The VP2 gene of aquatic birnavirus, Korean isolate (GC-1) was cloned and expressed using the baculovirus expression system. The VP2 gene and VP2 partial gene, which contained a neutralizing epitope, were constructed for recombinant transfer vectors, for baculovirus expression. The expressed recombinant proteins were confirmed by indirect immuno fluorescence antibody (IFA), SDS-PAGE and Western blot. The level of expression was checked at regular time using IFA and Western blot. To measure the neutralizing activity of recombinant proteins against GC-1 strain, the antisera against recombinant proteins were produced by using guinea pigs. The result showed that the antisera neutralized the GC-1 strain. However, the neutralizing titer was higher in antisera against the VP2 gene expressed recombinant protein than that of VP2 partial gene recombinant protein.
A multiplex PCR was developed for the simultaneous detection and differentiation of Mycoplasma (M.) hyopneumoniae and M. hyorhinis in clinical samples. Improved sensitivity is advantage of this technique over the previously reported multiplex assay. It was capable of detecting as little as 125 fg genomic DNA from M. hyopneumoniae and 62.5 fg genomic DNA from M. hyorhinis. Application of this multiplex PCR method to field isolates showed that M. hyopneumoniae and M. hyorhinis were present in 29% (107 of 370) of lung specimens and no mycoplasmas were detected in 56% (208 of 370) of the slaughtered pigs' lungs. At the farm level, M. hyopneumoniae and M. hyorhinis were detected in 34 of 36 (94.4%) randomly selected farms. We conclude that this assay would prove itself a value tool for monitoring these mycoplasmal infections and both M. hyopneumoniae and M. hyorhinis have been widely spread in swine herds of Korea.
Swine dysentery caused by Brachyspira hyodysenteriae, an anaerobic, beta-hemolytic spirochete, is a severe mucohemorrhahic diarrheal disease that primarily affects pigs during the growing and finishing period. The current standard laboratory procedure to culture and identify B hyodysenteriae takes 3 to 7 days. This report present a rapid PCR for detection B hyodysenteriae in a single reaction using DNA from swine intestinal samples. The PCR produced a specific 421bp PCR product with template DNA purified from B hyodysenteriae, and the accuracy for detection of B hyodysenteriae by PCR results compared with those of conventional method was 100% in intestinal specimens. Nonspecific bands were not detected with B innocens, a nonpathogenic common inhabitant spirochete, including other enteric bacterial organisms. This procedure could detect as little as 50 pg of template DNA for B hyodysenteriae.
Park, Choi-kyu;Lyoo, Young-soo;Lee, Chang-hee;Jung, Jong-wook
Korean Journal of Veterinary Research
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v.38
no.2
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pp.314-318
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1998
An establishment of effective control measures to PRRSV infection in swine industry depends on a sensitive and specific diagnosis to detect either viral antigen and/or antibodies to PRRSV. Several diagnostic methods are available to detect antibodies against PRRSV, including IPMA, IFA and ELISA tests have been successfully developed. Sensitivity of the indirect immunofluorescent assay in MA-104 cells using Korean field isolate PL96-1 was superior to that of VR-2332 and field isolate PL96-2. Sensitivity and specificity of the IFA test with PL96-1 were comparable to those of commercial ELISA test kit but ELISA test was more sensitive for the detection of declining antibodies to PRRSV in finishing pigs. In this study we concluded that IFA and ELISA test could be utilized to detect antibodies to PRRSV and the results generated from these two tests were comparable and there were no significant difference between these two tests.
To isolate Lactic acid bacteria for animals, we have screened from Kim-chi, swine intestine, swine feces, and dairy products by random selection and anti-viral, antipathogenic bacteria test. Among them, CLP-1 shown that inhibitory effect against rotavirus, porcine epidemic diarrhea (PED) virus, Salmonella sp, and E.coli. By examining biological property, API-ZYM and identified Lactobacillus plantarum by 16S rDNAgene sequence. CLP-1 determined resistance to low pH and bile salt. Futhermore, the cell body of CLP-1 adhered to the intestinal epithelium tissue of swine and Caco-2 cell. CLP-1 was examined on cell immune system modulating activity in vitro. The whole cell and cell culture supernatant was increasing of interferon-${\beta}$ activity. And then, CLP-1 increased prevention effect by Salmonella enteritidis infection in SPF chickens. And we determined similar result in pigs.
Kim, Jae-Hoon;Hwang, Eui-Kyung;Kim, Yong-Joo;Sohn, Hyun-Joo
Korean Journal of Veterinary Pathology
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v.1
no.2
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pp.125-134
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1997
Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus infection (PRRSV) was confirmed by serology histopathology immunohistochemistry and bacteriologic examination in young pigs. Four suckling and six weaned piglets submitted from three different farms showed coughing sneezing labored rapid abdominal respiration lethargy and anorexia. Grossly apical and cardiac lung lobes appeared mottled with pale to dark tan discoloration. Submandibular and bronchial lymph nodes were tan and enlarged. All piglets were seropositive for PRRSV antibodies by the indirect immunofluorescent antibody(IFA) test. Microscopically lung lesions were characterized by hyperplasia and hypertrophy of type 2 pneumocytes infiltration of mononuclear cells in alveolar intersitium accumulation of necrotic debris in alveolar spaces accompanied by proliferation of alveolar multinucleated syncytial cells. Using immunohistochemical technique PRRSV antigens were demonstrated in alveolar macrophages and type 2 pneumocytes in histologic lung tissue sections. Also PRRSV antigens were detected in brain lymph nodes spleen and heart. Additionally piglets showed nonsuppurative meningoencephalitis mandibular necrotic lymphadenopathy splenic atrophy and myocardial necrosis.
The present study was conducted to investigate biochemical properties and antimicrobial drug susceptibilities of 47 strains of E rhusiopathiae isolated from the cases of acute septicemic swine erysipelas in Youngnam and Kyunggi provinces during the period from June 1988 to December 1989. The isolants were identified as E rhusiopathiae on the basis of cellular and colonial morphology, and characteristic reactions in some biochemical tests. All the organisms produced hydrogen sulfide in triple sugar iron agar and showed the characteristic "pipe cleaner" type of growth in gelatin stab cultures. The majority of biochemical and cultural properties of E rhusiopathiae isolated from pigs affected with acute erysipelas were identical to those of the reference strains employed. All the isolates were highly susceptible to penicillin G, ampicillin, erythromycin (MIC:0.025~0.39IU or ${\mu}g/ml$), and moderately susceptible to oleandomycin, oxytetracycline, chloramphenicol(MIC:$0.78{\sim}25{\mu}g/ml$). Kanamycin and sulfadimethoxine showed no activity against the isolates(MIC:>$400{\mu}g/ml$). The MICs of dihydrostreptomycin presented two distribution peaks; of 47 strains, 5(10.6%) were resistant to dihydrostreptomycin (MIC:$400{\mu}g/ml$), while the majority of them were susceptible to the drug.
Muscle fiber characteristics were evaluated for predictability of meat quality traits using 231 crossbred pigs. Muscle $pH_{45min}$, R-value, and $pH_{24hr}$ were selected to estimate regression equation model of drip loss and lightness, although variances of coefficient estimates could only account for small part of drip loss (about 16.3 to 25.3%) and lightness (about 16.9 to 31.7%). Muscle $pH_{24hr}$ was represented to drip loss and lightness, which explained corresponding 25.3 and 31.7% of estimation in drip loss and lightness, respectively. Area percentage of type IIb fiber significantly contributed to prediction of metabolic rate and meat quality. However, equations predicting meat quality traits based on area percentage of type IIb fiber alone are less useful than ones based on early postmortem parameters. These results suggest estimated model using both metabolic properties of muscle and postmortem metabolic rate could be used for prediction of pork quality traits.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.24
no.3
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pp.38-44
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1998
The skin permeation and the skin primary irritation of two UV filters from caprylic capryl triglyceride (oil), oil in water (O/W) and water in oil (W/O) emulsions, were evaluated. We selected octyl moth-oxycinnamate (OMC) broadly used in cosmetics and polymeric sunscreen agent (PSA, average MW: 2,000) synthesized by the coupling reaction of 2-ethylhexyl 4-hydroxycinnamate with poly vinylbenzyl chloride, as model UV filters. For in vitro skin permeation experiments, Franz diffusion cells (effective diffusion area:1.766cm) and the excised skin of female hairless mouse aged 8 weeks were used. Oil or emulsion containing UV filters was applied in the donor compartment. The skin primary irritation was evaluated with fe-male guinea pigs (8-10 weeks,350-400 g). In oil and emulsions, the skin permeability and the skin primary irritation of PSA were lower than those of OMC. The skin permeability of UV filters was lower when they were in oil-in-water emulsion (OIW) than water-in-oil emulsion (W/O). We suggest that O/W system would be more useful when compared with W/O system, and PSA could be a good candidate for a future sunscreen agent for reducing the skin irritation.
This study was carried out to obtain basic information for possibility of oral vaccine in carrot using Agrobacteruim -mediated transformation system. The epitope region of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) spike gene which is classified as a member of the Coronaviridae and causes an acute enteritis in pigs was successfully expressed in carrot (Daucus carota) using the Agrobacterium-mediated transformation system. Hypocotyl segments of in vitro germinated plantlets were infected with Agrobacteriun tumefaciens LBA 4404 harboring PEDV spike gene. Embryogenic callus (EC) was induced on MS selection medium with 1 mg/L 2,4-D, 50 mg/L kanamycin and 300 mg/L cefotaxime after 45 days of culture. Subcultured ECs on MS selection medium without 2,4-D were converted to somatic embryos (SE) of various stage; globular, heart and torpedo stage. Putative transgenic embryos were selected on MS medium with 50 mg/L kanamycin and 300 mg/L cefotaxime. Regenerated plantlets from transformed SE were induced on MS medium containing 50 mg/L kanamycin after 30 days of culture. Genomic PCR confirmed the integration of PEDV spike gene into nuclear genome of carrot and northern blot analysis demonstrated the expression of PEDV spike gene in transgenic carrot.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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