The aim of this study was to investigate protein profiles related to the induction of adipogenesis within the bovine longissimus dorsi muscle (BLDM) by proteomic analysis. We analyzed BLDM proteins at different growth stages to clarify the physiological mechanisms of marbled muscle development in 20 head of Korean native cattle (11 month: 10 head, 17 month: 10 head). BLDM proteins were analyzed by two-dimensional electrophoresis and image analysis. Villin 2 was specifically identified by mass spectrometry and a protein search engine. Villin 2 protein expression in BLDM decreased during the fat development stage in test steers. In a Western blot cell culture study of spontaneously immortal bovine muscle fibroblasts, the abundance of Villin 2 was shown to be down-regulated during differentiation into muscle. In 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts, Villin 2 was decreased during differentiation into adipocytes. The results suggest that Villin 2 may be related to the induction of transdifferentiation and adipogenesis in bovine longissimus dorsi muscle.
Objective: To determine whether CDX2 and villin protein expression are associated with intestinal metaplasia (IM) in gastric cardiac mucosa and to explore the relationship with evolution of gastric cardiac adenocarcinoma (GCA). Methods: We studied 143 gastric cardiac biopsy or resection specimens from Henan province China, including 25 cardiac gastritis specimens with IM, 65 dysplasia specimens with IM and 35 gastric cardiac adenocarcinoma specimens and stained them for CDX2 and villin by the immunohistochemical SP method. 15 normal gastric cardiac biopsy specimens were also collected as control. Results: (1) Normal gastric mucosa presented no CDX2 and villin expression. The positive rates of CDX2 protein in cardiac gastritis with IM, dysplasia with IM, and carcinoma tissues were 84.0% (21/25), 66.7% (32/48) and 36.4% (20/55), respectively. While the positive rates of villin protein in cardiac gastritis with IM, dysplasia with IM, and carcinoma tissues were 76.0% (19/25), 70.8% (34/48) and 45.5% (25/55), respectively. There were significant differences among the three groups for both CDX2 and villin (P<0.01). Spearman's rank correlation coefficient(rho) showed a close correlation between the two proteins (r=0.843, P<0.01) and both were positively related with tumor differentiation (both P<0.05), but not associated with age, sex, invasion and metastasis of lymph node (P>0.05). Conclusion: Our results suggest that ectopic expression of CDX2 and villin may be involved in early-stage IM and tumorigenesis in gastric cardia and the expression of villin may be regulated by CDX2.
Se-A Lee;Hye Jeong Lee;Na-Yeon Gu;Yu-Ri Park;Eun-Ju Kim;Seok-Jin Kang;Bang-Hun Hyun;Dong-Kun Yang
Journal of Veterinary Science
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v.24
no.4
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pp.53.1-53.12
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2023
Background: Mammalian orthoreovirus type 3 (MRV3), which is responsible for gastroenteritis in many mammalian species including pigs, has been isolated from piglets with severe diarrhea. However, the use of pig-derived cells as an infection model for swine-MRV3 has rarely been studied. Objectives: This study aims to establish porcine intestinal organoids (PIOs) and examine their susceptibility as an in vitro model for intestinal MRV3 infection. Methods: PIOs were isolated and established from the jejunum of a miniature pig. Established PIOs were characterized using polymerase chain reaction (PCR) and immunofluorescence assays (IFAs) to confirm the expression of small intestine-specific genes and proteins, such as Lgr5, LYZI, Mucin-2, ChgA, and Villin. The monolayered PIOs and three-dimensional (3D) PIOs, obtained through their distribution to expose the apical surface, were infected with MRV3 for 2 h, washed with Dulbecco's phosphate-buffered saline, and observed. Viral infection was confirmed using PCR and IFA. We performed quantitative real-time reverse transcription-PCR to assess changes in viral copy numbers and gene expressions linked to intestinal epithelial genes and antiviral activity. Results: The established PIOs have molecular characteristics of intestinal organoids. Infected PIOs showed delayed proliferation with disruption of structures. In addition, infection with MRV3 altered the gene expression linked to intestinal epithelial cells and antiviral activity, and these effects were observed in both 2D and 3D models. Furthermore, viral copy numbers in the supernatant of both models increased in a time-dependent manner. Conclusions: We suggest that PIOs can be an in vitro model to study the infection mechanism of MRV3 in detail, facilitating pharmaceutical development.
Kim, Chang-Su;Hwang, Jung-Won;Ryu, Jae-Jun;Shin, Sang-Wan;Sohn, Sung-Hwa;Kim, Ki-Nam;Kim, Meyoung-Kon
The Journal of Korean Academy of Prosthodontics
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v.43
no.3
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pp.393-408
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2005
Statement of problem. In the process of bone formation, titanium (Ti) surface roughness is an important factor modulating osteoblastic function. Purpose. This study was carried out to determine the effect of different Ti surface on biologic responses of a human osteoblast-like cell line (MG63). Materials and methods. MG63 cells were cultured on S (smooth), SLA (sandblasted largegrit & acid etching), HA (hydroxyapatite) Ti. The morphology and attachment of the cells were examined by SEM. The cDNAs prepared from total RNAs of MG63 were hybridized to a human cDNA microarray (1,152 elements). Results. The appearances of the surfaces observed with SEM were different in the three types of dental substrates. The surface of SLA and HA were shown to be rougher than S. MG63 cells cultured on SLA and HA were cell-matrix interaction. In the expression of genes involved in osseointegration, upregulated genes were bone morphogenetic protein, Villin, Integrin, Insulin-like growth factors in different surfaces. Downregulated genes were fibroblast growth factor receptor 4, Bcl 2-related protein, collagen, CD4 in different surfaces. Conclusion. The attachment and expression of key osteogenic regulatory genes were enhanced by surface roughness of the dental materials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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