Rana ovarian follicles consist of oocyte, vitelline envelope, granulosa cells, and theca/epithelial layer. Using scanning electron microscopy, the surface structure of each follicular component was investigated. Changes in oocyte surface during oocyte maturation were also examined. Theca/epithelial layer was almost transparent and some blood vessels and granulosa cells were observed underneath in intact follicle. The number of granulosa cells was estimated to be 6700-7200 per oocyte. The granulosa cells partially overlapped each other and their microvilli penetrated the vitelline membrane via holes present in the vitelline envelope and seemed to be linked to oocyte microvilli. After removal of the vitelline envelope by microforcep, oocyte microvilli were observed on the surface of the devitellined oocyte. The oocyte microvilli formed partial clusters on the surface of white spot area which appears iust before germinal vesicle breakdown (GVBD), whereas they were evenly distributed in other areas. The microvilli became shorter and less dense with oocyte maturation. The lengths of oocyte microvilli in the immature and mature oocyte were 1.5 $\mu$m and 0.6 $\mu$m, respectively. The present study suggests a fundamental structural change occurring on the oocyte surface during maturation.
Drastic changes were observed in egg chamber during oogenesis of Aedes togoi immediately after blood meal. The egg chamber, in which the oocyte remains at previtellogenic stage before blood meal, shows very little change in size even for 3 days after emergence but increased 25 folds in volume within 60 hours after blood meal, presumably due to rapid yolk formation. Upto 6 hours after blood meal structures considered to be the precursor of the yolk granules were not observed in the space between follicle cells and oocyte. Vitelline bodies, which are similar to dense bodies secreted from follicle cells, appeared in the space at 10 hours after blood meal. Although vitelline bodies were fused to form vitelline layer, these bodies seem to contribute to the formation of yolk granules. Nurse cells are connected to oocytes by cytoplasmic bridge before blood meal, but the cells are absorbed into oocyte at 6 hours after blood meal.
The ultrastructure of fertilized egg envelope from Pseudobagrus fulvidraco belongs to Bagridae was investigated using light and electron microscopes. The fertilized egg was compressed spherical, light-yellowish, demersal, and adhesive. The size of fertilized egg is about $1.85{\pm}0.13mm$, perivitelline space is not well developed, and there were no appendicular structures on the outer surface of egg envelope and oil droplets in vitelline membrane under light microscope. The micropyle was located in the animal pole of fertilized egg. Adhesive reticular fiber was covered fertilized egg envelope. The thickness of egg envelope was about $3.7{\sim}4.2{\mu}m$, and the egg envelope consisted of two layers: an outer, electron-dense adhesive fibers layer and an simple inner layer with pore. Therefore, the ultrastructure of cross section of the fertilized egg envelope showed species specificity, but studies on the other species belongs to Bagridae were need to get correct information about common traits in family.
We examined the morphology of the fertilized egg and the fine structure of fertilized egg envelopes of Poropanchax normani belonging to the family Poeciliidae, also known as Norman's lampeye using light and electron microscopes. The fertilized eggs with narrow perivitelline space were found to be spherical and demersal, additionally containing small oil droplets in the vitelline membrane. Further, a bundle of adhesive filaments was observed to be present on one side of the fertilized egg. These filaments possessed remarkably high elasticity and were approximately 1-3mm in length. The size of the fertilized egg was determined to be about 1.49 ± 0.07mm (n=30). The outer surface appeared smooth, and adhesive filaments originating at different location of the surface of the envelope were found to be distributed around the egg envelope and were joined together to form a single long bundle in scanning electron microscopic observation. A peak-like structure formed of several straight wrinkles was observed around the micropyle. However, the complete structure of the micropyle could not be studied due to the depth at which it was located. Additionally, the total thickness of the egg envelope was ascertained to be approximately12.5-14.5㎛. The egg envelope consisted of two distinct layers, an outer electron dense layer and an inner lamellar layer, further consisting of 10 sublayers of varying thicknesses. Collectively, it was observed that the morphological characteristics of the fertilized egg, fine structures surrounding the micropyle, outer surface, adhesive structure consisting adhesive filaments, and sections of fertilized egg envelope displayed species specificity.
참개구리의 난자형성 단계에 따른 난황막의 구조적 변화와 막단백질의 변화에 대하여 연구함으로써 난자형성에 따른 난탈막의 기능적 분화의 가능성을 알아보고자 하T:다. 난황막의 구조적 변화는 난자형성에 따른 미세음모의 수와 모양의 변화로 확인되었다. 그 수가 초기에는 적으나 중기에 증가하고 알기에 다시 감소하며, 그 모양도 처음에는 킬고 가늘지만, 나중에는 짧고 굵어진다. 막단백질은 wheat germ agglutinin에 대해서만 특이하게 반응을 보이는 당단백질로서 작은 난모세포(직경 100-800 urn)와 큰 난모세포(직경 1500 urn)에서 다르게 나타난다. 분자량은 106 KD, 60 KD, 순 KD과 같이 어느 단계에서나 공통적으로 나타나는 단백질이 존재하는 반면에 특히 작은 난모세포의 난황막에서만 찾아 볼 수 있는 130 KD, 125 KD, 90 KD, 28 KD, 26KD과 같은 단겐 특이적으로 나타나는 막단백질도 있다. 이와 같은 결과로 미루어 보아 난황막 단백질은 난자형성단계에 따라 변화한다는 사실을 알 수 있다.
카라신과(Characidae)에 속하는 Hemigrammus ocellifer, Gymnocorymbus ternetzi 및 Hemigrammus caudovittatus 의 경우 동물극 쪽에 정자의 통로인 난문 (micropyle)이 있으며, 3종 모두 난문 주위에 난막의 융기선이 방사형으로 위치하여 공통적인 특징을 보이지만 난막의 단면구조는 종에 따라서 서로 다른 것으로 알려져 있다. 그러나 난문의 구조가 카라신과 어류의 공통적인 과의 특성인지는 아직 밝혀져 있지 않다. 따라서 본 연구는 카라신과 어류에서 난문의 구조가 과의 공통적인 특징인지 아니면 종만이 가지는 종특성인지를 확인하고 계통분류학적 기초 자료를 얻기 위하여 Hyphessobrycon serpae의 수정란과 난막의 외부 및 내부형태를 광학현미경, 주사전자현미경 및 투과전자현미경을 이용하여 관찰하고자 하였다. Hyphessobrycon serpae의 수정란은 구형의 무색투명한 부착성 및 침성란으로 유적 (oil droplet)과 부속사는 관찰되지 않았다. 동물극 쪽에 수정을 위한 정자의 통로인 한 개의 난문 (micropyle)이 관찰되었고, 난문 주위에는 난막의 융기선이 방사형으로 배열하고 있었으며 난막의 융기선은 $13{\sim}15$개로 수정란마다 약간의 차이를 보였다. 난막의 표면은 산란상에 부착하는 기능을 수행하는 것으로 생각되는 망상형의 섬유상 구조물들이 분포하고 있었으며 이 망상구조물 내부에 pore canal이 산재하고 있었다. 수정란 난막의 두께는 $0.9{\sim}1.0{\mu}m$였으며 3층으로 구성되어 있었다. 외층은 부착기능을 하는 전자밀도가 가장 높은 섬유상층이었고, 중층은 표면에서 관찰되었던 pore canal들이 중층이 끊어진 형태로 완전히 관통되어 있었으며 내층은 전자밀도가 서로 다른 $6{\sim}7$층의 다층구조를 하고 있었다. 이상과 같이 Hyphessobrycon serpae의 수정란 난막의 미세구조적 특징은 이 종만이 가지는 독특한 형태학적 형질로서 종을 분류하는데 사용될 수 있으며 난문 주위에 난막의 융기선이 방사형으로 배열하고 있는 것은 카라신과 어류의 공통적인 과 (Family)의 특성으로 생각된다.
The ultrastructure of germ cells and follicle cells during oogenesis, oocyte degeneration, reproductive cycle, and first sexual maturity in female Cyclina sinensis were investigated for clams collected from Simpo, Jeollabuk-do, Korea, by cytological and histological observations. Vitellogenesis occured by way of endogeous autosynthesis and exogenous heterosynthesis: vitellogensis occurred through a process of autosynthesis, which involves a combined activities of the Golgi complex, mitochondria, and rough endoplasmic reticulum. The process of heterosynthesis involved endocytotic incorporation of extraovarian precursors into the basal region of the early vitellogenic oocytes prior to the formation of vitelline envelope. The follicle cells appear to play an integral role in vitellogenesis and oocyte degeneration, functioning in phagocytosis and digestion of products originating from the degenerated oocytes: these functions can permit the transfer of yolk precursors needed for vitellogenesis. Follicle cells might have a lysosomal system for breakdown and might also resorb phagosomes in the cytoplasm for nutrient storage during oocyte degeneration.
안점의 꽃갯지렁이(Pseudopotamilla occelata) 난모세포의 표면의 구조적 변화를 전자현미경으로 연구하였다.일단 난소로부터 방출되어나온 직경 5 $\mu$ m정도의 난모세포가 동일한 체강액에서 직경 185 $\mu$ mR까지 성장하는 난자형성중 난모세포의 난황막은 구조적으로 변하였다. 미융모(microvilli)는 구조, 수량 및 행동에 변화를 보였다. 전난황형성기에 미융모는 길이가 짧고 두 갈래로 갈라져 있었다. 난자형성이 진행됨에 따라 미융모의 길이는 계속 증가하는 반면 수는 전난황 형성기까지만 증가하고 난황형성기는 점차 감소하는 경향을 보였다. 미융모 끝에 Glycocaiyx구조가 전난황형성초기에서부터 형성되는 것이 보이는데, 이구조는 난모세포의 성장과 함께 수적으로 점차 증가하다가 마지막 단계에서 일정하게 유지되었다. 난자형성 말기에 미융모의 수축과 동시에 미융모의 끝이 줄기로부터 분리되면서 조그만 소낭이 형성되어 난화막 표면에 남게 되었다. 난화막은 처음에는 와층(outer layer),중간층(intermediate layer),및 내층(inner layer)의 3층으로 되어있었으나, 외층과 중간층은 난자형성 전기간을 통하여 구조적으로 거의 일정하지만, 내층은 그 두께가 두터워지고 80 $\mu$m의 난모세포에서부터는 두개의 층으로 다시 나뉘어지는 것을 볼 수 있었다. 이와같은 구조적인 변화는 아마도 난모세포의 표면이 비록 동일한 환경에서 일지라도 단계에 따라 기능적으로 다르게 분화한 결과로 생각되었다.
Cortical reaction and polyspermy block are well defined in most marine invertebrates. In Urechis species, the function of cortical granules (CGs) is not yet known, and there is controversy on whether the cortical reaction occurs, or the fertilization envelope (FE) is attributed to CG releases or functions to prevent polyspermy. This study was carried out to determine the cortical reactions and functions of the FE in Urechis unicinctus. Artificial insemination of the eggs revealed that CG release occurred to give rise to perivitelline space (PS) into the final FE. Both PS and final FE effectively blocked polyspermy. The final FE was accomplished within 10 min after sperm-egg initial binding. No massive release of CGs occurred within the early phase of 5 min after the initial binding, initially and the PS seemed to playa role to prevent polyspermy. The CG massively released its content into the PS in late phase of FE formation, and differentiated PS into five intermediate layers. The layers opened into each other by anastomosis, so that the final FE consisted of two layers, the inner layer ($15{\mu}m$ in thickness) and the outer layer ($1{\mu}m$ in thickness). The outer layer derived from vitelline layer and the inner layer consisted of PS and CG secretions. Immunofluorescence and confocal laser microscopy revealed that the spermatozoon took up residence in the egg cortex during FE formation and successive meioses of the fertilized egg. These results suggest that both PS and final FE of U. unicinctus were equivalent to the early and late block, respectively, of other marine animals.
등목어과에 속하는 어류의 경우 수정란 난막이 형태학적으로 같은 과이기 때문에 종간에 유사성이 있는지 또는 같은 과에 속한다고 하더라도 종에 따라 서로 다른 구조를 하고 있는지를 알아보고, 과 또는 종의 기준이 되는 형태학적 특징들을 확인하기 위해서 three-spot gourami (Trichogaster trichopterus), pearl gourami (Trichogaster leeri) 및 marble gourami (Trichogaster trichopterus trichopterus)를 실험재료로 하여 수정란과 난막구조를 광학현미경, 투과전자현미경 및 주사전자현미경을 이용하여 관찰 비교하였다. 3종의 수정란은 모두 구형의 무색투명한 부착성란으로 부성란이었고 난막 표면에 부속사는 없었으며 난황장 중앙에 하나의 유적이 있었다. 3종 모두 정자의 통로로 생각되는 난문이 관찰되었는데 경사가 완만한 수많은 흠을 보유하고 있는 깔대기 형태였으나 pearl gourami의 경우 꽃 모양의 구조물이 난문 안쪽에 위치하고 있었고 three-spot gourami와 아종인 marble gourami의 경우 형태는 서로 유사했다. 난막의 표면은 홈들이 난막 전체에 분포하고 있었고, 3종 모두 난막은 2층으로 부착층인 외층 및 전자밀도가 높은 한 층인 내층으로 구성되어 있었다. 이상과 같이 수정란의 형태, 난문의 구조, 난막표면 및 난막의 단면구조는 3종 모두 매우 유사한 형태로 등목어과 어류의 수정란 및 난막의 공통적인 특징으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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