A Silkie Bantam embryo fibroblast line (named SBF59 line) was successfully established by using direct explant culture and cryopreservation techniques. Cell morphology, viability, dynamic growth and contamination were tested and the karyotype and levels of isoenzymes of lactic dehydrogenase and malic dehydrogenase were analyzed. Four kinds of fluorescent protein extrogenes, including $pEGFP-N_3$, $pECFP-N_1$, $pEYFP-N_1$ and $pDsRed1-N_1$ were transfected into the cells. The results showed that the cells were healthy and possessed a fibrous structure without a change in morphology. The average viability of the cells was 96% before freezing and 90.5% after thawing. The growth curve appeared as typical "S" shape and the cell growth passed through a detention phase, a logarithmic phase and a platform phase; the estimated population doubling time (PDT) was 38.5 h; assays for the presence of bacteria, fungi, viruses and mycoplasmas were negative; the cell line showed no cross contamination when assessed by isoenzyme analysis; the chromosome number was 2n = 78 on more than 88% of occasions; four kinds of fluorescent protein extro-genes appeared to be expressed effectively with a high transfection efficiency between 18.3% and 42.3%. The cell line met the required quality control standard. It not only preserves the genetic resources of the important Silkie Bantam at the cellular level but also provides valuable materials for genomic, post-genomic, somatic cell cloning research and other applications.
In order to distinguish Korean cattle (Hanwoo) beef from the imported beef from Australia in Korean markets, DNA markers based on PCR-RFLP from mitochondrial genes and SRY gene were applied. A total of 2,826 beef samples comprising 1,495 Hanwoo and 1,331 foreign cattle breeds were obtained in Korea. An 801 bp fragment of the SRY gene on the bovine Y chromosome, a 343 bp fragment of ND4 gene and a 528 bp fragment of ND5 gene in the bovine mtDNA were amplified by PCR and digested with three restriction enzymes, MseI, HpyCH4III and Tsp509I, respectively. The results showed that Bos taurus (T) type was the majority in Hanwoo by combining three markers (99.5%). However, 78.2% of Bos indicus (I) type was observed in the imported beef samples. These results indicated that three markers used in this study will be used as valuable markers for discriminating imported beef against Hanwoo.
Telomeres locate at the end of chromosomes and consist of a tandem repeat sequence of $(TIAGGG)^{n}$ and associated proteins. Telomerase is a ribonucleoprotein which act as a template for the synthesis of telomeric DNA. Telomeres are essential for chromosome stability and are related with cell senescence, apoptosis and cancer. This study was carried out to analyze the amount of telomeres and telomerase activity of chicken cells during embryonic and developmental stages. The whole embryos and prenatal tissues such as brain, heart, liver, kidney and testis at different developmental stages were obtained from Korean Native Chicken. The amount of telomeres on embryonic cells was analyzed by quantitative fluorescence in situ hybridization (Q-FISH) techniques using the chicken telomeric DNA probe. Telomerase activity was measured by telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay. Results indicated that the amounts of telomeric DNA on the most embryonic cells were gradually decreased during ontogenesis. Furthermore, the quantity of telomeres was quite different among embryonic tissues according to developmental origin. The relative amount of telomeres has more in regenerative cells such as embryonic disc and testicular cells than in non-regenerative cells such as liver, brain, heart and kidney cells. Telomerase activity was also highly detectable in most chicken cells at early embryonic stages. After 9 days of incubation, however, the telomerase activitie W
Journal of The Korean Society of Inherited Metabolic disease
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v.14
no.1
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pp.60-65
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2014
Smith-Lemli-Opitz syndrome (SLOS) is an autosomal recessive disease caused by a defect in cholesterol biosynthesis. This mutation encodes 7-dehydrocholesterol reductase (DHCR7), which is located on chromosome 11q13. It is characterized by typical facial appearances, microcephaly, small up-turned nose, cleft palate, syndactyly, and is correlated with cardiac, gastrointestinal and genital malformations. There may also be mental retardation, behavioral problems and growth retardation. It causes a broad spectrum of effects, ranging from a mild disorder of learning and behavior to a lethal malformation. There are four reports of Smith-Lemli-Opitz syndrome in Korean children. Here, we describe a two months old female with microcephaly, toe syndactyly and a cleft soft palate who was diagnosed as SLOS with c. 1054 C>T (p.R352W) and c.907G>A (p. G303R) mutations.
Despite the direct placement of sperm within the oocyte, fertilization failure still occurs after ICSI. This study was accomplished to analyze the chromosomes in oocytes failed to fertilize after ICSI comparing to oocytes failed to fertilize by conventional in vitro insemination. Seventy-four ICSI cycles and 122 conventional IVF cycles were included in analysis. Included unfertilized oocytes were from 74 patients (mean age = $32.7{\pm}3.7$). Ninety-three oocytes were informative and 83 oocytes were legible for cytogenetic analysis. Sixty-two oocytes out of 83 (74.7%) had normal chroruosomes, while 15 (18.1%) were hypoploidy, 6 (7.2%) were hyperploidy. Eighteen oocytes out of 93 (17.6%) were premature chromosome condensation (PCC). Two hundred ninety-four unfertilized oocytes after conventional insemination were subjected to chromosomal analysis and 180 oocytes were legible for analysis. One hundred thirty-two oocytes out of 180 (73.3%) were normal, while 22 (12.2%) were hypoploidy, 20 (11.1%) were hyperploidy, and 6 (3.3%) were polyploidy. Twenty-two oocytes (12.2%) were PCC. There was no difference in chromosomes between oocytes that failed to fertilize after ICSI or conventional insemination. High PCC rates in fertilization-failed oocytes suggest that oocytes maturity is another important factor in achieving successful fertilization.
Park Ji-Yoon;Hwang Chang-Il;Park Woong-Yang;Kim Jin-Kyu;Chai Young Gyu
Korean Journal of Environmental Biology
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v.23
no.1
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pp.21-26
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2005
Cell response to genotoxic agents is complex and involves the participation of different classes of genes including cell cycle control, DNA repair and apoptosis. In this report, we presented a approach to characterize the cellular functions associated with the altered transcript profiles of MCF-7 exposed to low-dose in vitro gamma-irradiation. We used the method of human 2.4 k cDNA microarrays containing apoptosis, cell cycle, chromatin, repair, stress and chromosome genes to analyze the differential gene expression characterization that were displayed by radiation-exposed cell, human breast carcinoma MCF-7 cell line, such as 4 Gy 4 hr, 8 Gy 4 hr, and 8 Gy 12 hr. Among these genes, 66 were up-regulated and 49 were down-regulated. Specific genes were concomitantly induced in the results. Cyclin dependent kinase 4 (Cdk4) is induced for starting the cell cycle. This regulation is required for a DNA damageinduced G1 arrest. In addition to, an apoptotic pathways gene Bcl-w was concomitantly induced. Mismatch repair protein homologue-l (hMLH1), a necessary component of DNA mismatch protein repair (MMR), in G2-M cell cycle checkpoint arrest. The present study provides new information on the molecular mechanism underlying the cell response to genotoxic stress, with relevance to basic and clinical research.
This study was conducted to develop new markers at the region that was related to QTL affecting intramuscular fat and backfat thickness on chromosome 6q28 - 6q32 in pigs. Dozens of repeated sequences were founded using shotgun sequencing of several BAC clones corresponding to that region, of which five new microstellite markers that identified polymorphism were discovered. The mean number of alleles at each locus observed 2.13(KP0290F2), 4.63(KP0248Cll), 7.38(KP1231C91), 2.75(KPI23IC92) and 6.2S(KP1231C93) in 8 breeds(Landrace, Korean native pig, Duroc, Yorkshire, Berkshire, Wuzhishan pig, Xiang pig, Min pig). The average estimated heterozygosity values at each locus varied from 0.2100(KP0290F2) to 0.8304(KPI23IC91) in all populations. In other hand, the average allele of all loci WlL'I within range of 0.4517(Berkshire) and 0.6957 (Yorkshire). Of these markers, KP0248C11, KP1231C91 and KP1231C93 were identified to have optimal number of alleles, high heterozygosity values and low standard deviation values. Especially, KPI23IC91 and KPI231C93 might be considered as a useful marker for genetic mapping and diversity study.
Purpose : The purpose of this study was to evaluate the clinical utility of rapid detection of Down syndrome and Edward syndrome by Interphase Fluorescence in Situ Hybridization (FISH) analysis. Methods : Aretrospective study in 309 cases of amniotic fluid samples, analysed by interphase FISH with DNA probes specific to chromosome 18 and 21, was performed. All FISH results w ere compared with conventional cytogenetic karyotypings. Results : The results were considered as informative and they were obtained within 48 hrs. A case of Down syndrome and a case of Edward syndrome were diagnosed by FISH and confirmed by subsequent cytogenetic analysis. In 12 cases with normal FISH results, the cytogenetic analysis showed a case of partial trisomy 22, three cases of sex chromosomal aneuploidy, two cases of mosaicism, two cases of microdeletion, and four cases of structural rearrangement. Conclusion : FISH is a rapid and effective diagnostic method, which can be used as an adjunctive test to cytogenetic analysis, for prenatal identification of chromosome aneuploidies. For the more genome-wide screening with variety of probes, the technique of FISH is both expensive and labor-intensive.
Prasongsook, Sombat;Choi, Igseo;Bates, Ronald O.;Raney, Nancy E.;Ernst, Catherine W.;Tumwasorn, Sornthep
Journal of Animal Science and Technology
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v.57
no.9
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pp.31.1-31.11
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2015
Background: This study was conducted to investigate the potential association of variation in the insulin-like growth factor binding protein 2 (IGFBP2) gene with growth, carcass and meat quality traits in pigs. IGFBP2 is a member of the insulin-like growth factor binding protein family that is involved in regulating growth, and it maps to a region of pig chromosome 15 containing significant quantitative trait loci that affect economically important trait phenotypes. Results: An IGFBP2 polymorphism was identified in the Michigan State University (MSU) Duroc ${\times}$ Pietrain $F_2$ resource population (n = 408), and pigs were genotyped by MspI PCR-RFLP. Subsequently, a Duroc pig population from the National Swine Registry, USA, (n = 326) was genotyped using an Illumina Golden Gate assay. The IGFBP2 genotypic frequencies among the MSU resource population pigs were 3.43, 47.06 and 49.51 % for the AA, AB and BB genotypes, respectively. The genotypic frequencies for the Duroc pigs were 9.82, 47.85, and 42.33 % for the AA, AB and BB genotypes, respectively. Genotype effects (P < 0.05) were found in the MSU resource population for backfat thickness at $10^{th}$ rib and last rib as determined by ultrasound at 10, 13, 16 and 19 weeks of age, ADG from 10 to 22 weeks of age, and age to reach 105 kg. A genotype effect (P < 0.05) was also found for off test Longissimus muscle area in the Duroc population. Significant effects of IGFBP2 genotype (P < 0.05) were found for drip loss, 24 h postmortem pH, pH decline from 45 min to 24 h postmortem, subjective color score, CIE $L^*$ and $b^*$, Warner-Bratzler shear force, and sensory panel scores for juiciness, tenderness, connective tissue and overall tenderness in MSU resource population pigs. Genotype effects (P < 0.05) were found for 45-min pH, CIE $L^*$ and color score in the Duroc population. Conclusions: Results of this study revealed associations of the IGFBP2 genotypes with growth, carcass and meat quality traits in pigs. The results indicate IGFBP2 as a potential candidate gene for growth rate, backfat thickness, loin muscle area and some pork quality traits.
To investigate suitable breeding system for the improvement of economic characters of the sexlimited dark egg colour strains, the four kinds of breeding methods which are represented as sibmating, repeated backcrossing, multi-backcrossing every other generation, and repeated hybridization were detected from the P to the F6. 1. Pupation ratio was varied between the four kinds of breeding methods and decreased gradually in order of repeated hybridization, mult-backcrossing every other generation and sib-matinv, and repeated backcrossing. 2. Repeated backcrossing, multi-backcrossing every other generation, and repeated hybridization with the exception of sib-mating were consiered as available breeding methods to improve single cocoon weight, cocoon shell weight and cocoon shell ratio of the sex-limited dark egg colour strains. 3. As for the responses of the economic characters form the P to the F6, pupation ratio was fluctuant and unstable, on the other hand single cocoon weight, cocoon shell weight and cocoon shell ratio increased remarkably in the F2, but in the subsequant generatios the increasing rate of each characters were fluctuant irregularly. 4. After the original sex-limited dark egg colour strains were bred under the corresponding breeding methods, from the P to the F6 the economic characters were approached to the level of normal breeding silkworm lines'. 5. It came to the consideration that the autosomal fragment which was translocated on the W chromosome had no physiologically significant effect on the expression of the economic characters because the Expression index (E) of the sex-limited dark egg colour strains was similar to that of normal silkworm lines. 6. From the results, it comes to the conclusion that the useful breeding methods to improve the economic characters of the sex-limited dark egg colour strains will be a line separation including fixation of the characters.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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