We describe the construction and immunobiological properties of a novel whooping cough vaccine candidate, in which the aroQ gene, encoding 3-dehydroquinase, was deleted by insertional inactivation using the kanamycin resistance gene cassette and allelic exchange using a Bordetella suicide vector. The aroQ B. pertussis mutant required supplementation of media to grow but failed to grow on an unsupplemented medium. The aroQ B. pertussis mutant was undetectable in the trachea and lungs of mice at days 6 and 12 post-infection, respectively. Antigen-specific antibody isotypes IgG1 and IgG2a, were produced, and cell-mediated immunity [CMI], using interleukin-2 and interferon-gamma as indirect indicators, was induced in mice vaccinated with the aroQ B. pertussis vaccine candidate, which were substantially enhanced upon second exposure to virulent B. pertussis. Interleukin-12 was also produced in the aroQ B. pertussis-vaccinated mice. On the other hand, neither IgG2a nor CMI-indicator cytokines were produced in DTaP-vaccinated mice, although the CMI-indicator cytokines became detectable post-challenge with virulent B. pertussis. Intranasal immunization with one dose of the aroQ B. pertussis mutant protected vaccinated mice against an intranasal challenge infection, with no pathogen being detected in the lungs of immunized mice by day 7 post-challenge. B. pertussis aroQ thus constitutes a safe, non-reverting, metabolite-deficient vaccine candidate that induces both humoral and cell-mediated immune responses with potential for use as a single-dose vaccine in adolescents and adults, in the first instance, with a view to disrupting the transmission cycle of whooping cough to infants and the community.
This study was designed to identify the effects of Reynoutria Japonica on antibacterial activity aganist Bordetella pertussis ATCC 9797 which is cause of whooping cough. The ethanol- and water-extracts of more than 80 oriental herbal medicine were Investigated by Kirby -Bauer method to determine their inhibitory effects on growth of B. pertussis ATCC 9797 in vitro. For that Reynoutria Japonica was selected. The ethanol-soluble extract of Reynoutria Japonica showed relatively high antivacterial activity against B. pertussis ATCC 9797. However, the water-soluble extract of Reynoutria Japonica showed no antibacterial activity. The ethanolic extract was further fractionated with organic solvents such as hexane, chloroform, and ethyl acetate, in that order. Among the fraction tested, the chloroform fraction showed the highest antibacterial activity when the ethanol-soluble extract of Reynoutria Japonica minial inhibitory concentration(MIC) was $25{\mu}g/m{\ell}l$. Results support a role far Reynoutria Japonica in inhibiting the cell growth of B. pertussis ATCC 9797, but further experimentation is required.
Jang, Joon Weon;Kang, Jin Han;Choi, Jae Won;Lee, Hak Sung;Ma, Sang Hyuk
Pediatric Infection and Vaccine
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v.24
no.1
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pp.37-43
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2017
Purpose: Pertussis can be prevented with a vaccine. Despite this, there have been an increasing number of cases worldwide, and also in Korea. This study aimed to investigate the epidemiology and clinical characteristics of the recent outbreak in the Changwon area. Methods: Patients who visited Changwon Fatima Hospital from July 2015 to March 2016 with respiratory symptoms, including spasmodic cough, cough induced vomiting, inspiratory 'intake' sound (whooping), and a night-time cough for >1 week were included in this study. Respiratory specimens were collected from patients and a polymerase chain reaction (PCR) and detected anti-pertussis immunoglobulin G enzyme-linked immunosorbent assay kit test were performed. Patients with underlying diseases, or those who had received a DTaP or Tdap vaccination in recent 1 year were excluded. Results: Pertussis was diagnosed in 37 of 50 patients, two patients were positive according to the PCR, and 37 patients were positive according to serologic tests. The age distribution of the patients was 1 month to 15 years. After administering antibiotics, all patients recovered without complications. Conclusions: A pertussis outbreak occurred in Changwon in 2015 and 2016. This data can provide the basis for further study on the epidemiology of pertussis in Korea.
Since the advent of potent chemotherapy, the incidence and severity of bronchiectasis have been on the decrease. Up to date, however, the medical treatment of bronchiectasis has not given us much satisfaction. Our purpose here is to show our experiences with pulmonary resections of bronchiectasis to clarify its surgical results and define its surgical indications. Sixty-five patients with bronchiectasis, treated surgically from January 1973 to December, 1982 at the Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Kyungpook National University Hospital, were given clinical assessment. Of the 65 patients involved in the series, 49 were male and 16, female. The patients ranged from 8 to 51 in ages, with 59 cases [91%] between 10 and 39 years old. The prominent clinical features were as follows: cough [88%], sputum production [78%], recurrent upper respiratory infection [51%], and frequent hemoptysis [32%]. The past history of the patients included measles 29%, whooping cough 14%, pulmonary tuberculosis 12%, and pneumonia or bronchitis 12%. The cylindrical type of the bronchiectasis was found to be most common, accounting for 43% of the cases. The operations were performed on the left lung in 52 cases and the right lung in 13 cases. The most common operative procedure was the left lower lobectomy and lingular segmentectomy, which showed 34%. The second most frequent procedure was the simple left lower lobectomy which was 22%. Incomplete resections of the multisegmental bronchiectasis were carried out in 12 cases, of which 7 cases were satisfactory Four patients underwent bilateral pulmonary resections for the severe multisegmental bilateral bronchiectases, during the first and second operations. Improvement in pulmonary symptoms was generally obtained in all four cases. The follow-up ranged from 1 week to 7 tears, with an average of 18.8 months. The overall results revealed that 87% of these and excellent or good conditions, but 13% had persistent symptoms. There was one operative death, which is a 1.5% mortality.
Filamentous hemagglutinin (FHA) is considered as an essential immunogenic component for incorporation into acellular vaccines against Bordetella pertussis, the causative agent of whooping cough. Classically, antipertussis vaccination has employed an intramuscular route. An alternative approach to stimulate mucosal and systemic immune responses is oral immunization with recombinant live vaccine carrier strains of Salmonella typhimurium. An attenuated live Salmonella vaccine sgrain($\Delta$cya $\Delta$crp) expressing recombinant FHA(rFHA) was developed. Stable expressionof rFHA was achieved by the use of balanced-lethal vector-host system. which employs an asd deletion in the host chromosome to impose in obligate requirement for diaminopimelic acid. The chromosomal $\Delta$asd mutation was complemented by a plasmid vector possessing the asd$^{+}$ gene. A 3 kb DNA fragment encoding immuno dominant regionof FHA was subcloned in-frame downstream to the ATG translation initiation codon in the multicopy Asd$^{+}$ pYA3341 vector to create pYA3457. Salmonella vaccine harboring pYA3457 expressed approximately 105kDa rFHA protein. The 100% maintenance of [YA3457 in vaccine strain was confirmed by stability examinations. Additionally, a recombinant plasmid pYA3458 was constructed to overpress His(8X)-tagged rFHA in Essherichia coli. His-tagged rFHA was purified from the E. coli strain harboring pYA3458 using Ni$^{2+}$-NTA affinity purification system.>$^{2+}$-NTA affinity purification system.
Kim, Soon Ju;Kim, Sang-Eun;Kim, Jong-Hyun;Lee, Jung-Hyun;Oh, Jin Hee;Koh, Dae Kyun;Sung, Hwa Young;Yu, Jae-Yon
Pediatric Infection and Vaccine
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v.16
no.2
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pp.167-174
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2009
Purpose : Pertussis was very common in the past, but reported cases have dramatically decreased. The improvement of vaccination programs and unreadiness of laboratory confirmation seems to have developed this situation. This study investigated the frequency of pertussis among infants with a paroxysmal cough and compared the clinical characteristics between infants with and without pertussis. Methods : Between June and November 2006, 27 infants admitted to the hospital that were 15-90 days old with a history of a cough for more than seven days were enrolled. The cough was described as: paroxysmal, whooping, and post-tussive vomiting. PCR and cultures for Bordetella pertussis with nasopharyngeal aspirates were obtained. The patients were divided into two groups: (1) the pertussis group that had positive results by PCR or culture; (2) the control group that had negative results by PCR and culture. Clinical and laboratory characteristics were compared between the two groups. Results : Among the 27 cases, five (18.5%) were finally diagnosed with pertussis. Only one out of the five pertussis cases was initially diagnosed with a pertussis-like syndrome on admission. Compared to the group without pertussis, the pertussis group had a significantly higher frequency of: no fever (P =0.043), a paroxysmal cough (P =0.040), cyanosis (P =0.001), non-immunized status for DTaP (P =0.047), normal auscultation (P =0.028), normal chest X-ray findings (P =0.027), high absolute lymphocyte count (P =0.039), and low CRP (P =0.046). The patients with the diagnosis of pertussis had a significantly longer duration of coughing (27.2${\pm}$10.6 vs. 12.6${\pm}$5.6 days, P =0.039). Conclusion : Pertussis should be suspected in any infant with typical symptoms of pertussis in addition to: a persistent cough without fever, accompanied by paroxysms or cyanosis prior to the age of DTaP immunization. Active laboratory confirmation should be carried out to confirm more cases with pertussis.
Typha orientalis' stem (TOS) is traditionally used as an herbal medicine for difficulty in urination, galactophoritis purulenta, whooping cough, and allergic dermatitis. However, its effect in experimental models remains unknown. Here, we report the effect of TOS on the phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187-induced inflammatory cytokine production and extracellular signal-regulated kinase (ERK) activation in the human mast cell line, HMC-1. TOS inhibited PMA plus A23187-induced cytokines such as tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$) and interleukin (IL)-6. Maximal inhibition rate of TNF-$\alpha$ and IL-6 production by TOS (1 mg/ml) was about 44.02%, and 45.20%, respectively (P < 0.05). In addition, TOS inhibited the expression of TNF-$\alpha$ and IL-6 mRNA under the same condition. Moreover, TOS partially blocked PMA plus A23187-induced ERK phosphorylation. These results suggested TOS could inhibit the cytokine production through blocking of ERK activity.
Trifolium pratense leaves (red clover) has been used in Oriental and European folk medicine for the treatment of whooping cough, asthma, and eczema, and is now being used to treat and alleviate the symptoms, such as hot flushes, cardiovascular health effects that occur in postmenopausal women. However, relatively little scientific data is available on the physiological activity of this plant. Therefore, in this study, we investigated the anti-cancer activity of T. pratense leaves using methanol extract of T. pratense leaves (MeTP) on human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. MeTP inhibited the viability of FaDu cells by inducing apoptosis through the cleavage of procaspase-3, -7, and -9 and poly (adenosine diphosphate ribose-ribose) polymerase (PARP), downregulation of Bcl-2, and upregulation of Bax, as determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, Live & dead assay, 4'6-diamidino-2-phenylindole stain, fluorescence-activated cell sorting analysis, and Western blot analysis. In addition, colony formation was slightly inhibited when FaDu cells were treated with a non-cytotoxic concentration (0.125 mg/mL) of MeTP and almost completely inhibited when cells were treated with 0.25 mg/mL MeTP. Collectively, these results indicate that MeTP induced cell apoptosis via caspase- and mitochondrial-dependent apoptotic pathways, and inhibited colony formation of cancer cells in FaDu human hypopharyngeal squamous carcinoma cells. These findings suggest MeTP should be considered for clinical development as a chemotherapeutic option in oral cancer.
Background: Limited data on the incidence and clinical characteristics of adult pertussis infections are available in Korea. Methods: Thirty-one hospitals and the Korean Centers for Disease Control and Prevention collaborated to investigate the incidence and clinical characteristics of pertussis infections among adults with a bothersome cough in non-outbreak, ordinary outpatient settings. Nasopharyngeal aspirates or nasopharyngeal swabs were collected for polymerase chain reaction (PCR) and culture tests. Results: The study enrolled 934 patients between September 2009 and April 2011. Five patients were diagnosed as confirmed cases, satisfying both clinical and laboratory criteria (five positive PCR and one concurrent positive culture). Among 607 patients with cough duration of at least 2 weeks, 504 satisfied the clinical criteria of the US Centers for Disease Control and Prevention (i.e., probable case). The clinical pertussis cases (i.e., both probable and confirmed cases) had a wide age distribution ($45.7{\pm}15.5$ years) and cough duration (median, 30 days; interquartile range, 18.0~50.0 days). In addition, sputum, rhinorrhea, and myalgia were less common and dyspnea was more common in the clinical cases, compared to the others (p=0.037, p=0.006, p=0.005, and p=0.030, respectively). Conclusion: The positive rate of pertussis infection may be low in non-outbreak, ordinary clinical settings if a PCR-based method is used. However, further prospective, well-designed, multicenter studies are needed.
Oh, You Na;Jin, Soojung;Park, Hyun-jin;Kim, Byung Woo;Kwon, Hyun Ju
Journal of Life Science
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v.25
no.5
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pp.515-522
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2015
Treculia africana Decne, a breadfruit species, is native to many parts of West and Tropical Africa. The breadfruit belongs to the family Moraceae and is one of the four members of the genera Treculia. The crude extract of T. africana has been used in folk medicine as an anti-inflammatory agent for various ailments, such as whooping cough. In this study, we evaluated the anti-oxidative and anti-cancer activities of the methanol extract of T. africana Decne (META) and the molecular mechanisms of its anti-cancer effects in human colon carcinoma HT29 cells. The META exhibited anti-oxidative activity through a DPPH radical scavenging capacity and inhibited cell growth in a dose-dependent manner in HT29 cells. META treatment induced apoptosis of HT29 cells, showing an increase in the percentage of both SubG1 cells and Annexin V-positive cells and the formation of apoptotic bodies in a dose-dependent manner. META-mediated apoptosis was associated with the up-regulation of the death receptor FAS and Bax and a decrease in the Bcl-2 expression. META-treated HT29 cells also showed the release of cytochrome c from the mitochondria into the cytosol, activation of caspase-3, caspase-8, and caspase-9, and proteolytic cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP). These findings suggest META may exert an anti-cancer effect in HT29 cells by inducing apoptosis through both intrinsic and extrinsic pathways.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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