Citrus tristeza virus (CTV) is efficiently transmitted in a semi-persistent manner by the brown citrus aphid (Toxoptera citricida (Kirkaldy)). Currently, the most sensitive method for detecting plant viruses in insect vectors is reverse-transcription quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR). In this study, the elongation factor-1 alpha (EF-1α) gene and acidic p0 ribosomal protein (RPAP0) gene were confirmed to be suitable reference genes for RT-qPCR normalization in viruliferous T. citricida aphids using the geNorm, NormFinder, and BestKeeper tools. Then the relative CTV titer in aphids (T. citricida) at different post-acquisition feeding times on healthy plants was quantified by RT-qPCR using EF-1α and RPAP0 as reference genes. The relative CTV titer retained in the aphids gradually decreased with increasing feeding time. During the first 0.5 h of feeding time on healthy plants, the remaining CTV titer in aphids showed about 80% rapid loss for the highly transmissible isolate CT11A and 40% loss for the poorly transmissible isolate CTLJ. The relative CTV titer in aphids during more than 12 h post-acquisition times for CT11A was significantly lower than at the other feeding times, which is similar to the trend found for CTLJ. To our knowledge, this is the first report about the relative titer variation of CTV remaining in T. citricida at different post-acquisition feeding times on healthy plants.
In the year of 2002 annual nationwide survey of virus diseases occurring in the pepper fields and greenhouses in Korea, the distribution and the incidence of viral diseases was investigated. The pepper samples from both greenhouses (155 samples) and open fields (227 samples) were collected and further analyzed to detect eleven different viruses by RT-PCR. The results indicate that no sample collected from both greenhouse and open field seems to be infected by TMV, RMV, PVY, AMV, and TSWV. On the other hand, CMV, BBWV2, PepMoV, PMMoV, TMGMV and ToMV are readily identified from greenhouse and open field samples by RT-PCR. The infection rates of the collected samples between greenhouse and open field are largely different. Comparing with 10% of virus-infected pepper samples grown in greenhouse, approximately one third of pepper samples collected from open field are infected. The mixed-infection rates in the virus-infected greenhouse and open field samples are 16% and 61%, respectively. The dominant virus occuring in greenhouse is PMMoV, indicating that virus-infected seed stocks and infected plant debris in the growing area may be important sources of inocula. On the other hand, both CMV and BBWV2 are dominant viruses in open field. This may indicate that the migration of viruliferous insect vectors into pepper fields may be the most important source of inoculum. Also, the survey shows that BBWV2 is newly immerging virus to be controlled in Korea. The discrepancies on the distribution and the occurrence of viral diseases between field and greenhouse may provide a fact that the accumulation and distribution of inoculum by successive cultivation and the migration of viruliferous vectors into growing areas are likely to be important factors to determine the incidence of viral diseases. Therefore, the further studies on epidemiology and the consideration of new breeding program of pepper are essential to minimize virus diseases.
To breed virus resistant rice variety, developing an efficient screening method is the most important. Two screening methods such as field screening and tray screening method have been used, but the efficiency of the field screening method is too low because of environment factors and the that of the tray screening method is good but screening capability is limited with only $200{\sim}300$ lines per year. To overcome those problems, mass screening method using screen house was developed. Barely as host plant of vector insect was grown in screen house in winter season. Then viruliferous insects are spread in the first spring of the initiation year and sustain them annually. Screening of virus resistance was tested two times in a year, the first screening was from April to June and the second from July to September. The virus infected rate of each susceptible varieties was increased to 92% for RSV and 100% for RDV from the second year. Also, this method can evaluate as many as $1,500{\sim}2,000$ pedigree lines in one time compared with the tray screening method. The result indicates that the mass screening method using screen house, which combines the advantages of the field and tray screening methods, is proven to be more efficient and reliable.
The occurrence factors of Rice stripe virus (RSV) in Chungcheongbukdo were analyzed by investigating the viruliferous insect rate (VIR) of overwintered small brown plant hopper (SBPH), the population density of SBPH, the infection rate of natural host plants, and the occurrence rate of RSV on rice paddy fields at the 3 areas of Cheongwon, Jincheon, and Boeun in 2008 and 2009. The average VIR of overwintered SBPH was 0.0% in 2008 and 1.1% in 2009. From SBPH collected on early June in 2009, VIR was higher as 1.4% at Jincheon and 4.2% at Boeun than those of overwintered SBPH, and this higher VIR might relate stronlgy with the adult population of SBPH immigrated from China. The populations of SBPH at Cheongwon, Jincheon and Boeun in 2008 were 3.8, 7.5 and 20.8 Head/$m^2$, respectively. However, those of Cheongwon and Jincheon increased up to about two folds as 8.4 and 13.1 in 2009. No RSV was detected on the natural host plants including barley. The factors involved in RSV occurrence were affected negatively by the low VIR of overwintered SBPH, the low population of overwintered SBPH, the low infection rate of RSV on the natural host plants, and the clean cultivation environment in Chungcheongbukdo.
In double cropping fields, there has been a risk of increase rice stripe viral disease outbreaking as the vector, small brown planthopper that overwinter in barley fields increases. Especially rice cultivation in Honam region has two types of cropping system such as rice only cropping in a season and double cropping both of rice and barley. In double cropping system, harvesting of barley could induce migration of the vector from barley to rice field. We found that the vector's density was different in rice fields by distance from barley field. The vector's density in rice field was highest 63 numbers within one meter from the neighbor barley field, and the numbers reduced greatly as the distance from barley field increases. The disease incidence according to rice cultivation methods was different, Donjin 1 was appeared to be a susceptible variety showing 2.4% and 2.5% of disease incidence in direct and transplanting cultivation, respectively. The small brown planthopper in a nearby rice field reach peak 3 days after the barley field was harvested.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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