Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.19
no.4
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pp.1022-1026
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2005
To clarify the toxic effect on cultured neonatal mouse cerebral neurons damaged by ischemia, we examined the cytotoxicity induced by ischemia and the protective effect of antioxidant and AMPA/kainate receptor antagonist against ischemia-induced cytotoxicity on cultured cerebral neurons. For this study, mice were administrated with 20ug/kg cyclothiazide or 50U/kg vitamin E via intraperitoneal injection for 2 hours before ischemic induction. After cell culture for 7 days, cell viability, amount of neurofilament and protein kinase C activity were examined. Ischemia decreased significantly cell viability, amount of neurofilament and the increase of protein kinase C activity in these cultures. In the protective effect, vitamin I showed remarkably the increase of cell viability and amount of neurofilament, and the decrease of protein kinase C activity but, cyclothiazide did not showed any protective effect on ischemia-induced cytotoxicity. From these results, it is suggested that vitamin I is effective in blocking the neurotoxicity induced by ischemia, but cyclothiazide as a AMPA/kainate receptor antagonist is not.
Red radish seeds were irradiated at doses up to 8 kGy using electron beam (e-beam) and gamma ray ($\gamma$-ray). The seed viability and functional properties (carotenoid, chlorophyll, ascorbic acid, and total phenol) of sprouts grown from these irradiated seeds were evaluated. High germination percentage ($\geq$97%) was observed in seeds irradiated at $\leq$5 kGy, but the yield ratio and sprout length significantly decreased with increased irradiation dose. Irradiation at $\geq$6 kGy resulted in curling of the sprout roots. Sprouting enhanced the functional properties of red radish seeds as indicated by the increased carotenoid, chlorophyll, ascorbic acid, and total phenol contents during germination. However, radiation treatment hampered the growth of seeds resulting in underdeveloped sprouts with decreased carotenoid, chlorophyll, ascorbic acid, and total phenol contents. In general, e-beam and $\gamma$-ray irradiation of red radish seeds showed similar effects on the seed viability and functional properties of sprouts. Postharvest storage reduced the functional quality of sprouts.
Exo-polysaccharide isolated from the culture of Grifola frondosa was modified by sodium periodate ($NaIO_4$) and sodium chlorite ($NaClO_2$) to delete polysaccharide part and phenolic compound, respectively, and was investigated what effect has each part of exo-polysaccharide against 2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in porcine kidney epithelial cells (LLC-PK1). Oxidative stress on LLC-PK1 cell was measured by cell viability, lipid peroxidation, superoxide dismutase (SOD), and glutathione peroxidase (GSH-px) activity. Exposure of LLC-PK1 cells to 1 mM AAPH for 24 hr resulted in significant decrease in cell viability, SOD, and GSH-px action, and significant increase in lipid peroxidation. The treatment of exo-polysaccharide and $NaIO_4$ modified sample protected LLC-PK1 cells from AAPH-induced cell damage such as cell viability, lipid peroxidation, SOD, and GSH-px activity in a dose dependant manner (10, 100, and $500{\mu}g/mL$). However, the treatment of $NaClO_2$ modified sample did not affect for cell viability, lipid peroxidation, SOD, and GSH-px activity. The antioxidant activity of exo-polysaccharide was significantly decreased on AAPH-induced LLC-PK1 cell system when phenolic compound was deleted. The antioxidant activity was significantly correlated with the content of phenolic compound of exo-polysaccharide.
Objectives: This study was camed out to examine the effect of five fractions of aqueous extract from Artemisia capillaris THUNB(ACT), on TGF, 1-induced apoptosis, cell viability, cell cycle progression and mRNA expression of apoptosis-related genes in human hepatocyte cell line HepG2. Methods: This study employed Tryphan blue exclusion assay, DNA fragmentation assay, Cpp32 protease activity assay and Quantitative RT-PCR analysis. Results: In the Tryphan blue exclusion assay, the butanol fraction of ACT with $TGF{\beta}$, l showed magnificent (Nice word, ut is it appropriate in a medical abstract\ulcorner) viability and the H2O fraction of ACT with $TGF{\beta}$, l also showed higher viability than only $TGF{\beta}$, l-treated group. DNA fragmentation assay showed that the butanol fraction and the H2O fraction carried inhibitory effects on apoptosis induction, with the butanol fraction displaying greater effects. The Cpp32 protease activity assay showed that the butanol fraction decreased Cpp32 protease activity. The H2O fraction of ACT had no significant effect on the Cpp32 protease activity. Quantitative RT-PCR showed that the butanol fraction suppressed Bax, p 15/INK4B, p21/Waf1, PAI-1 and increased Bcl-2 gene. Conclusions: The data shows that butanol fraction of ACT increases the hepatocyte viability and has the hepatocellular protective effect by the suppression of $TGF{\beta}$, l induced-apoptosis through gene regulation.
Bifidobcterium spp. can provide human being with several beneficial physiological. Therefor, there has been a considerable interest in products Bifidobcterium spp. dietary supplements or as starter cultures for probiotic products that may assint in the improvement of health on the human. But indusrial applications have been limited because Bifidobcterium spp. are sensitive to acidic pH due to organic acid produced by themselves and various conditions. The objective of this study was to establish new method for improvement of Bifidobcterium viability by entrapment im calcium alginate beads. We have a plan to select the most suitable polymer through the comparison with acid tolerance oxygen tolerance and theological properties of polymer. Increase of the viable number of Bifidobcterium induced increasing acid tolerance and oxygen tolernce trough the development of entrapment technique. The 4%, 3030mm diameter) sodium alginate beads led to the best survivability under acid condition. Especially, addition of 6% mannitol, 6% glycerol or 6% sorbitol to the sodium alginate helped a beneficial effect on viability against acid, bile salt, hydrogen peroxide and cold strage. The number of viability of entrapeede cells by retreatment was 96 fold higher than non-entrapeed cells after 5 hours of storage under pH 3 acidic condition. These experimental data clearly demonstrate that a whole cell immobilization by entrapment in calcium alginate beads is an important survival mechanism enable to withstand environmental stresses as the acidic condition, hydrogen peroxide toxicity and frozen state.
This study examined the effects of cyclosporin A [CsA] and methylprednisolone[MP] on the viability of the devascularized trachea after heterotopic transplantation. Fourty-two tracheal segments were harvested from 21 donor Wistar rats. Those tracheal segments were heterotopically implanted into the abdomen of recipient rats after wrapping in omentum. Heterotopical implantation was performed in six groups of rats:Group I was Wistar syngeneic controls, and five groups of Sprague Dawley recipients, receiving no immunosuppression[Group II], CsA alone[Group III, V], and CsA in combination with MP[Group IV, VI]. After 14 days, the tracheal segments were histologically evaluated.Epithelial thickness and the degree of epithelial regeneration were significantly different between group I and group II, III, VI, VI [p< 0.05]. There were significant differences in the epithelial thickness between group II, III, IV and group V, VI. In the degree of epithelial regeneration, there were significant differences in group II, group III-IV, and group V-VI. Without immunosuppression there was virtually no epithelium, whereas low-dose immunosuppression yielded intermediated viability, and with high dose CsA and MP we observed improved tracheal viability. Our results suggest that optimal combination of CsA and MP may improve the viability in heterotopic tracheal allografts.
This study was done to verify factors affecting viability after cryopreservation and pregnancy rate after frozen-thawed embryo transfer into uterus. Embryos were cryopreserved slow freezing and slow thawing and used DMSO as cryoprotectant. The results were to follows. 1. Viability of frozen-thawed embryos were 75.5% (94/105), which compared with viability of embryos according to cell stage, $2{\sim}5$ cell was 68.4% and $6{\sim}16$ cell 80.4% were significant differences (p<0.05). 2. No significant difference in duration of cryopreservation on effects affecting pregnancy rate was observed. 3. Number of embryo transfered into uterus was significant differences (p<0.05). 4. Four pregnancies resulted following replacement of 35 frozen-thawed.
The RAD3 gene of Saccharomyces cerevisiae is required for excision repair and is essential for cell viability. The RAD3 encoded protein possesses a single stranded DNA-dependent ATPase and DNA and DNA-RNA helicase activities. To examine the extent of conservation of structure and function of a S. pombe RAD3 during eukaryotic evolution, the RAD3 homolog gene was isolated by screening of genomic DNA library. The isolated gene was designated as HRD3 (homolog of RAD3 gene). Southern blot analysis confirmed that S. pombe chromosome contains the same DNA as HRD3 gene and this gene exists as a single copy in S. pombe. The transcript of 2.8 kb was detected by Northern blot analysis, The level of transcripts increased by ultraviolet (UV) irradiation, indicating that HRD3 is one of the UV-inducible genes in S. pombe. Furthermore, the predicted partial sequence of HRD3 protein has 60% identity to S. cerevisiae RAD3 gene. This homology was particularly striking in the regions identified as being conserved in a group of DNA helicases. Gene deletion experiments indicate that the HRD3 gene is essential for viability and DNA repair function. These observations suggest evolutionary conservation of other protein components with which HRD3 might interact in mediating its DNA repair and viability functions.
Purpose: The effects of various concentrations of ascorbic acid on stem cell spheroids derived from intraoral areas are not known yet. Thus, the purpose of this study is to evaluate the effects of different concentrations of ascorbic acid on the morphology and cellular viability of stem cell spheroids derived from the gingival tissues. Materials and Methods: Stem cells were plated onto silicon elastomer-based concave microwells and grown in the presence of ascorbic acid at concentrations ranging from 0.003% to 0.3%. The morphology of the cells was viewed under an inverted microscope at day 1, 2, 3 and 5. Qualitative live/dead assay and quantitative cellular viability using Cell Counting Kit-8 were performed on day 2 and day 5. Results: Gingiva-derived stem cells formed spheroids irrespective of ascorbic acid concentration in silicon elastomer-based concave microwells. Increase in the diameter of spheroid were seen with higher concentrations of ascorbic acid. Higher cellular viability was seen in higher concentrations of ascorbic acid. Conclusion: Within the experimental setting, the application of ascorbic acid on stem-cell spheroids produced an increase in the size and higher viability with higher dosage. It can be suggested ascorbic acid be applied with stem cell spheroids for tissue engineering purposes.
The present study was aimed to determine the effect of green tea extract (GTE) and beta-mercaptoethanol (${\beta}$-ME) supplementation in boar sperm freezing extender on sperm motility, viability and reactive oxygen species (ROS) level. Experimental groups were allocated into Lactose-egg yolk (LEY) without antioxidant (control), GTE (1,000 mg/L GTE in LEY) and ${\beta}$-ME ($50{\mu}M$${\beta}$-ME in LEY). Spermatozoa extended with LEY were cooled to $5^{\circ}C$ for 3 h and then kept at $5^{\circ}C$ for 30 min following dilution with LEY containing 9% glycerol and 1.5% Equex STM (final sperm concentration: $1{\times}10^8/mL$). Spermatozoa were loaded into straws and frozen in nitrogen vapor for 20 min. Following thawing at $37^{\circ}C$ for 25 sec, sperm viability and ROS level were measured using fluorescent double stain Fertility(R) and cytometry, respectively. Motility and viability of GTE supplemented-group were higher than those of control and ${\beta}$-ME without significance. ROS level in GTE group showed significantly lower than control (P < 0.05). In conclusion, GTE supplementation in boar sperm freezing extender can reduce ROS generation during freezing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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