The production of itaconic acid by Aspergillus terreus NRRL 1960 was studied. The optimal culture conditional such as pH, inoculum size and medium composition were established. Maximum production of itaconic acid, $19.18g/\ell$, was obtained when the cultivation was carried out at $37^{\circ}C$ and pH 2.5 for 7days, with medium containing 5%(w/v) glucose, 0.5%(w/v) NH4Cl, 0.2%(w/v) yeast extract 0.1%(w/v) CaC12, 0.1%(w/v) MgSO4 and 0.2%(w/v) NaCl. A proper medium for inoculum culture was found to be 2%(w/v) malt extract. The batch production of itaconic acid with free cells in a stirredtank reactor was not efficient compared to the shake-flask culture.
Starch is an abundant resource in plant biomass, and it should be hydrolyzed enzymatically into fermentable sugars for ethanol fermentation. A genetic recombinant yeast, Saccharomyces cerevisiae GA-7458, was constructed by integrating the structural gene of both $\alpha$-amylase from Bacillus stearothermophilus and the gene (STA1) encoding glucoamylase from S. diastaticus into the chromosome of S. cerevisiae SH7458. The recombinant yeast showed active enzymatic activities of $\alpha$-amylase and glucoamylase. The productivity of ethanol fermentation from the pH-controlled batch culture (pH 5.5) was 2.6 times greater than that of the pH-uncontrolled batch culture. Moreover, in a fed-batch culture, more ethanol was produced (13.2 g/L), and the production yield was 0.38 with 2% of corn starch. Importantly, the integrated plasmids were fully maintained during ethanol fermentation.
A new synthetic medium was developed for the submerged mycelial cultures of Phellinus linteus. The medium for maximum mycelial growth of Phellinus linteus (3 days incubation, 28$^{\circ}C$, pH 5) consisted of (per 1 L): glucose, 90 g peptone, 10 g soluble starch, 10 g yeast extract, 3 g KH2PO4, 1 g MgSO4.7H2O, 1 g and CaCl2, 0.1 g. The concentrations of glucose, peptone, yeast extract, KH2PO4, MgSO4.7H2O, and CaCl2 were examined in the ranges of 10~90 g/L, 0~10 g/L, 0~15 g/L, 0~2 g/L, 0~1 g/L, and 0~0.5 g/L, respectively. The dry weight of mycelium in 3 days increased to 16.79 mg/mL using the new synthetic medium. The optimum temperature for mycelial growth of Phellinus linteus was 28$^{\circ}C$. The concentrations of KH2OP4, CaCl2, and yeast extract, which gave the maximum mycelial growth of Phellinus linteus, existed in the concentration ranges examined in this study. But, in the cases of other compositions (MgSO4.7H2O, peptone, and glucose), the mycelial growth of Phellinus linteus increased with the concentration in the ranges.
The effects of carbon, nitrogen sources and culture conditions on glucoamylase production from Aspergillus sp. were investigated. Among tested carbon sources, soluble starch was most effective for the production of the enzyme, and the level of concentration for the optimal enzyme production was found to be 5%. For nitrogen sources, yeast extract was best for the enzyme production, with the level of 0.1%. The enzyme was maximally produced by cultivating the organism at medium of initial pH 6.0, and temperature of 28$^{\circ}C$. Wheat bran was most suitable for the enzyme production from the organism in solid state culture.
Uehara Hiroyuki;Choi Du Bok;Park Enoch Y.;Okabe Mitsuyasu
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.5
no.1
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pp.7-12
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2000
The expression of the mouse $\alpha-amylase$ gene in the methylotrophic yeast, P pastoris was investigated. The mouse $\alpha-amylase$ gene was inserted into the multi-cloning site of a Pichi a expression vector, pPIC9, yielding a new expression vector pME624. The plasmid pME624 was digested with SalI or BglII, and was introduced into P. pastoris strain GSl15 by the PEG1000 method. Fifty-three transformants were obtained by the transplacement of pME624 digested with SaiII or BglII into the HIS4locus $(38\;of\;Mut^+\;clone)$ or into the AOX1 locus $(15\;of\;Mut^s\;clone)$. Southern blot was carried out in 11 transformants, which showed that the mouse $\alpha-amylase$ gene was integrated into the Pichia chromosome. When the second screening was performed in shaker culture, transformant G2 showed the highest $\alpha-amylase$ activity, 290 units/ml after 3-day culture, among 53 transformants. When this expression level of the mouse $\alpha-amylase$ gene is compared with that in recombinant Saccharomyces cerevisiae harboring a plasmid encoding the same mouse $\alpha-amylase$ gene, the specific enzyme activity is eight fold higher than that of the recombinant S. cerevisiae.
Effective Microorganisms (EM), a fermented medium developed by Professor Higa at the University of the Ryukyus, is a mixed culture containing dozens of microorganisms which are beneficial to nature including people, animals, plants and many microbial species in environment. EM is known to contain more than 80 kinds of anaerobic or aerobic microbes including photosynthetic bacteria, lactic acid bacteria, yeast, actinomycetes, fungi and so on, with yeast, lactic acid bacteria and photosynthetic bacteria as the main species of EM. Antioxidant effect generated by the concert of complex coexistence and coprosperity among these microbes is considered to be the main source of EM benefits. Currently, EM is earning an increasing attention with applications in agriculture, forestry, animal husbandry, fisheries, environment and medicine among others. At the same time, however, a quantitative interpretation of EM system based on a mixed culture model needs efforts from biochemical engineers for efficient production and further promotion of EM. In this paper, we describe the functions of major microbes in EM and current researches and applications of EM in agriculture, forestry, animal husbandry, fisheries, environment and medicine.
The effects of ginseng on the penetration of glucose into Saccharomyces cerevisiae were studied by determining the amount of glucose in the supernatant of the glucose broth medium in which some dose of water extracts of ginseng or saponin were added and the yeast was cultured for 1 hour. 1. In the 1 hour culture with 0.04%, 0.08%, 0.16%, 0.32% and 0.64% dry ginseng glucose broth medium, the penetration rate of glucose into yeast was increased 4.76%, 7.96%, 10.09%, 9.08% and 7.48% respectively. 2. In the 1 hour culture with $10^{-6}%,\;10^{-5}%,\;10^{-4}%,\;10^{-3}%,\;and\; 10^{-2}%$ of saponin glucose broth medium, the penetration rate of glucose into yeast was increased 3.05%, 6.57%, 5.595, 4.44%. and 2.87% respectively. 3. Since the highest increasing percentage of penetration of ginseng and saponin were 10.19% and 5.89% respectively, the increasing rate of the ginseng was about twice that of the saponin. Therefore it could be concluded that the saponin contained in ginseng and other unkown components of ginseng affect the cell permeability.
PARK Huem Gi;LEE Kyun Woo;LEE Sang-Min;KIM Sung Koo;LEE Jong Ha;LIM Young Soo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.33
no.2
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pp.93-97
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2000
This study was carried out to investigate the effect of rotifer fed the different diets in high density culture on larval flounder Paralichthys olivaceus. Potifer was enriched with enrichment supplements, Marine ${\alpha}\;and\;{\omega}-yeast$ for 6 hours after being cultured with freshwater Chlorella for 18 hours during high density culture before it was fed to larval flounder. And rotifer was culutured with marine Chlorella and freshwater Chlorella for 24 hours during semi-continuous high density culture before it was fed to larval flounder. Culture tanks(21 working volum) set for rotifer culture in a water bath($28{\circ}C$) were continuously supplied with oxygen gas. The content of n-3 HUFA to fatty acids in rotifer(dry weight ${\%}$) enriched with Marine ${\alpha}$ for 6 hours and cultures with marine Chlorella for 24 hours were higher than that in rotifer enriched with ${\omega}-yeast$ for 6 hours or cultured with freshwater Chlorella for 24 hours. The growth and survival rates of larval flounder fed on rotifer enriched with Marine ${\alpha}$ for 6 hours and cultured with marine Chlorella for 24 hours were higher than those of larval flounder fed on rotifer enriched with ${\omega}-yeast$ for 6 hours or cultured with freshwater Chlorella for 24 hours. And the content of n-3 HUFA of larval flounder fed on rotifer enriched with Marine ${\alpha}$ for 6 hours was higher than that of larval flounder fed on other rotifers, The results from this study indicated that rotifer culture with marine Chiorelia would be suitable for the high density culture and effective diet for the growth of larval flounder.
The influence of two process parameters (starter and fermentation period) on sourdough bread qualities was investigated. Bifidobacterium longum/Enterococcus faecium/Lactobacillus acidophilus (a mixed culture) was used as a starter. The five production conditions tested were: Control (sourdough fermentation with yeast); LAB 1(fermentation with mixed culture); LAB 2 (fermentation with yeast and mixed culture, respectively); LAB 3 (fermentation with yeast and mixed culture); and LAB 4 (first fermentation with yeast and mixed culture, respectively, followed by a second fermentation using the combination). The LAB 4 process showed the most favorable fermentation characteristics upon CrumbScan analysis, and the highest specific bread volume (5.14 mL/g). These results were reflected in the sensory evaluation of bread produced by the LAB 4 process; the bread achieved an excellent overall acceptance ranking of 3.7. Upon firmness analysis, the LAB 2, LAB 3, and LAB 4 bread figures were 113.67 g, 111.97 g, and 113.50 g, respectively. Thus, the firmness of LAB 2, LAB 3, and LAB 4 bread was higher than that of the control (93.20 g), although the aroma compounds of bread produced by the five processes did not differ. These results show that LAB 4 bread had improved sourdough properties, compared to control.
The culture conditions needed to maximize the production of laccase from Pholiota highlandensis mycelia were investigated. Among the tested media for laccase production, Coriolus versicolor medium (CVM; 2% dextrose, 0.4% peptone, 0.6% yeast extract, 0.046% KH2PO4, 0.1% K2HPO4, 0.05% MgSO4·7H2O) showed the highest activity for the enzyme. Then, to optimize culture conditions for laccase activity, the influences of various carbon, nitrogen, phosphorus, and inorganic salt sources in CVM were investigated. The optimum culture medium was 2% fructose, 0.4% peptone with 0.6% yeast extract, 0.05% NaH2PO4, and 0.05% MgSO4·7H2O as carbon, nitrogen, phosphorus, and inorganic salt sources, respectively. Several aromatic compounds in the medium enhanced laccase activity to varying degrees. Guaiacol induced maximum laccase production, yielding 114.1 U/ml laccase activity after cultivation for 11 days at 25℃. The optimum pH and temperature for laccase production were 8.0 and 35℃, respectively. Native polyacrylamide-gel electrophoresis (PAGE) followed by laccase-activity staining with 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) as the substrate was performed to identify the presence of laccase under the optimum conditions studied. Zymogram analysis of the supernatant culture showed an enzymatic band with a molecular mass of about 90 kDa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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