 같지 않음을 알 수 있었으며 여포의 폐쇄기작에 있어서도 난소주기에 따라 분명한 차이가 있음을 알 수 있었다. 그러나 이들 폐쇄여포에 존재하는 단백질들의 생리적인 역할을 이해하기 위하여는 많은 연구가 수행되어야 한다고 사료된다.
파라미아과 3속 5종에 대한 유전적 변이 및 계통진화를 규명하기 위하여 전기영동법을 이용, 24개 유전자를 검출 분석하였다. 피라미아파 5종의 평균 유전적 변이정도는 A=1.8, P=16.5%, HD=0.043, HG=0.049로 타 어류군에 비하여 낮은 편이였다. 그러나 1. chinensis는 평균 변이가 P=32.5%, HD=0.100, HG=0.119로 기존에 보고된 타어류의 변이값보다 높은 값이었고 O. bidens는 그 변이정도가 제일 낮았다(P=4.295, HD=0.008, HG=0.008). 피라미아과 각 종의 집단간 평균 근연치는 5=0.940으로 비교적 근연관계가 가까웠으며 O. bidens는 5=0.992로서 그 값이 제일 큰 반면 Z. platypus는 5=0.899로서 제일 낮은 값을 나타내었다. 종간의 근연치를 비교한 결과 A. chinensis는 타 4종과 평균 5=0.235로 가장 낮은 유사성을 나타내는 반면, Z.temmincki 2종은 5=0.822로서 유사성이 가장 높았다. 또한 Zacco속의 Z. Platypus는 동일속의 타 2종보다 속이 다른 O. bidens와의 유사성이 더 높게 나타났으며(S=0.462), Z.temmincki 2종과는 속 이상의 차이치를 나타내었다(S=0.340) 분화연대를 추정한 결과 피라미아과 5종은 과거 약 760만년전(선신세)에서 100만년전(홍적세)사이에 분화된 것으로 추정되었다.
棲管 갯지렁이 Schizobranchia insignis Bush의 卵子에서 일어나는 變化의 形態學的 및 生化學的 관계를 규명코자 卵子形成中 細胞學的인 變化와 卵子의 年中 分布에 대하여 연구하였다. 卵原細胞分裂 직후 난자는 卵巢에서 離脫하여 體腔囊에서 最大의 크기인 직경 6180$\\mu$ 까지 성장한다. 난자형성은 年中 계속 일어나고 있으며, 産卵期間은 1월에서 3월간이다. 난자가 最大의 크기에 달하면 그 후로는 크기에 변화가 없으며 體腔囊에 축적된다. 核仁은 직경 5-10$\\mu$의 난자에서 처음으로 나타나며 난자형성 초기단계에서 크기의 증가를 보여 직경 100-120$\\mu$의 난자에서 가장 크고, 직경 120-180$\\mu$의 기간동안 크기의 변화가 거의 없다. 仁은 최초에는 단일구획 이지만 난황물질형성 직전에 이중구획으로 나뉘어진다. 세 종류의 난황물질이 난자형성 기간중 서로 다른 시기에 형성된다. 脂質顆粒과 성분이 불확실한 타원형의 顆粒은 초기에 나타나지만, 대부분이 직경 80$\\mu$이상의 난자에서 형성된다. 단백질 난황과 皮質顆粒은 반드시 직경 80$\\mu$이상의 난자에서만 형성된다. 미세융털이 직경 80$\\mu$의 난자에서는 卵黃膜에 다량 존재하지만 직경 180$\\mu$의 난자에서는 거의 찾아 볼 수 없다.
실험에 사용한 플라나리아는 Dugesia japonicia Ichikawa et Kawakatsu로서 核型分析에 의하여 種을 확인하였다. 이 種의 表皮上皮을 구성하는 세포들의 세포화학적 및 미세구조적 특징을 밝히고자 본 실험을 行하였다. 세포화학적 방법으로는 hematoxylin-eosin, periodic acid-schiff(PAS)反應, alcian blue(pH 2.5), PAS-alcian blue反應 그리고 methylene blue-basic fuchsin 등으로 염색을 시행하였고, 체표면을 走査電子顯微鏡으로, 또한 各部位의 微細構造를 透過電子顯微鏡으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 플라나리아의 表皮는 單層圓桂形上皮로 되어 있었고, 상피를 구성하는 세포들은 형태학적 및 세포화학적 특성에 의하여 6類型의 세포들도 區分되었다. 1) 纖毛上皮細胞 (Ciliated epithelial cell) : microtubule 배열이 9+2型인 섬모를 가지고 있었다. 2) 好酸性細胞(Eosinophilic cell) : 세포질에 소수의 큰 好酸性 顆粒을 가진 세포로서, 전자 현미경하에서는 顆粒들은 棒狀形이고, 전자밀도가 매우 낮은 基質에 섬유상 구조물이 분산되어 있었다. 3) 粘液細胞(Mucous cell) : 세포질에 PAS 반응에 강한 陽性을 보이는 다양한 모습의 과립($0.8\\times0.3 \\muM$) 들이 충만되어 있었다. 4) 棒狀體形成細胞(Rhabdite-forming cell) : 세포질쪽에 매우 강한 eosinophilia를 나타내는 다양한 크기의 棒狀體顆粒을 한 개 혹은 여러개 가지고 있었으며, 顆粒의 전자밀도는 높았다. 5) A型 好鹽基性顆粒細胞(Basophilic granule cell type A) 背腹部 상피에서 관찰되었고 그 세포질에는 alcian blue(ph2.5)에 강하게 염색되는 $1.5\\times1.0 \\mum$의과립들을 상당히 많이 포함하고 있었다. 과립들은 형태가 球形에 가깝거나 혹은 불규칙형이였고 전자밀도가 높았다. 이類型의 세포들은 柔組織에서 基底膜은 通過하여 表皮上皮로 이동되었다. 6) B型 好鹽基性細胞(Basophilic granule cell type B) 兩側部의 表皮上皮에서 관찰되었으며 세포질에는 PAS 반응에 강한 陽性을 보이는 $0.7\\times0.4 \\mum$의 과립들을 상당히 많이 包含하고 있었다. 전자밀도가 매우 높은 과립들의 형태는 비교적 불규칙하였다. 이類型의 세포들은 역시 柔組織에서 표피로 이동되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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