The present study was set to develop comprehensive system for assessing the safety of drinking water using PCR-reverse blot hybridization assay (REBA). The REBA developed in this study can detect waterborne pathogens such as Shigella spp., Salmonella spp., Citrobacter spp., Enterobacter spp., Klebsiella spp., Yersinia spp., Mycobacterium spp., Listeria spp. at the genus level, and Escherichia coli, Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Yersinia enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Mycobacterium avium complex, M. marinum, Enterococcus faecalis, and Staphylococcus aureus at the species level, and E. coli O157:H7 at the strain level.
m-Toluate 최소배지에서 선택적 enrichment culture를 통하여 82개의 세균의 균주를 분리하였으며, ol들 중 두 균주는 Pseudomonas cepacia, 한 균주는 P. Putida, 한 균주는 Yersinia intermedia, 그리고 한 균주는 Flavobacterium odoratum으로 동정되었다. P. cepacia SUB37은 P. putida mt-2의 TOL 플라스미드와 비슷한 크기의 플라스미드를 가지고 있었으며, Flavobacterium odoratum과 Yersinia intermedia는 이보다 더 큰 플라스미드를 갖고 있었다. P. cepacia SUB37은 streptomycin에 감수성을 나타내었으나, rifampicin에는 내성을 나타내었다. 플라스미드를 갖는 P. cepacia SUB37은 탄화수소를 해당 알콜과 알데히드를 거쳐서 benzoate와 toluate 로 분해하였다. 플라스미드 제거실험으로, P. Cepacia SUB37의 플라스미드에는 탄화수소 분해과정 중 toluene과 xylene을 benzoate, toluate로 분해하는 효소와, 계속하여 meta pathway를 거치는 단계의 효소를 코딩하는 유전자들이 있음이 확인되었다. 또한 P. cepacia SUB37은 생장이 왕성하였을 때 m-toluate를 거의 분해하였다.
Yersinia enterocolitica has been known to be an important enteric pathogen especially in Scandinavian countries and Canada. In Korea, the authors reported the first case of Y. pseudotuberculosis septicemia in 1979. In 1980, three isolates of Y enterocolitica were obtained from 3 adult patients with enteritis, besides the already reported one in a 5-month-old child, during March to June 1980. Difficulty in the isolation was experienced; ie., the organism was isolated only from the SS primary isolation plate in one case and in the other two cases only from the SS plates inoculated with overnight culture of selenite broth. The isolates showed typical cultural and biochemical characteristics except for the nonmotility even at room temperature. Two isolates were indole negative possibly belonging to Wauter's biotype 3 and the other one was indole positive belonging to biotype 2. One patient was tested for the serum agglutinin titer on the 8th hospital day and it was found to be 1:128. All of the isolates were susceptible to chloramphenicol, colistin, gentamicin, kanamycin, tetracyclne, and tobramycin by the Kirby-Bauer disc diffusion method. All of the infections were controled by ampicillin, amoxicillin, amikacin, or gentamicin treatment. It is considered urgent to broaden our knowledge on yersiniosis in Korea not only by isolating, serotyping and biotyping of the organism, but also by surveying serum agglutinin titer of enteritis patients and normal individuals.
Yersinia enterocolitica causes various diseases in humans, including enteritis. The onset of such diseases is closely related with the expression of important virulence factors, particularly outer membrane proteins (OMPs). The expression of OMPs depends on several factors, including temperature, and origin, biotype and serotype of the bacteria. Recently, concerns over food safety have increased along with the demand for the development of sensitive, rapid, and pathogen-specific detection methods. To develop a suitable detection method for Y. enterocolitica isolated from Korean moutainspring water and pig feces, the OMP expression patterns were analyzed phenotypically and immunologically using 12 representative strains from 51 Y. enterocolitica Korean isolates. A 38-kDa OMP was commonly observed in all strains. However, additional OMPs were also observed in different biotypes and serotypes as well as bacterial origins, by incubating Y. enterocolitica at a low temperature. The specificity of the 38-kDa OMP was confirmed by a Western blot analysis with antisera against Y. enterocolitica and Brucella abortus. The results, therefore, indicate that the 38-kDa OMP could be used as a marker for detecting Y. enterocolitica in the environment or for seromonitoring.
This study was performed to investigate the distribution of Yersiniae and correlation between Yersiniae and indicator organism by time and area in spring water located in northern part of Seoul. Samples collected from 46 spring waters located in four mountains(Dobong, Bukhan, Surak, Bulam) were inspected to detect Yersiniae and indicator organisms. And also there were examined bioserological characteristics and resistance of ahtibiotics of the isolated Yersiniae.The result were as follows. 1. The isolation rate of Yersiniae was 22% in February and 20% in April. The isolated species were 6 strains of Y. enterocolitica, 6 strains of Y. aldova, 4 strains of Y. intermedia and 43 strains of Y. pseudotuberculosis. The serotype of Y. pseudotuberculosis isolated from was all O:5 and biotype of Y. enterocolitica isolated from was all O:3. 2. The Geometric mean of standard plate count, coliform, and psychrotrophilic bacteria were 3.4 CFU/ml, 1.2 MPN/100 ml and 33.0 CFU/ml in February and 3.1 CFU/ml, 1.5 MPN/100 ml and 20.5 CFU/ml in April respectively. There was no significant difference by time and area but the indicator organisms were correlated significantly with each other (p<0.05). 3. Because detection of Yersiniae was not statistically associated with indicator organism, Yersiniae can be detected in the spring water approved microbiologically (p<0.05). 4. The Yersiniae isolated were resistant to Ampicillin, Colistin, Carbenicillin and Coilstin. All isolaed Y. enterocolitica were resistant to Ampicillin (100%). In the case of Y. pseudotuberculosis, only 1 of 3 isolated was resistant to Colistin but susceptible to other antibiotics.
Joh, Seong Joon;Kweon, Chang Hee;Kim, Min Jeong;Kang, Min Su;Jang, Hwan;Kwon, Jun Hun
대한수의학회지
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제50권1호
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pp.29-35
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2010
Yersinia (Y.) ruckeri has been recognized as a serious bacterial pathogen to several kinds of fish, including rainbow trout. However, there are no reports about the characteristics and pathogenicity of Y. ruckeri isolated from farm-cultured eels. In this study, we isolated and characterized Y. ruckeri from the farm-cultured eel Anguilla japonica in Korea. We investigated the phenotypic and genotypic characteristics of Y. ruckeri and tested the virulence of Y. ruckeri isolates on experimentally infected eels. Examination of the flagellar morphology of Y. ruckeri by electron microscopy showed peritrichous flagella in its cell body. Biochemical reaction studies showed overall identical profiles between the isolates and the reference strain of Y. ruckeri in API 20E and API ZYM tests. We sequenced the 16S rRNA of the Y. ruckeri (1,505 bp) for the genotypic characterization (National Center for Biotechnology Information accession number EU401667). Comparison of the 16S rRNA sequences with previously reported Y. ruckeri strains revealed similar phylogenetic relationships. In the virulence assay of the Y. ruckeri on eels, the eels exhibited listlessness, but Y. ruckeri was reisolated from those of the gills and kidneys.
A study on the isolation of Yersiniae from the feces of wild animals(mammals 376, birds 19 and reptiles 13) in zoo and the biotype and serotype and susceptibility of 12 antibiotics was carried. Out of 408 animals, Yersiniae were isolated from 28 animals(6.9%). Of 28 isolates, 27 isolates(96.4%) were Y. enterocolitica and 1(3.6%) was Y. kristensenii. According to the species, 25(6.6%) of Y. enterocolitica and 1(0.3%) of Y. kristensenii were isolated from 376 mammals, 2(15.4%) of Y. enterocolitica from 13 reptiles but not isolated from 19 birds. According to the eating pattern, 8(5.2%) of Y. enterocolitica were isolated from 155 carnivora, 13(10%) of Y. enterocolitica from 123 herbivora, and 6(4.9%) of Y. enterocolitica and 1(0.8%) of Y. enterocolitica from 123 omnivora. Out of 27 isolates of Y. enterocolitica, all were biotype 1. And predominant serotype was 0:21(40.7%), and 0:5(37.0%), 0:6(11.1%), 0:1(3.7%), 0:9(3.7%) and untypable(3.7%). Yersiniae isolated from zoo animals were resistant to cephalothin(100%), ampicillin(96.4%), carbenicillin(96.4%) and tetracycline(14.3%) and streptomycin(3.6%) and susceptible to chloramphenicol(100%), colistin(100%), gentamicin(100%), kanamycin(100%), nalidixic acid(100%), polymyxin B(100%) and tobramycin(100%). The predominant multiple resistance pattern was Am-Cf-Cb(82.1%), and Am-Cf-Cb-Te(10.7%) and Am-Cf-Cb-Te-Sm(3.7%).
한국에서 분리한 Yersinia enterocolitica의 병원성 여부를 조사하기 위하여 지가응집 시험, 칼슘 의존성 시험, HeLa 세포 침투시험, Sereny 시험, Crystal violet 결합시험과 plasmid의 전기영동을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 병원성 Y. enterocolitica는 자가응집, 칼슘 의존성, crystal violet 결합시험에서 양성반을을, 비병원성 균주는 음성반응을 각각 나타내었다. 그러나 양성반응은 $37^{\circ}C$에서만 나타나 병원성의 발현이 온도에 의존됨을 알 수 있었다. Sereny 시험에서 혈청형 0:8인 표준균주만이 양성반응을 보인 반면에 혈청형 0:3, 0:9인 실험균주들은 대부분 음성반응을 나타내어 Y. enterocolitica의 병원성은 혈청형에 따라 실험동물에서 다르게 발현됨을 알 수가 있었다. HeLa 세포 침투시험에서 실험균주 모두가 양성반응을 보여 병원성 균주를 구분하기에는 부적합하였다. 대부분의 병원성 균주는 36-38Mdal의 plasmid를 가지고 있었으나 비병원성 균주는 없었으며, plasmid가 자가응집 및 칼슘 의존성, crystal violet 결합에 관여함을 알 수가 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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