The effect of heat treatment on membrane permeabilities of yeast's cells was studied, the amounts of efflux out of yeast cells were put to analysis, and fraction survival was also counted by viable plate counting method. Effects of nutritional substances on thermally injured yeast cells were also investigated under the highlight of reabsorption mechanism, then the relationship between permeability and surviving action in injured yeast cells are discussed.
Addition of spice for inhibition of bacterial growth in ground chicken meat was investigated. The ground chicken meat approximately contained 72.98±0.15% moisture, 23.37±0.46% crude protein, 1.00±0.03% crude fat, and 1.90±0.03% ashes. Addition of rosemary showed the maximum bacterial inhibition, followed by garlic and mustard. The inhibitory effect increased with the addition of a greater quantity of spices. The optimal added concentration of spices for inhibition of total viable cell and proliferation of Escherichia coli in ground chicken meat was 2%, 4%, and 1.2% for rosemary, garlic, and mustard, respectively. The growth inhibition of total viable cells and E. coli differed during storage period for MixA (97.4%) > rosemary (96.9%) > MixB (96.3%) > garlic (53.7%) > mustard (33.3%). The addition of sterilized garlic to ground chicken meat showed that the total viable cells was low at 2.6-3.0 log CFU/g on the 0-day and 2.4-3.2 log CFU/g on the 9-day, and the number decreased as the storage lengthened. Non-sterilized garlic treatment showed a higher number of total viable cells than the control group, and this increased with elapse of storage time. The number of E. coli, was low at 0.4-1.0 log CFU/g on the 0-day and 0.5-1.5 log CFU/g on the 9-day for the sterilized group, and the change during the storage showed a similar trend for the total viable cells. In conclusion, the microbial safety of ground chicken meat products was improved by various mixed applications of rosemary, garlic, and mustard.
VBNC (Viable but nonculturable) state is an adaptive response of cells in adverse environments, which lead cell not grow on routine nutrient agar. In this study, we induced VBNC in Escherichia coli using copper and verify the characterization of it. After treatment of copper, we didn't detect any cells via plate cultivation, namely, colony forming unit (CFU) was zero. However, we identified the existence of VBNC by staining live cells with Live/Dead BacLight bacterial viability kit and counting them through flow cytometry. Then we isolated genomic DNA and RNA from VBNC-induced cells and analyzed the stability of them. Degradation of RNA is more severe than that of DNA and RNA is degraded as specific fragments. In addition, we showed the morphology of VBNC cell by Bio-Transmission Electron Microscope (Bio-TEM). VBNC cell showed impaired periplasmic space and inner and outer membrane were separated and the amount of cytosol were significantly decreased.
This study was conducted to develop a real time reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) method for the detection of viable Enterobacteriaceae in milk using primers based on the genes of ribosomal proteins S11 and S13 and to determine effects of heating and subsequent treatments on the threshold cycle (Ct) of the real time RT-PCR. Total RNA was isolated from 17 strains of bacteria including 11 strains of Enterobacteriaceae suspended in milk using a modified Tri reagent method. SYBR Green Master Mix was added to the RNA and the mixture was subjected to the real time RT-PCR. The Cts of eleven type strains of the Enterobacteriaceae in milk ($10^7$ cells) in the real time RT-PCR ranged from 21.5 to 24.6. However, the Cts of Pseudomonas fluorescens, Acinetobacter calcoaceticus, and three gram-positive bacteria were more than 40. The real time RT-PCR detected as low as $10^3$ cells in agarose gel electrophoresis. The Cts increased from 22.0 to 34.2 when milk samples contaminated with Escherichia coli ($10^7$ cells/mL) were heated at $65^{\circ}C$ for 30 min. In addition, subsequent incubation at $37^{\circ}C$ for 6 and 24 h increased the Cts further up to 36.2 and 37.2, respectively. Addition of RNase A to the bacterial suspension obtained from the heated milk and subsequent incubation at $37^{\circ}C$ for 1 h increased the Cts to more than 40. The results of this study suggests that pretreatment of bacterial cells heated in milk with RNase A before RNA extraction might enhance the ability to differentiate between viable and dead bacteria using real time RT-PCR.
Viability plays an important role in the beneficial microbes (probiotics) to produce health benefits. However, this idea has been changed after the invention of the term "paraprobiotics," indicating that non-viable microbes could produce health benefits similar to those produced by live probiotics. Occasionally, it might be dangerous to administer live probiotics to people with weak immunity. In such cases, ingestion of paraprobiotics could be a potential alternative. The definition of paraprobiotics refers to the use of inactivated (non-viable) microbial cells or cell fractions to provide health benefits to the consumer. Paraprobiotics have attracted much attention because of their long shelf life, safety, and beneficial effects, such as modulation of immunity, modification of biological responses, reduction of cholesterol, anti-inflammatory, and antiproliferative properties. These features indicate that paraprobiotics may play a vital role in improving the health of the consumer by enhancing particular physiological functions, even though the exact underlying mechanisms have not yet been completely elucidated. In this mini-review, we briefly discuss the historical backgrounds of paraprobiotics and evidence of their health-promoting effects, prophylactic, and therapeutic properties.
Carbon nanotubes (CNTs) stand at the frontier of nanotechnology and are destined to stimulate the next industrial revolution. Rapid increase in their production and use in the technology industry have led to concerns over the effects of CNT on human health and the environment. The prominent use of CNTs in biomedical applications also increases the possibility of human exposure, while properties such as their high aspect ratio (fiber-like shape) and large surface area raise safety concerns for human health if exposure does occur. It is crucial to develop viable alternatives to in vivo tests in order to evaluate the toxicity of engineered CNTs and develop validated experimental models capable of identifying CNTs' toxic effects and predicting their level of toxicity in the human respiratory system. Human lung epithelial cells serve as a barrier at the interface between the surrounding air and lung tissues in response to exogenous particles such as air-pollutants, including CNTs. Monolayer culture of the key individual cell types has provided abundant fundamental information on the response of these cells to external perturbations. However, such systems are limited by the absence of cell-cell interactions and their dynamic nature, which are both present in vivo. In this review, we suggested two viable alternatives to in vivo tests to evaluate the health risk of human exposure to CNTs.
The objectives of this study were to investigate the effect of Lactobacillus paracasei subsp. tolerans JG22 isolated from pepper leaf jangajji on the mutagenic activity of N-methyl, N'-nitro, N-nitrosoguanidine (MNNG) and 2-nitrofluene (2-NF) and to evaluate the effect of physico-chemical pretreatment on the antimutagenic activity of the strain. The viable cells of JG22 strain displayed a significantly high (p <0.05) antimutagenic activity against both mutagens tested. The antimutagenic effect of JG22 strain seems to be positively correlated with the amounts of the cells in the incubation time. This strain produced the antimutagenic activity of the maximum levels after preincubation for 30 min. The binding of this strain against the mutagenic compounds might be mainly present in the cell wall fraction rather than the cytosol fraction. Pretreatment with proteolytic enzymes and simulated gastric and intestinal juices and at different pH values had no significant effect on two mutagens removal by the viable cells. However, the binding activity of the mutagen by the strain seems to be affected by heating, enzymes including $\alpha$-amylase and lysozyme, divalent ions, and sodium metaperiodate. Thus, carbohydrates consisting of the cell walls may be important elements responsible for the binding of MNNG and 2-NF by this strain. In conclusion, the binding of the mutagens to cells of JG 22 strain may play a vital role in suppressing the process of mutagenesis induced by mutagens.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
/
v.29
no.1
s.232
/
pp.53-58
/
2005
We present a high-throughput continuous cell separation chip using hydrodynamic dielectrophoresis (DEP) process. The continuous cell separation chip uses three planar electrodes in a separation channel, where the positive DEP cells are moved away from the central streamline while the negative DEP cells remain in the central streamline. In the experimental study, we use the mixture of viable (live) and nonviable (dead) yeast cells in order to obtain the continuous cell separation conditions. For the conditions of the electric fields frequency of 5MHz and the medium conductivity of $5{\mu}S/cm$, the fabricated chip performs a continuous separation of the yeast cell mixture at the varying flow-rate in the range of $0.1{\sim}{\mu{\ell}/min$.; thereby, resulting in the purity ranges of $95.9{\sim}97.3\%\;and\;64.5{\sim}74.3\%$ respectively for the viable and nonviable yeast cells. present chip demonstrates the constant cell separation performance for varying mixture flow-rates.
A classical technique to study somitic cell fate is to employ the cross-transplantation of quail somites into a chick host. The densely stained nucleoli of the quail cells makes it possible to assess the fate of the donor quail cells in the chick host. Classical somite transplantation techniques have been hampered by the necessity of a small opening in the chick eggshell, difficulty in hatching the offspring and interspecies post-hatch graft rejection. With the advent of transgenic chicken technology, it is now possible to use embryos from transgenic chickens expressing reporter genes in somite cross-transplantation techniques to remove any possibility of interspecies graft rejection. This report describes using a surrogate eggshell system in conjunction with transgenic chick:chick somitic cell cross-transplantation to generate viable chimeric embryos and offspring. Greater than 40% of manipulated embryos survive past 10 days of incubation, and ~80% of embryos successfully cultured past 10 days of incubation hatched to produce viable offspring.
Purpose: The use of an autogenous fat graft has become a common procedure in plastic surgery. However, questions remain concerning on the viability of fat cells and preservation method of aspirated fat. The purpose of this study was to examine the viability of fat cells stored at $-20^{\circ}C$ in the freeze for 1 year after harvest from abdominal liposuction. Methods: Eighteen adults (aged 24 to 65 years old, 16 female and 2 male) were recruited for this study. Harvested aspirated fat tissues were obtained by suction - assisted lipectomy and frozen at $-20^{\circ}C$ commercial refrigerator for one year (average 12.5 months). The viability off at cells in specimens were measured after thawing. The numbers of viable cells were measured on a fluorescence microscope after staining with fluorescein diacetate and propidium iodide. GPDH (Glycerol - 3 - phosphate dehydrogenase) activity was measured. Cell culture was done for 3 weeks. Results: There were no viable cells under the fluorescence microscope, no detectable GPDH activity, and no cultured cells. Conclusion: These findings suggest that aspirated fat after frozen storage for one year at $-20^{\circ}C$ freezer is inadequate to reuse.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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