Respiratory syncytial virus (RSV) and influenza virus are the most significant pathogens causing respiratory tract diseases. Composite vaccines are useful in reducing the number of vaccination and confer protection against multiple infectious agents. In this study, we generated fusion of RSV G protein core fragment (amino acid residues 131 to 230) and influenza HA1 globular head domain (amino acid residues 62 to 284) as a dual vaccine candidate. This fusion protein, Gcf-HA1, was bacterially expressed, purified by metal resin affinity chromatography, and refolded in PBS. BALB/c mice were intranasally immunized with Gcf-HA1 in combination with a mucosal adjuvant, cholera toxin (CT). Both serum IgG and mucosal IgA responses specific to Gcf and HA1 were significantly increased in Gcf-HA1/CT-vaccinated mice. To determine the protective efficacy of Gcf-HA1/CT vaccine, immunized mice were challenged with RSV (A2 strain) or influenza virus (A/PR/8/34). Neither detectable viral replication nor pathology was observed in the lungs of the immune mice. These results demonstrate that immunity induced by intranasal Gcf-HA1/CT immunization confers complete protection against both RSV and homologous influenza virus infection, suggesting our Gcf-HA1 vaccine candidate could be further developed as a dual subunit vaccine against RSV and influenza virus.
tRNA and 7SL RNA based antisense vehicles were prepared by inserting conserved anti-viral and anti-viroid domains. Anti-PVS coat protein leader sequence (ACPL) and antistructural antihairpin domain of PSTVd (AHII) were inserted in tRNA cassette; anti- zing finger domain of PVS, AHII and anti hop latent viroid ribozyme were inserted in 7SL RNA gene isolated from A. thaliana. These constructs were shown to be transcribed both, in in vitro and in in vivo conditions. However, it followed from our work that closely linked position of PoIII reference genes and PoIIII antisense genes within T-DNA lead to the impairment of RNA expression in transgenic plants. To assay in vivo transcription of antisense genes, hairy root potato cultures were established using h. tumefaciens A4-24 bearing both, Ri plasmid and PoIII-promoterless plant expression vectors with antisense RNA genes. Expression of antisense RNA in transgenic potato tissues was proven by specific RT-PCR reactions.
Kim, Hyun-Ran;Chung, Jae-Dong;Park, Jin-Woo;Choi, Yong-Mun;Yiem, Myoung-Soon
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.2
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pp.155-160
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2003
Grapevine leafroll-associated virus 3(GLRaV-3) is one of the most severe pathogens for viral diseases found in Korea. This study was conducted to establish the virus-free stock production system for the virus disease control. The effects of thermotherapy, merestem culture and chemotheratpy to eliminate the GLRaV-3 in gratevines were tested. Thermotherapy at 37$\pm$2$^{\circ}C$ for 6∼8 weeks combined with 0.5∼1.0mm size of meristem culture method was the most effective for virus elimination. Thermotherapy alone was not effective. In chemotheratpy, DHT and Amantadine (20, 40mg/L) treatment in medium was more effective than Ribavirin to eliminate the GLRaV-3 in grapevine. However, Ribavirin spraying to potted was not available for virus elimination. Therefore, virus-free stock production system using the thermotherapy combined with shoot apical meristem culture was the most effective in grapevine.
The health of Alaska pollock Theragra chalcogramma seedlings was monitored during February and April 2015. After microscopic examination for parasites, 20 samples sets were made by pooling 50 individuals for each sample set. Then, they were homogenized and examined for viral and bacterial pathogens. No parasites or viruses were detected using either microscopy or PCR. Colonies suspected of belonging to the genus Vibrio were isolated from Tryptic Soya Agar and Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar plate incubations, and identified as Vibrio anguillarum based on biochemical and physiological examinations and PCR amplification of the 16S rDNA, recA, and pyrH genes. Although there was no mortality during the sampling period, 65.0% (13/20) of the pooled samples were PCR-positive for V. anguillarum. To prevent possible outbreaks, the pathogenic potential of V. anguillarum should be investigated in the future.
Shin, Jeong Hee;Sung, Se In;Kim, Jin Kyu;Jung, Ji Mi;Kim, Eun Sun;Choi, Soo Han;Kim, Yae Jean;Ahn, Kang Mo;Chang, Yun Sil;Park, Won Soon
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.56
no.2
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pp.86-89
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2013
A retropharyngeal abscess is a rare disease entity in young infants but can develop after nasopharyngeal viral infection. Group B Streptococcus and Staphylococcus aureus are the most common pathogens in young infants, however, Mycobacterium tuberculosis is very rare. We report the case of retropharyngeal abscess and coinfection with S. aureus and M. tuberculosis in a very young infant presenting with respiratory symptoms due to upper airway obstruction. Usually tuberculous retropharyngeal abscesses are caused by the direct invasion of the bacteria from the spine via anterior longitudinal ligament of the spine. However, in this case, no associated spinal disease was observed.
Vaccines based on single-cycle viruses that are replication-incompetent due to knockout of replication-related structural gene(s) are more immunogenic than inactivated or subunit vaccines and can be used as delivery vehicles for foreign antigens without concerns on the reverting to virulent forms. The aim of this study was to develop a delivery vehicle for nervous necrosis virus (NNV)-like particles (VLPs) using G gene deleted single-cycle VHSV (rVHSV-𝚫G). Recombinant single-cycle VHSVs carrying NNV capsid protein gene between N and P gene of rVHSV-𝚫G genome (rVHSV-𝚫G-NNVCap) were rescued by reverse genetic technology. The successful expression of NNV capsid protein in cells infected with rVHSV-𝚫G-NNVCap was demonstrated by Western blot analysis, and the production of NNV VLPs in infected cells was confirmed using an electron microscopy. The results suggest that single-cycle VHSVs can be used as a safe delivery vehicle for NNV VLPs, and can be extended to other pathogens for the development of prophylactic vaccines.
Cyclospora cayetanensis is an apicomplexan protozoan and is one of the most common pathogens causing chronic diarrhea worldwide. Eight stool samples with diarrheal symptom out of 18 Korean residents who traveled to Nepal were obtained, and examined for 25 enteropathogens including 16 bacterial species, 5 viral species, and 4 protozoans in stool samples as causative agents of water-borne and food-borne disease. Only C. cayetanensis was detected by nested PCR, and 3 PCR-positive samples were sequenced to confirm species identification. However, the oocysts of C. cayetanensis in fecal samples could not be detected by direct microscopy of the stained sample. As far as we know, this is the first report of a group infection with C. cayetanensis from a traveler visiting Nepal, and the second report of a traveler's diarrhea by C. cayetanensis imported in Korea.
Kim, Jung-Min;Lim, Su-Jin;Kim, SoMin;Kim, MoonJung;Kim, ByoungHee;Tai, Truong A;Kim, Seonmi;Yoon, ByoungSu
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.1
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pp.4.1-4.9
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2020
Fast and accurate detection of viral RNA pathogens is important in apiculture. A polymerase chain reaction (PCR)-based detection method has been developed, which is simple, specific, and sensitive. In this study, we rapidly (in 1 min) synthesized cDNA from the RNA of deformed wing virus (DWV)-infected bees (Apis mellifera), and then, within 10 min, amplified the target cDNA by ultra-rapid qPCR. The PCR products were hybridized to a DNA-chip for confirmation of target gene specificity. The results of this study suggest that our method might be a useful tool for detecting DWV, as well as for the diagnosis of RNA virus-mediated diseases on-site.
Eul Bit, Noh;Ji Hye, Jin;Hee Ju, Choi;Kwang Il, Kim;Bo Seong, Kim
Journal of fish pathology
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v.35
no.2
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pp.231-239
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2022
In this study, imported ornamental goldfish (Oranda and black moor) with high mortality was investigated with histopathological analysis. Fishes showed clinical symptoms characterized by gill necrosis and cumulative mortality ranging from 60% to 90% within a month after import from Thailand and China in 2021. CyHV-2 was detected in gill, kidney, spleen and liver of goldfishes. Histopathological analysis revealed epithelial necrosis, intranuclear inclusion bodies associated with viral symptoms in epithelial cell, macrophage infiltration and vacuolation in secondary lamella. In addition, disseminated granuloma formation was observed in various organs such as kidney, heart and mesenchymal membranes. These lesions refer to coinfections with CyHV-2 and other pathogens that cause chronic inflammation, which leads to mortality. Therefore, early disease monitoring needs to reduce the mortality when ornamental goldfish is imported.
Objectives: Oral bacterial samples included subgingival, supragingival, and saliva plaques. As the diversity and number of microorganisms deffer depending on the area of the oral cavity and the method used, an appropriate and reliable collection method is important. The present study investigated oral bacterial sampling methods. Methods: Supragingival dental plaque was collected from the buccal and lingual tooth surfaces of study participants using sterilized cotton swabs. Plaques were collected from the subgingival area using a sterilized curette. Bacterial genomic DNA was extracted using MagNA Pure 96 DNA and Viral NA low-volume kits. Real-time polymerase chain reaction (PCR) was performed using the PowerCheckTM Periodontitis Pathogens Multiplex Real-time PCR kit. Results: Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, and Fusobacterium nucleatum of the orange complex were not observed in the subgingival biofilms of all study participants. For Porphyromonas. gingivalis, a significant correlation was observed between supragingival, subgingival, and total tooth surface biofilms. Compared to the supragingival and subgingival biofilmss, total tooth surface biofilm exhibited the highest bacterial count when the inswabbing method was used. Conclusions: Based on these findings, the supragingival swab method is recommended for oral bacterial research.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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