Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.5
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pp.796-801
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2001
A total of 277 mineral spring water samples in Kangwon province from 1999 to 2000 were analyzed for the presence of Yersinia spp. by the conventional Food and Drug Administration protocol, and presumptive strains were identified by morphological, cultural and biochemical tests according to Bergey’s manual. Also, the biotypes, serotypes, and susceptibility to 12 antibiotics were tested. Among the total 277 mineral spring water samples, 40 samples (14.4%) were found to be contaminated with Yersinia species. Among the 40 strains of Yersinia spp. isolates, 33 strains (82.5%) for Yersinia enterocolitica, 4 strains (10%) for Yersinia frederiksenii, 2 strains (5%) for Yersinia intermedia, and 1 strain (2.5%) for Yersinia sakazaki were identified, respectively. Of 40 Yersinia spp. isolates, Yersinia enterocolitica (82.5%) was the most predominant species in the mineral spring water samples compared to other Yersinia species. Compared to direct culture method after KOH treatment and KOH treatment method after cold enrichment for better isolation ratio of according to comparision of Yersinia species, the detection ration (18.5%) of KOH treatment method after cold enrichment was about 3 times better than that (6.1%) of direct culture method after KOH treatment. According to serotypes of Y. enterocolitica isolates, O : 5 (12.9%) was the most predominant and followed by O : 3 (9.7%), O : 8 (6.5%), and O : 9 (3.2%), and others. For biotypes of Y. enterocolitica isolates, 1A (71.0%) was the most predominantly abundant and followed by 3A (12.9%), 3B (9.7%), 1B (3.2%) and 5 (3.2%). Also, an antibiotic susceptibility test showed that Yersinia spp. isolates were very susceptible to the antibiotics tested, but they were very strongly resistant to ampicillin, cephalothin and carbenicillin.
This paper deals with the distribution of Yersinia spp. isolated from the feces or the cecal contents of 1,755 pigs, 558 cows, 428 pigs slaughtered, 271 dogs slaughtered and 91 deer during the period of March 1985 to February 1986. Isolated Yersinia spp. were examined for serotype, biotype and antibiotic susceptibility of Y. enterocolitica. The results were as follows; One hundred and fourty-three stains of Yersinia spp. were isolated from 141(4.5%) out of 3,103 animals examined and their isolates were identified as Y. enterocolitica(138 strains), Y. kristensenii (3 strains), Y. intermedia(1 strain) and Y. pseudotuberculosis(1 strain). Yersinia spp. were isolated from 122(7.0%) of 1,755 pigs in piggeries, 15(3.5%) of 428 pigs slaughtered and 4(1.5%) of 271 dogs slaughtered, but no Yersinia spp. were isolated from cows and deer. The isolation rate of Yersinia spp. in pigs ranged from 5.9~8.0% in piggeries, it was higher in summer and autumn and highest in fattening pigs groups(10.4%), especially. One hundred and thirty-eight Y. enterocolitica isolates belonged to serotype 0 : 3(95 strains), 0 : 8(13 strains), 0 : 5(7 strains), 0 : 9(6 strains), 0 : 1, 2(1 strain) and untypable(16 strains), among them strains of serotype 0 : 3 biotype 3B(91 strains) were predominant. Antibiotic susceptibility test of 138 isolates of Yersinia spp. was performed by the agar dilution method, using 8 antibiotics as follows: ampicillin(Am), chloramphenicol, kanamycin, nalidixic acid(Na), rifampicin(Rf), streptomycin, sulfadimethoxine(Su) and tetracycline. All the strains tested were susceptible to Rf and Na, but resistant to Su, and 136 strains(98.6%) were also resistant to Am.
Enteropathogenic Yersina enterocolitica is an important cause of human and animal disease. Phenotypic and genotypic characteristics currently used to identify Yersinia enterocolitica are not necessarily sufficient to differentiate pathogenic from non-pathogenic strains or to analyze the epidemiology of yersiniae at a molecular level. To improve the characterization of Yersinia enterocolitica, A total of 65 isolates of Yersinia enterocolitica were examined with bioserotyping, antibiotic susceptibilities, PFGE, PCR-ribotyping. Genomic DNA pattern generated by PFGE are highly specific for different strains of an organism and have significant value in epidemiologic investigations. The PFGE analysis of Not I-digested chromosomal DNA of Y. enterocolitica were performed with a CHEF Mapper(Bio-Rad, USA). Not I generated 19 restriction endonuclease digestion profiles(REDP). PCR-ribotyping, performed with primers complementry to conserved regions of 16S and 23S rRNA gene, generated 13 ribotypes. PCR-ribotyping can be considered a good technich for subtyping strains of Y.enterocolitica.
It was perfomed to investigate for Yersinia species from 2,841 spring waters in Seoul, from 1994 to 1998. Of them, Yersinia spp. were isolated 86 isolated (3.3%). Of 86, sixty two isolates(71.1%) were Yesinia enterocolitica, followed by Y. aldovae (11 strains), Y. pseudotuberculosis (5 strains), Y. frederiksenii (3 strains), unclassified Yersinia spp. (5 strains). Yersinia spp. were highest isolated from Nowon-Gu (22 samples asd Bukhan Mountain Park isolated(18 samples). We tested 1.186 samples for SPC and colifrom from 1996 to 1998. of these tests, the positive rate of coliform was 23.6%, SPC, 9.1%, and either coliform of SPC positive 27.1%. The positive rates of coliform and SPC were decreased 26.7%, 12.7% in 1996, 25.8%, 6.3% in 1997 and 18.1%, 7.6% in 1998 , rerspectively. Of Y. enterocolitica, 78% was resistant to ampicillin and carbenicillin. In the case of Y. aldovae, only 3 of 11 isolated were resistant to carbenicillin. Y. pseudotuberculosis were resistant to colistin. Also Y. frederiksenii to carbenicillin. There were many spring waters of Y. enterocolitical isolated from Nowon-Gu and Buk-han Mountain Park. So, it needs to clean the environment of those regions.
Brucella abortus cell wall antigen was extracted from Brucella abortus 1119-3 by ultrasonication and followed by sodium dodecyl sulfate(SDS) treatment. In order to confirm whether this preparation is serologically cross reactive with Yersinia enterocolitica 0:9, Western blot analysis with mouse anit-Brucella abortus1119-3 and with mouse anti-Yersinia enterocolitica 0:9 was performed. ELISA results from using those Brucella antigen and Yersinia antigen were assessed whether they had correlation. According to the results of western blot analysis and ELISA, there was no evidence of cross reactivity between the Brucella abortus 1119-3 antigen preparation and Yersinia enterocolitica 0:9. Therefore the SDS treated antigen prepared in this study could be suitably used as specific ELISA antigen without confusion in the interpretation of serological tests for brucellosis in cattle.
Lee, Young-Kee;Choi, Sung-Min;Oh, Soo-Kyung;Lee, Kang-Moon;Ryeom, Kon
Korean Journal of Microbiology
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v.37
no.1
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pp.9-14
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2001
In order to investigate the pathogenicity and development of differential identification technique in the Yersinia species and other entericbacteria, we isolated 5 strains of Y.pseudotuberculosis from spring water sites in Seoul. The biochemical characteristics of isolated strains revealed that indole, VP($25^{\circ}C$, $37^{\circ}C$), $H_2S$, phenylalanine, lysine, arginine, ornithine, gas from glucose, lactose, sucrose, sorbitol, oxidase and motility($37^{\circ}C$) were all negative and urease, glucose, mannitol, salicin, catalase and motility($25^{\circ}C$) were all positive. To detect the causative agent of pseudotuberculosis(Y.pseudotuberculosis), we carried out a study using a PCR with inv primers complementary to the pathogenic region and found that all strains were positive, this revealed that strains from spring waters were pathogenic. Also 16S rDNA for total 5 strains of Y. pseudotuberculosis were amplified and a stretch of approximately 1,450 nucleotides were sequenced and analyzed. The 16S rDNA nucleotide sequence homologies among Yersinia species ranged 97.5% to 100% and between Y.pseudotuberculosis and other entericbacteria they ranged 93.0% to 95.1%. The Phylogenetic tree generated from the sequence analysis of the 16S rDNA gene showed 3 coherent clusters that could be separated into Y.pseudotuberculsis strains, some Yersinia species strains and other entericbacteria strains.
A study on the isolation of Yersinia from the feces of healthy pigs and the biotype and serotype and susceptibility to 16 antimicrobials was carried. Out of 853 pigs, Yersiniae were isolated from 349 pigs(40.9%). Of 349 isolates, 289 isolates(82.8%) were Yersinia enterocolitica and 54(15.5%) were Y kristensenii, 3(0.9%) were Y pesudotuberculosis and the rest 3(0.9%) were Y prederiksenii. Out of 289 isolates of Y enterocolitica, the predominants biotype was 3B comprising of 165 isolates(57.1%) and followed by biotype 2, comprising of 49 isolates(17.0%), bioptype 3A, comprising of 41 isolates(14.2%) and biotype 4 comprising of 23 isolates(8.0%). And the predominant serotype was 0 : 3 comprising of 231 isolates(79.9%) and followed by serotype 0 : 9 comprising of 42 isolates(14.5%) and 0 : 21 comprising of 10 isolates(3.5%). Y. enterocolitica were resistant to cephalothin(99%), novobiocin(99%), erythromycine(83%), ampicillin(83%) and carbenicillin(81%) and susceptible to amikacin(100%), colistin(100%), gentamicin(100%), kanamycin(100%), polymyxin B(100%), tobramycin(100%), chloramphenicol(99%), nalidixic acid(99%), neomycin(99%), streptomycin(99%) and tetracycline(99%). Most strains of biotype 2/serotype 0 : 9 were susceptible to carbenicillin(100%) and ampicillin(61%) but the other biotype/serotypes were resistant to these antibiotic.
Kim, Mi-Hee;Cha, In-Ho;Choi, Chul-Soon;Lee, Sang-Joon
Journal of Life Science
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v.7
no.3
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pp.219-227
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1997
On the purpose pf epidemiological study related to yersiniosis, a total of 720 aprings water collected from 60 points in the Pusan area were examined for the presence of Y. enterocolitica and also the isolation rates, biotype, serotype, biochemical properties and antibiotic susceptibility. Fifty-eight(8.0%) strains of Yersinia species were isolated from 720springs water. Isolation rate for each species was 49 (6.8%)strains of Y. enterocolitica, 3 (0.4%) strains of Y. pseudotuberculosis and 6 (0.8%) strains of y. frederiksenii. Seasonal distribution of isolated Yersinia sp. were shown considerably from November to April, and Y. enterocolitica was especoally isolated in order of January (20.4%), December (16.3%), March(14.3%) and April(8.2%). Isolated T. enterocolitica was divided into 4 kinds of biotype such as 1, 2, 3, and 3B. Distribution of each biotype was shown in order of biotype 1 (51.0%), biotype 2 (30.6%), biotype 3B (16.3%) and biotype 3 (2.1%). The serotypes pf 49 Y. enterocoliticawere typed 7 kinds of werotypes (0 ; 3, 0 : 5, 0 : 9, 0 : 13, 0 : 18 and 0 : 21), and serotype 0 : 8(34.7%). 0 : 9(30.6%) and 0 : 3(10.2%) were encountered most frequently.
Nine strains of Yersinia species isolated from pigs and dogs in Korea, comprising 5 strains of Yersinia enterocolitica, 2 strains of Y kristensenii and each strain of Y pseudotuberculosis and Y intermedia, were examined for the presence of virulence-associated plasmids, calcium dependency and provocation of guinea pig conjuntivitis($Ser{\acute{e}}ny$ test). Three strains of Y enterocolitica isolated from pigs were positive in calcium dependency and harbored one plasmid of about 45 megadalton, but negative in $Ser{\acute{e}}ny$ test.
A multiplex PCR assay targeting the yst and 16S rRNA genes of Yersinia enterocolitica was developed to specifically identify pathogenic Y. enterocolitica from pure culture. Simultaneous amplification of 145 and 416 bp fragments of the yst and 16S rRNA genes of Y. enterocolitica was obtained using the primer pairs in a single reaction. Validation of the assay was performed with the reference Yersinia strains and other members of the family Enterobacteriaceae. The defined primer pairs amplified the targeted sequence from only pathogenic Y. enterocolitica strains, whereas none of the other bacterial species yielded any amplified fragments. Within an assay time of 4 h, this assay offers a very specific, reliable, and inexpensive alternative to the conventional phenotypic assays used in clinical laboratories to identify pathogenic Y. enterocolitica.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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