• International Journal of Molecular Medicine
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• 제43권3호
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• pp.1478-1486
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• 2019

Temozolomide (TMZ) is an alkylating agent commonly used as a first-line treatment for high-grade glioblastoma. However, TMZ has short half-life and frequently induces tumor resistance, which can limit its therapeutic efficiency. In the present study, it was hypothesized that combined treatment with TMZ and acteoside has synergistic effects in glioblastoma therapy. Using cell viability and wound-healing assays, it was determined that this treatment regimen reduced cell viability and migration to a greater extent than either TMZ or acteoside alone. Following previous reports that TMZ affected autophagy in glioma cells, the present study examined the effects of TMZ + acteoside combination treatment on apoptosis and autophagy. The TMZ + acteoside combination treatment increased the cleavage of caspase-3 and levels of B-cell lymphoma 2 (Bcl-2)-associated X protein and phosphorylated p53, and decreased the level of Bcl-2. The combination treatment increased microtubule-associated protein 1 light chain 3 and apoptosis-related gene expression. It was also determined that TMZ + acteoside induced apoptosis and autophagy through the mitogen-activated protein kinase signaling pathway. These findings suggest that acteoside has beneficial effects on TMZ-based glioblastoma therapy.

• International Journal of Molecular Medicine
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• 제44권5호
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• pp.1641-1652
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• 2019

Conditioned media from various sources comprise numerous growth factors and cytokines and are known to promote the regeneration of damaged tissues. Among these, natural killer cell conditioned medium (NK-CdM) has been shown to stimulate collagen synthesis and the migration of fibroblasts during the wound healing process. With a long-term aim of developing a treatment for skin photoaging, the ability of NK-CdM to prevent ultraviolet-B (UV-B) damage was assessed in neonatal human dermal fibroblasts (NHDFs) and an in vitro reconstructed skin model. The factors present in NK-CdM were profiled using an antibody array analysis. Protein and mRNA levels in UV-B exposed NHDFs treated with NK-CdM were measured by western blotting and quantitative reverse transcription-PCR, respectively. The total antioxidant capacity of NK-CdM was determined to assess its ability to suppress reactive oxygen species. The anti-photoaging effect of NK-CdM was also assessed in a 3D reconstituted human full skin model. NK-CdM induced proliferation of UV-B-treated NHDFs, increased procollagen expression, and decreased matrix metalloproteinase (MMP)-1 expression. NK-CdM also exhibited a potent antioxidant activity as measured by the total antioxidant capacity. NK-CdM inhibited UV-B-induced collagen degradation by inactivating MAPK signaling. NK-CdM also elicited potential anti-wrinkle effects by inhibiting the UV-B-induced increase in MMP-1 expression levels in a 3D reconstituted human full skin model. Taken together, the suppression of both UV-B-induced MMP-1 expression and JNK activation by NK-CdM suggests NK-CdM as a possible candidate anti-skin aging agent.

• International Journal of Oncology
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• 제54권2호
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• pp.753-763
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• 2019

The mutation of isocitrate dehydrogenase (IDH)1 (R132H) and IDH2 (R172K) and the induction of hypoxia in various solid tumors results in alterations in metabolic profiles, including the production of the d- or l-forms of 2-hydroxyglutarate (2HG) from α-ketoglutarate in aerobic metabolism in the tricarboxylic acid (TCA) cycle. However, it is unclear whether the oncometabolite d-2HG increases angiogenesis in endothelial cells. Therefore, in this study, we analyzed the levels of various metabolites, including d-2HG, under hypoxic conditions and in IDH2R172K mutant breast cancer cells by mass spectrometry. We then further evaluated the effects of this metabolite on angiogenesis in breast cancer cells. The results revealed that treatment with d-2HG increased the levels of secreted vascular endothelial growth factor (VEGF) in cancer cells and enhanced endothelial cell proliferation in a concentration-dependent manner. Wound healing and cell migration (examined by Transwell assay) were significantly increased by d-2HG to a level similar to that induced by VEGF. Tube formation was significantly stimulated by d-2HG, and chick chorioallantoic membrane angiogenesis was also enhanced by d-2HG. d-2HG activated VEGF receptor (VEGFR)2 and VEGFR2 downstream signaling, extracellular signal-regulated kinase 1/2, focal adhesion kinase, AKT and matrix metalloproteinase (MMP)2. Taken together, the findings of this study suggested that d-2HG induced angiogenic activity via VEGFR2 signaling and increased MMP2 activity.

• Oncology Letters
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• 제42권5호
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• pp.1904-1914
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• 2019

Apoptosis is regarded as a therapeutic target because it is typically disturbed in human cancer. Silymarin from milk thistle (Silybum marianum) has been reported to exhibit anticancer properties via regulation of apoptosis as well as anti-inflammatory, antioxidant and hepatoprotective effects. In the present study, the effects of silymarin on the inhibition of proliferation and apoptosis were examined in human gastric cancer cells. The viability of AGS human gastric cancer cells was assessed by MTT assay. The migration of AGS cells was investigated by wound healing assay. Silymarin was revealed to significantly decrease viability and migration of AGS cells in a concentration-dependent manner. In addition, the number of apoptotic bodies and the rate of apoptosis were increased in a dose-dependent manner as determined by DAPI staining and Annexin V/propidium iodide double staining. The changes in the expression of silymarin-induced apoptosis proteins were investigated in human gastric cancer cells by western blotting analysis. Silymarin increased the expression of Bax, phosphorylated (p)-JNK and p-p38, and cleaved poly-ADP ribose polymerase, and decreased the levels of Bcl-2 and p-ERK1/2 in a concentration-dependent manner. The in vivo tumor growth inhibitory effect of silymarin was investigated. Silymarin (100 mg/kg) significantly decreased the AGS tumor volume and increased apoptosis, as assessed by the TUNEL assay, confirming its tumor-inhibitory effect. Immunohistochemical staining revealed elevated expression of p-JNK and p-p38 as well as reduced expression of p-ERK1/2 associated with silymarin-treatment. Silymarin was revealed to reduce tumor growth through inhibition of p-ERK and activation of p-p38 and p-JNK in human gastric cancer cells. These results indicated that silymarin has potential for development as a cancer therapeutic due to its growth inhibitory effects and induction of apoptosis in human gastric cancer cells.

• 생명과학회지
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• 제30권10호
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• pp.877-885
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• 2020

표고버섯에는 다양한 효능성분들이 존재하며 특히, β-glucan과 polyphenol 성분들은 항산화, 광노화, 주름개선 등의 피부개선 효능이 알려져 있다. 본 연구에서는 표고버섯 물 추출물에서 polyphenol과 β-glucan 함량을 확인하였으며 이러한 연구결과를 바탕으로 피부노화 억제효능을 조사하였다. Scratch wound healing assay를 통해 표고버섯 물 추출물 처리시 자외선 조사에 의해 손상된 HaCaT cell의 증식 유도 효과를 확인하였다. 또한 세포 내 생성된 ROS를 효과적으로 소거함으로써 세포 내 과도한 산화 스트레스를 줄여 다양한 염증성 사이토카인의 유발을 억제하고 피부노화 인자의 발현을 억제하는 것으로 생각된다. 세포 외 기질과 단백질을 분해하는 MMPs의 발현양상을 확인한 결과 표고버섯 물추출물은 MMP-1과 MMP-9의 발현을 억제하였으며, type I collagen의 생합성을 증가시켰다. 이를 통해 표고버섯 물 추출물은 세포를 활성화시켜 세포의 이동 및 증식을 유도함으로써 피부를 재생 및 collagen 합성을 촉진하고 collagen 분해 인자를 억제시킴으로써 피부의 주름억제 활성에 효능을 가지는 것으로 확인되었다. 따라서 본 연구를 통해 표고버섯 물 추출물은 화장품 분야에서 피부 노화 예방 및 개선소재로서의 개발 가능성을 확인하였다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제34권2호
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• pp.183-190
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• 2019

우르솔릭산은 항암, 항산화, 항염증 작용과 같은 다양한 효과를 지니고 있다. 본 연구에서는 우르솔릭산이 인간 흑색종 암세포인 A375SM과 A375P 세포에 항암효과가 있는지 확인하였다. 두 세포의 생존율은 MTT assay를 통하여 확인하였으며 증식률은 Wound healing assay로 확인하였다. 두 세포의 apoptotic body와 apoptosis 비율의 확인을 위한 DAPI 염색과 유세포 분석을 진행하였다. 그리고 웨스턴 블로팅을 통하여 흑색종 세포의 우르솔릭산의 농도에 따른 apoptosis 단백질의 유도를 조사하였다. 우르솔릭산의 처리 농도에 따라 흑색종 세포의 생존율 감소와 증식률 감소를 확인하였다. DAPI 염색을 통하여 우르솔릭산의 농도가 증가함에 따라 흑색종 세포의 염색체 응축이 농도 의존적으로 증가하였고, 유세포 분석을 통하여 우르솔릭산에 대하여 농도 의존적으로 흑색종 세포의 apoptosis 비율의 증가를 확인하였다. 그리고 웨스턴 블로팅을 통해 흑색종 세포 A375SM과 A375P의 우르솔릭산 $12{\mu}M$ 농도에서 cleaved-PARP와 Bax의 증가와 Bcl-2의 감소를 확인하였다. 본 연구는 우르솔릭산의 농도를 0 에서 $20{\mu}M$ 수준의 저농도에서 진행하였으며, 물질 처리 후 24 시간 뒤 결과를 가지고 분석하였다. 본 연구의 결과로 보아 우르솔릭산은 흑색종 세포 A375SM과 A375P에서 apoptosis 관련 단백질들의 조절을 통해 항암효과를 일으키는 것으로 사료된다.

• KSBB Journal
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• 제9권1호
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• pp.26-34
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• 1994

챙파홍섬무우의 모상근 배양에서 몇 가지 외재 호르몬에 대한 반응을 조사하였던 바, auxins중의 2, 4-D는 안토시아닌의 생성을 촉진하였으며 동시에 뿌리의 탈분화를 유도하였다. Cytokinins은 이식 초기의 비교적 소량의 색소능 촉진효과를 나타내었으며, ABA는 색소의 발현억제 효과를 보이고 GA3 는 색소 생성에 별다른 영향을 마치지 않았다. 1mg/l의 농도에서 2, 4-D 이외의 호르몬은 모상근의 탈분화를 유도하지 않았으며, 모상근의 생장을 대조구 이하로 억제하였다. 2, 4-D와 kinetin를 처리하여 시간경과에 따른 안토시아닌 함량의 변화와 PAL, CHS의 활성변화를 조사하였다. 색소능의 변화를 볼 때, 대조구는 6일 에서 kinetin은 6-9일의 이식초기에 일시적인 색소의 증가를 보였으며, 2, 4-D 처리구는 9엘부터 증가하여 18일경에 peak를 보이며 가장 높은 색소 생성을 나타내었다. PAL의 활성 변화에 있어서는, 대조구에 비하여 kinetin, 2, 4-D처리구 둘 다 활성의 증가를 보이고 kinetin은 6 일에 서 2, 4-D는 9 일에 셔 각각 활성의 peak를 나다내였으며, 특히 2, 4$\longrightarrow$D 의 경우는 18일에서 또 한번의 약한 활성 증가를 보였다. CHS는, 대조구에서는 이식 후 3일에 활성의 일시적인 증가가 있었을 뿐 이후 계속 낮은 상태를 유지하였고 Kinetin 처리구는 6일에서 활성이 증가하여 9일에 최대활성을 보이고 이후 감소하게 된다. 2,4-D 처리구는 9일부터 활성이 증가하여 18일경 최대활성을 나타내고 이후 비교적 높은 활성수준에서 유지되였다. 이외에 이식 후 hormone free 배지 에서 2주간의 전배양 후 kinetin의 처리는 색소축적에 별다른 영향을 미치지 않았다. 이러한 결과에 따라, 2, 4-D, kinetin에 의한 안토시아닌 생성의 촉진효과는 PAL, CHS의 활성 증 가와 유의적인 연관을 나타내였으며, 특히 시간경과 에 따른 CHS의 활성 변화와 색소의 축적은 비례하여 색소 생성에 있어 CHS의 rate-limiting 역할을 제시하였다. Kinetin를 포함하는 cytokinins은 뿌리의 상처에 의한 “wound-response"에 따른 배양초기의 색소 발현을 촉진하는 작용을 하는 것으로 사료되었다. 2, 4-D와 kinetin에 의해 발현되는 PAL, CHS의 활성증감의 정도는 물론 peak를 보이는 경과시간에서의 차이는 각기 다른 조절기작을 갖는 Isozyme의 존재에 의한 것으로 추정되었다.정되었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제24권6호
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• pp.1026-1038
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• 1995

Aloe식물에서 만든 전통적 aloe는 현대 임상 의약분 야에서 이전의 인기를 거의 잃고 있지만 aloe gel은 그 간 그의 효능 즉 여려가지 치료작용과 대사에 대한 유익한 tonic 효과를 밝히려는 수많은 연구자들에 의해서 꾸준히 gel의 치료 효능이 주장되어 온 반면에 상당수의 연구자들에 의한 상반된 연구 결과로 인해 aloe gel 효능에 대한 논쟁은 계속되고 있다. 그럼에도 불구하고 aloe gel을 원료로한 외용 또는 내용의 치료제와 화장품 그리고 특히 건강 식품들(general tonics)이 대중적 인기를 끌고 있다. 따라서 현재는 aloe gel 산업이 비교적 경제성을 크게 유지하는데 여기에는 일부 promotional works나 대중 매체의 영향도 일조 했으리라 본다(21). Gel의 유익한 생리작용을 내는 원인 물질에 관한 그간 많은 연구 보고에서 gel의 미량 성분들 중 salicylic acid의 진통 소염착용, Mg ion의 마취작용, Mg-lactate의 항 histamine작용, Aloctin A의 세포 성장 촉진에 의한 상처 치료작용, carboxypeptidase와 bradykinase에 의한 통증 감소와 소염작용이 여러 연구자들에 의해 제안되었으나 이들 생리작용이 현대 임상 약리학에서 거의 입증이 안되었고 지지를 지 못했다. Gel내 미량 anthraquinone 배당체(aloin)가 false substrate inhibitor작용에 기인한 항 prostanoid (항PG와 항TX) 효과에 의한 소염, 화상, 동상 상처 치료 작용을 낸다는 가설이 한 때 상당 기간 많은 연구자들에 의해 주장되었으나 이 제안도 증명되지 못했고 이제는 다른 연구자들의 다른 주장들에 의해 가려지고 있다. 또 gel의 항미생물, 항당뇨, 간해독 작용 등이 gel내 미량 anthraquinone 화합물의 작용에 기인할 것으로 제안되었다. 1980년 중반 부터 최근(1993년)에 이르기 까지 많은 연구자들에 의해 새로이 주장 되고 있는 gel의 생리작용은 주성분 다당류인 acetylglu-comannan과 acetylmannan 및 glycoprotein에 의한 면역 증진 내지 면역 조절작용에 의한 감염 상처 치료, 소염, 항미생물, 항암 작용이 계속 제안되고 있다. 저자는 acetylpolysacchride의 acetyl기가 in vivo에서 cyclooxy-genase를 억제하여 항 prostanoide 효과를 낼 것으로 가정해 본다. 이제는 acetylpolysacchride에 대한 여러 주장들이 임상적으로 증명되어 gel의 효력에 대한 논쟁에서 결론이 날 것으로 기대해 본다. Aloe gel의 다당류 acemannan의 실험 동물(개)에 대한 독성 실험 결과 복강내 주입에 의한 최저 부작용 유발량은 5.0mg/kg이었으나 aloe gel은 일반적으로 무독한 것으로 알려져 있다. 그러나 aloe gel의 임상 적용에서 가끔 과민 반응에 의한 부작용 사례 보고를 다수 볼 수 있고 실험적 연구에서도 입증되어 있으므로 aloe gel을 건강 식품으로 섭취하는 경우는 국소 적용시 유의해야 할 점이라 생각된다. 결국 aloe gel의 오랜 연구역사를 볼 때 어떤 생리작용의 기전에 의존한던 간에 aloe gel이 유익한 여러 효과를 낸다는 사실을 간단히 부정하기는 어려울 것 같다.울 것 같다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제31권1호
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• pp.1-23
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• 2001

Chitosan is biodegradable natural polymer that has been demonstrated its ability to improve wound healing, and calcium metaphosphate(CMP) is a unique class of phosphate minerals having a polymeric structure. In this study, chitosan/CMP and platelet derived growth factor(PDGF-BB) loaded chitosan/CMP sponges were developed, and the effect of the sponges on bone regeneration and their possibility as scaffolds for bone formation by three-dimensional osteoblast culture were examined. PDGF-BB loaded chitosan/CMP sponges were prepared by freeze-drying of a mixture of chitosan solution and CMP powder, and soaking in a PDGF-BB solution. Fabricated sponge retained its 3-dimensional porous structure with $100-200\;{\mu}m$ pores. The release kinetics of PDGF-BB loaded onto the sponge were measured in vitro with $^{125}I-labeled$ PDGF-BB. In order to examine their possibility as scaffolds for bone formation, fetal rat calvarial osteoblastic cells were isolated, cultured, and seeded into the sponges. The cell-sponge constructs were cultured for 28 days. Cell proliferation, alkaline phosphatase activity were measured at 1, 7, 14 and 28 days, and histologic examination was performed. In order to examine the effect on the healing of bone defect, the sponges were implanted into rat calvarial defects. Rats were sacrificed 2 and 4 weeks after implantation and histologic and histomorphometrical examination were performed. An effective therapeutic concentration of PDGF-BB following a high initial burst release was maintained throughout the examination period. PDGF-BB loaded chitosan/CMP sponges supported the proliferation of seeded osteoblastic cells as well as their differentiation as indicated by high alkaline phosphatase activities. Histologic findings indicated that seeded osteoblastic cells well attached to sponge matrices and proliferated in a multi-layer fashion. In the experiments of implantation in rat calvarial defects, histologic and histomorphometric examination revealed that chitosan/CMP sponge promoted osseous healing as compared to controls. PDGF-BB loaded chitosan/CMP sponge further echanced bone regeneration. These results suggested that PDGF-BB loaded chitosan/CMP sponge was a feasable scaffolding material to grow osteoblast in a three-dimentional structure for transplantation into a site for bone regeneration.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제27권3호
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• pp.603-619
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• 1997

레이저를 이용한 연조직 수술은 출혈이 없어 시야를 좋게 하고 시술시간이 단축되며, 술후 종창이 최소화 되고, 통증이 감소화 최소화된 반흔 형성, 그리고 레이저가 조사되는 일부 부위의 멸균효과등이 장점이 있어 최근에 의학분야 및 치의학분야에서 많이 사용되는 추세에 있다. 이에 본 연구에서는 $CO_2$레이저를 이용한 백서의 치은절제술시의 치유과정과 레이저 출력을 달리 하였을때의 치유과정을 관찰하기 위해, 백서의 상악전치의 치은조직에서 치은절제술 효과를 얻을 수 있는 최소 출력인 4watts를 이용한 부위를 대조군으로, 6watts를 이용한 부위를 실험군으로 하여, 술후 2일, 3일, 1주, 3주후에 각각 실험동물을 희생시켜 치유결과를 조직학적으로 비교 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 대조군과 실험군 모두에서 2일째에서만 작은 크기의 혈병이 관찰되었고, 그 이후에서는 관찰되지 않았다. 2. 염증세포 침윤지역 크기는 대조군과 실험군 모두에게 2일째 가장 컸으며, 그 크기는 시간이 경과될수록 줄어들어 2주째는 거의 소실되었으며, 실험군의 경우 대조군에 비해 2,3째까지 크기가 더 컸으나, 1주째부터는 크기의 차이가 관찰되지 않았다. 3. 육아조직은 대조군, 실험군 모두 시간의 경과에 따라 점점 성숙되어, 2주째부터는 거의 정상 치은 결합조직으로 대체되는 소견을 보였고, 3주째에서는 완전한 치유양상을 보였다. 실험군의 경우 대조군보다 3일째까지는 그 크기가 더 컸으나 1주째부터는 크기의 차이가 없다. 4. 대조군과 실험군 모두에게 치은의 상피화하는 2일째에서 시작되는 소견을 보였고, 1주부터 상피돌기와 부분적인 접합상피의 재생이 관찰되었으며, 2주째부터는 구강열구상피의 각화가 시작되어 3주째에는 각화의 완성이 관찰되었다.