Osmotolerant yeast isolated from soy paste could grow on media with 2 M NaCl. This strain was identified as Zygosaccharomyces rouxii by biological characteristics, RFLP of ribosomal DNA and mating with compatible haploid strain. Growing rate of the Z. rouxii YDJ was slower than Saccharomyces cerevisiae. Z. rouxii YDJ accumulated trehalose, which is known as one of the osmolytic protectants, in cells cultured on media with salt. Enzyme activity of trehalose phosphate synthase related to trehalose biosynthesis of the YDJ was lower than those of S. cerevisiae. Trehalase activity related trehalose degradation was also lower in Z. rouxii YDJ than S. cerevisiae. However, as Z. rouxii accumulated trehalose by salt treatment, salt tolerancy of Z. rouxii was assumed to be related to trehalose in additon to glycerol.
To investigate the yeast florae in the traditional and commercial Kochujang, computer identification systems, Vitek, API kit and conventional identification methods were used. Yeast florae of each process were compared and their typical physiological characteristics were also tested. Various process intervals yielded 330 colonies, which resulted in 11 species 184 strains classified. They were identified into Candida glabrata C. guilliermondii. C. humicola. C. rugosa, C. zeylanoides, Cryptococcus uniguttulatus, Pichia farinosa, Rhodotorula glutinis, Saccharomyces cerevisiae and Zygosaccharomyces rouxii. The strains of Candida, Pichia, Saccharomyces and Zygosaccharomyces were existing in both processes. In case of commercial process, the maximum distribution of Z. rouxii and S. cerevisiae were 33% at 15 day fermentation and 13% at 21 day, respectively. The distribution of Candida spp. was gradually decreased throughtout the fermentation period from 40% to 10%. In the traditional process, the maximum distribution of Z. rouxii and S. cerevisiae were 53% after 3 months and 26% after 7 months, respectively, S. cerevisiae and Z. rouxii showed distintive growth pattern at the high concentration of glucose and sodium chloride and played important roles in both processes of fermentation. Physiological tests revealed that only two major yeasts. S. cerevisiae and Z. rouxii, showed vigorous carbon dioxide formation under the tested conditions.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.22
no.1
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pp.101-107
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1993
Zygosaccharomyces rouxii is a salt-tolerant yeast which plays an important role during the ripening stage of soy sauce fermentation. Z. rouxii used in the experiment could grow in YPD (1 % yeast extract, 2% peptone and 2% glucose, pH5.0) medium with 18% (w/v) NaCl, whereas Saccharomyces cerevisiae could only grow in YPD medium with less than 8% NaCl. In the presence of 15% NaCl, Z. rouxii accumulates a large amount of glycerol as a compatible solute within the cells in the exponential phase. It is a characteristic of salt-tolerant yeasts. From the chemical analyses on membrane lipid fluidity, the membrane structure of the cells grown in 15% NaCl was suggested to become more rigid and its fluidity was decreased to keep glycerol within the cells in response to surrounding medium with high concentrations of salt.
Saccharomyces cerevisiae and Zygosaccharomyces rouxii are known to produce alcohol in gochujang. To reduce alcohol production, garlic and chives were applied to gochujang solution to find their inhibitory effect on S. cerevisiae and Z. rouxii. The 70% ethanol extract of garlic and chives showed significant inhibition activity against S. cerevisiae and Z. rouxii, showing growth inhibition zone of 14.00±0.00~25.33±0.58 mm by disc diffusion method. In addition, the addition of 70% ethanol extract of garlic and chives in 10% gochujang solution spiked with S. cerevisiae and Z. rouxii reduced the numbers of total aerobic bacteria (below 7 Log CFU/g) and yeast (below 4 Log CFU/g), alcohol content (below 0.30%), respectively. In conclusion, the addition of garlic ethanol (70%) extract or chives ethanol (70%) extract to gochujang inhibited the growth of S. cerevisiae and Z. rouxii, resulting in reduced alcohol content in gochujang. For further study, it is necessary to conduct food application experiments by using real gochujang paste.
This study was designed to find out the rapid fermentation of soy sauce from koji hydrolyzates using air bubble column reactor packed with coimmobilized mixed culture system. Continuous ripid production was performed by coimmobilized Z. rouxiii BH-90 and C. versatilis BH-91. Coimmobilized cells of Zygosaccharomyces rouxii BH-90 and Candida versatilis BH-91 mixture cells in the column reactor produced 2.8% ethyl alcohol and 18mg/L 4-ethylguaiacol over 96 hours under the optimal conditions. Coimmobilized cells produced 2.30∼2.4% ethyl alcohol during 30 days, and decreased gradually from 40 days to 70 days. Also coimmobilized cells produced 4-ethylguaiacol at the constant rate of 16∼18mg/L and decreased gradually after 40 days. Final product of soy sauce contained 2.4% ethyl alcohol and 18mg/L 4-ethylguaiacol. However, amino acid compositions of soy sauce were consisted of predominantly glutamic acid, leucin, arginine, aspartic acid, Iysine and valine, which were more than 50% of total amino acid.
Saccharomyces cerevisiae and Zygosaccharomyces rouxii were electrofused and fermented in germaniumfortified nutrients to produce high-yield, organic germanium. The conditions for the preparation of protoplasts from both strains and for electrofusion were studied. The protoplasts of both cells formed long pearl chains and the cell membranes were lysed and fused through cellulase and high frequency voltage $(450{\sim}750V/128{\sim}512\;{\mu}sec)$. The fusants with the fastest growth were selected, and then characterized for their carbohydrate usage and tolerance to glucose and salts. The glucose tolerance of the fusants was better than that of S. cerevisiae and similar to that of Z. rouxii. The fusants appeared to have resistance to 12% NaCl. The cell size of the fusants was greater than that of the parental strains. The fusant cells contained more gemlanium than the parental cells did. The electrofusion of S. cerevisiae and Z. rouxii increased the cell capacity and accumulation of germanium in the yeasts. This method was proved to be effective to produce a high quantity of organic germanium.
In order to improve the quality of commercially manufactured Doenjang, yeast florae, gas and alcohol formation during fermentation of Doenjang were periodically examined. Candida rugosa, Candida zeylanoides, Pichia farinosa Saccharomyces cerevisiae and Zygosaccharomyces rouxii were isolated and identified from Doenjang at various fermentation stage. S. cerevisiae and Z. rouxii showed distintive gas and alcohol formation activities and the distribution ratio of Z. rouxii was 26% at 14 days and 76% as prevailed yeast strain after 30 days fermentation, respectively. Ethanol content of Doenjang was gradually increased into 2.19% at final stage of fermentation. The amount of gas generated during fermentation was 9.75 ml/g after 14 days, 4.5 ml/g after 30 days and decreased into negligible amount after 45 days fermentation. These inhibitory effects on gas generation by fermentation period would be ascribed to the ethanol Produced for fermentation. This results suggest that gas generation in commercially manufactured Doenjang could be eliminated through the effective control of fermentation by yeast without application of any preservatives.
내염성 조건에서 phytase를 생성하는 효모 균주를 개발하기 위하여 phytase를 생산하는 효모인 S. cerevisiae CY 균주와 내염성 효모인 Z. rouxii Y-80 균주 사이의 전기적 세포융합을 실시하였다. S. cerevisiae CY 균주의 Z. rouxii Y-80 균주의 배양된 세포를 1.0%의 ${\beta}$-mercaptoethanol로 전처리하고 Tunicase로 세포벽을 분해시킨 후 원형질체를 얻었다. 각 균주의 원형질체는 electrofusion 완충액에 1:1의 비율로 현탁한 후 AC 13V에서 30초간 처리하고 고전압(DC 500 V/100 ${\mu}sec$)을 가하여 전기적 세포융합을 실시하였다. 선별된 융합균주는 NaCl이 10% 첨가된 배지에서 친주들과 비교한 결과 Z. rouxii Y-80 균주보다는 생육면에서 25% 이상 증가하였으며, phytase 활성도는 친주인 S. cerevisiae CY 균주 대비 53%의 생성도를 확인하였다.
The aim of this study was to find out the rapid fermentation of soy sauce from koji hydrolyzate using column type reactor packed with immobilized yeast cells. Each immobilized cell of Zygosaccharomyces rouxii BH-90 and Candida versatilis BH-91 in the packed column type reactor produced 2.8% ethyl alcohol and 18mg/l 4-ethylguaiacol over 96 hours under the optimal condition. Continuous fermentation was performed by immobilized Z. rouxii BH-90 packed in column type reactor. Immobilized Z. rouxii BH-90 produced 2.30~2.85% ethyl alcohol during 30 days, and decreased gradually from 40 days to 80 days. Also C. versatilis BH-91 produced 4-ethylguaiacol at the constant rate of 16~18mg/l and decreased gradually after 40 days. Final product of soy sauce contained 2.8% ethyl alcohol and 18mg/l 4-ethylguaiacol. However, amino acid compositions of final products were consisted of predominantly glutamic acid, leucine, arginine, aspartic acid, lysine and valine, which were more than 50% of total amino acid.
Glutaminase production in Zygosaccharomyces rouxii by solid-state fermentation (SSF) is detailed. Substrates screening showed best results with oatmeal (OM) and wheatbran (WB). Furthermore, a 1:1 combination of OM:WB gave 0.614 units/gds with artificial sea water as a moistening agent. Evaluation of additional carbon, nitrogen, amino acids, and minerals supplementation was done. A central composite design was employed to investigate the effects of four variables (viz., moisture content, glucose, corn steep liquor, and glutamine) on production. A 4-fold increase in enzyme production was obtained. Studies were undertaken to analyze the time-course model, the microbial growth, and nutrient utilization during SSF. A logistic equation ($R^2$=0.8973), describing the growth model of Z. rouxii, was obtained with maximum values of ${\mu}_m$ and $X_m$ at $0.326h^{-1}$ and 7.35% of dry matter weight loss, respectively. A goodfit model to describe utilization of total carbohydrate ($R^2$=0.9906) and nitrogen concentration ($R^2$=0.9869) with time was obtained. The model was used successfully to predict enzyme production ($R^2$=0.7950).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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