Background: Transmyocardial laser revascularization(TMLR) for revascularizing ischemic myocardium in patients was originally based on the assumption that laser channels remain their patency much longer. But recent studies show that laser channels did not remain open and that TMLR could achieve treatment benefits without long-term channel patency. The angiongencesis is currently thought to be induced by non-specific inflammatory response to mechanical tissue injury. This study is to evaluate hypothesis that various transmyocaridal mechanical revascularization(TMMR) may induce the angiogenic responses similar to that seen with TMLR, and transmyocaridal polymer stent revascularization(TMSR), the polymer stent in the myocardial tissue is hydrolyzed in 2 weeks, may enhance the non-specific inflammatory reaction resulting angiogenesis. Furthermore, polymer myocaridal stent channels remain long-term patency. Material and Method: Eight domestic pigs underwent ligation of the proximal circumflex artery, and 2 weeks later they were randomized to undergo transmycardial acupunctural revascularization (TMPR, Group I) of the left lateral wall with 18-G needle(n=2), to undergo transmyocardial (TMDR, Group II) with industrial 2mm steel drill(n=2), to undergo transmyocardial polymer stent revascularization (TMSR, Group III) after drilling the infarcted myocardium(n=2), the stent is poly(lactic acid-co-glycolic acid), which is self-degradated in the myocardium, and to a control group the ischemic zone was unterated(n=2). All the pigs were sacrificed after 4 weeks TMMR. Sections from the ischemic zone were submitted for vascular endothelial growth factor (VEGF) ELISA and histology. Result: There were makedly increase in the VEGF immunoassay in the ischemic zone of the TMMR group compared to the ischemic zone of the control group(control: each 30.85 and 43.15pg/mg protein, TMPR: each 44.14 and 68.61 pg/mg protein, TMDR: each 65.92 and 78.65 pg/mg protein, TMSR: each 177.39 and 168.87 pg/mg protein). TMSR channels caused greatest VEGF expression than channels made by other group and the polymer stent channels remained vacuole after 4 weeks. Conclusion: Transmyocardial polymer stent revascularization promoted the most angiogenci response by the VEGF immunoassay, although our study did not show the statistical significancy. The channels remained but the flow patency was not verified. Transmyocardial polymer stent revascularization (TMSR) is desirable in future experimental trials and in view of the significant cost implications comparable to that of laser.
두토막눈썹참갯지렁이의 피부계는 바깥쪽으로 부터 큐티클층, 상피층, 진피층으로 구성된다. 큐티클층은 외분비공을 가지며, 표면은 epicuticular projections로 덮여있다. 큐티클층과 상피층의 지지세포 사이에서는 반접착반이 관찰된다. 상피층에서는 지지세포와 선세포들이 관찰된다. 지지세포는 불규칙한 형태이며, 이들 세포의 핵은 뚜렷하고 크며, $1{\~}2$개의 인을 가진다. 세포질에서는 잘 발달된 당김세사와 다수의 미토콘드리아, 조면소포체, 유리리보좀 그리고 전자밀도가 아주 높은 소수의 색소과립들이 관찰된다. 선세포는 AB-PAS에 청색으로 반응하였으며, 투과전자현미경 관찰 결과 ${\alpha}, {\beta}, {\gamma}$의 세 종류로 구분할 수 있다. 첫 번째 종류인 ${\alpha} type$은 난형으로 뚜렷한 핵을 가지며, 세포질에서는 잘 발달된 당김세사와 막으로 싸인 직경 $0.8{\~}~l.5 {\mu}m$크기의 분비과립들이 세포질 한쪽에 밀집되어 있는 것을 관찰할 수 있다. 두 번째 종류인 ${\beta} type$은 세포의 형태가 불규칙하며, 커다란 공포를 가지며, 직경 $0.5{\~}~0.8 {\mu}m$크기의 분비과립들이 세포질 전체에 분포한다. 세 번째 종류인 ${\gamma} type$은 세포의 형태가 불규칙하며, 잘 발달된 소포체와 골지체 그리고 직경 $0.2{\~}~0.3 {\mu}m$ 크기의 분비과립을 가지며, 이들의 전자밀도는 선세포들의 분비과립 가운데 가장 높다.
본 연구의 목적은 TCDD로 인해 발생하는 산화적 스트레스에 대한 GYB의 내분비 기능 및 항산화 효능에 미치는 영향을 평가하기 위한 것이다. 2017년도에, 산화적 스트레스에 대한 GYB의 효능을 평가하기 위해 35마리의 수컷 SD랫드를 5개의 그룹으로 나누어 실험하였다. 정상 대조군은 vehicle 및 saline을 투여하였으며, TCDD 단독투여그룹은 TCDD(2 ㎍/kg, weeks) 및 생리식염수를 복강 내 투여하였으며, 시험 군은 6주 동안 GYB (75, 150, 300 mg/kg)를 3가지 농도로 나누어 경구로 투여하였다. 체중은 NC 그룹의 랫드와 비교하였을 때 TCDD 노출 후 6주 후에 유의하게 감소하였다(p<0.001). 그러나 TCDD에 의한 체중 감소는 GYB 300 mg/kg 투여에 의해 현저하게 보호되었다(p<0.01). TCDD로 유도된 랫드의 간은 세포질의 공포 변성이 나타났으며, 간의 동양 혈관과 중량의 증가를 나타냈다. MDA, SOD를 측정한 결과, TCDD 투여에 의하여 두 항목 모두 감소하는 경향이 나타났다. 반면, GYB 투여에 의한 변화는 나타나지 않았고, SOD 결과에서 GYB 300군에서 NC군 대비 유의성이 관찰(p<0.05) 되었다. 이러한 발견은 GYB가 랫드에서 TCDD 유도 간 독성에 대해 보호 효과를 가질 수 있음을 증명하였다.
방사선 피폭에 의한 간조직의 장해는 경화성 위축으로 복수가 발생하고 황달과 피로감이 수반된다. 이러한 장해에는 간세포의 형태학적 변화가 동반되고 소기관들의 손상이 연관되어 있다. 본 연구는 이러한 소기관들의 형태적 손상을 알아보고자 하였다. 특히 에너지 대사와 관련된 미토콘드리아와 세포질그물 핵막을 중심으로 관찰하였으며, 방사선 방어제 연구와 병행하였다. 방어제는 혈류 증가 작용이 있는 알리인을 투여하였다. 세포 관찰은 투과전자현미경을 활용하였다. 실험결과, 7 Gy 전신 조사에서 간세포의 핵막이 비후되고, 소기관들 주변에 염증성 변화가 관찰되었다. 20일 경과된 세포에서는 과산화소체와 미토콘드리아 막이 손상되었고 세포질에서 공포가 확인되었다. 30일 경과된 세포에서는 거대한 지방세포들이 관찰되었고. 조면소포체에는 리보솜이 분리된 것을 확인하였다. 알리인 투여 후 간세포에서는 핵막 주변에 많은 수의 조면소포체들이 선명하게 관찰되었고 핵막도 비후되지 않았다. 세포질에는 공포화되거나 염증성 증후들이 관찰되지 않았다. 미토콘드리아의 막손상도 없었으며 글리코겐도 정상적으로 확인되었다. 따라서 일부 방어효과가 있는 것으로 확인되었다.
제주땃쥐 (Crocidura dsinezumi)의 정자변태과정은 전자현미경에 의해 조사되어졌으며, 이들 정자변태 과정은 핵의 형태적 특징과 세포질내 소기관의 변화에 기초하여 12기, 14단으로 구분되었다. 골지기$(1{\sim}2)$단의 정자세포의 핵은 모두 구형인데 반해 두모기$(3{\sim}6)$단의 정자세포의 핵은 타원형으로 변하였다. 정자꼬리는 첨체중기에서 생성되었으며, 성숙기에는 가늘고 긴 정자두부를 형성하였다. 정자세포의 두부는 1단에서 6단(골지기${\sim}$두모기)까지는 내강을 향하고 있었으며, 7단부터 14단(첨체기${\sim}$이탈기) 까지는 세정관 상피의 기저막 쪽으로 향하고 있었다. 핵과 첨체는 10단에서 각각 최대로 신장되었다. 염색질은 첨체후기 (10 단)에 응축되기 시작하여 성숙중기(12단)에 완전히 응축되고 균질화 되어졌다. 다포체의 출현은 두모중기(5단)에 첨체포 가까이에서 다포체가 출현하며 두모 후기(6단)에 이르러 골지체 가까이 다수가 관찰되었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때, 정자변태과정은 정자형성세포의 분화 단계를 분석하는데 유용한 정보를 제공해 주리라 여겨진다.
成體 albino 흰쥐를 實驗群과 對照群으로 나누어 對照群에는 0.9% 生理食鹽水를, 實驗群에는 methylene blue(38mg/kg, pH 7.4)를 各各 腹腔에 注射한 後 約 30 分後에 總線量 360 rads의 $^{60}Co-\gamma$ 線을 一時全身照射하였다. 照射後 64時間區 와 212時間區로 나누어서 肝 및 心臟組織을 觀察하였다. 照射直後 肝 및 心臟組織을 6% glutaraldehyde (pH 7.4)와 1% osmium tetroxide (pH 7.4)로 冷室에서 二重固定하였으며 脫水한 後 Epon 812로 胞埋하여 MT-2 Porter Blum ultramicrotome 으로 超薄切斷하여 切片을 만들었다. 이를 uranyl acetate 와 lead citrate 로 二重染色한후 Hi9tachi HU-11 E型 電子顯微鏡으로 觀察하였다. 64時間區의 methylene blue 處理群과 對照群에서 肝組織은 顯著한 組織學的 變化의 差를 나타냈다. 다시 말하면 methylene blue 處理群에 比하여 對照群에서는 mitochondria 의 膨大, cristae 의 切斷, endoplasmic reticulum 의 破壞를 觀察할 수 있었으며 또한 endoplasmic reticulum 에 glycogen 粒子의 蓄積을 觀察할수 있었다. 한편 methylene blue 處理群에 比하여 對照群의 212時間區에서도 같은 變化樣相을 나타냈으나 endoplasmic reticulum 에 많은 vacuole 이 形成되었음을 觀察할 수가 있었다. 그러나 methylene blue 處理群은 正當群($\gamma$ 線의 照射와 methylene blue를 處理하지 않음)에 比하여 若干의 差가 觀察되었을 뿐 顯著한 組織學的變化는 나타나지 않았다. 心臟組織에서는 兩群 卽 實驗群과 正當群사이에 顯著한 差는 別로 觀察할 수 없었으나 methylene blue 群에 比하여 對照群에 若干의 變化가 觀察되었다. 다시말하면 methylene blue 處理群에 比하여 64時間區의 對照群에서는 mitochondria의 若干의 膨大, cristae 에 若干의 切斷을 觀察할수 있었고 212時間區의 對照群에서는 sarcoplasmic reticulum에서 若干의 液胞와 glycogen 粒子의 若干의 增加를 觀察할수 있었다. 이로 미루어 보아 methylene blue 가 放射線에 對하여 防禦 果가 있는 것으로 思料된다.
This study was designed to evaluate the effect of cyclophosphamide(CY) on diethylnitrosamine(DEN)-induced hepatic tumors in rats. Thirty five male or female Sprague Dawley rats were continiously given water containing 0.01% DEN for 10 weeks and then were given with CY 25mg/rat/day in water for 3, 5, 7 or 9 days. The livers of rats were removed and fixed in 10% buffered neutral formalin. he appearances of positive cells by immunohistochemical methods using proliferating cell nuclear antigen (PCNA) antibody, p53 antibody and apoptotic kit were investigated. The livers of rats given with CY were grossly brilliant, red-brown color, flexible, and thin border, and stainability of the liver cells were restored microscopically, and the vaccuolated and degenerated regions were differentiated from restored regions. These restored findings also were advanced in control group because of no DEN treatment but tended to be less avanced. In immunohistochemistry, positive cells to PCNA antibody appeared more numerous in control groups than that of CY treated groups. Appearance of positive cells in CY-treated group for 7 days and for 9 days were more numerous than those of CY-treated groups for 3 days and for 5 days, respectively. So these findings suggested that CY suppressed cell proliferations and effects of these action were decreased with CY-treated days. The numbers of positive cells to PCNA antibody were more prominent in hepatocellular carcinoma regions and cholangiocarcinoma regions, and then were ranked as order of large liver cell regions and normal liver cell regions. Also the numbers of the positive cells by apoptotic kit tended to be higher in hepatocellular carcinoma regions and cholangiocarcinoma regions but not uniformly in order in all regions and were much less numbers than those of PCNA positive cells. So immunohistochemical methods using PCNA antibody together than using apoptotic kit alone when anti-carcinogen experiments. Rats with positive cells by p53 antibody were 11 of 15 rats(73.4%) in control groups and 12 of 18 rats(66.7%) in CY treated group, respectively. These positive cells appeared focally in early vacuole-occurring regions and were very low in numbers.
In this study, an attempt was made to investigate the probable organelles participating in the secretion of biligrafin. The animals (ICR male mice, 25-30gm) were divided into normal control and 6 biligrafin injected groups to which 30% biligrafin (0.006ml/gm b.w.) were injected at 10, 20, 40, 80, 160 and 320 min prior to the sampling. The mice of each group were perfused through the heart with ice-cold 2.5% glutaraldehyde buffered with 0.1M Na-cacodylate (pH. 7.4) under the Na-pentobarbital (Nembtal 0.0015mg/gm b.w.) anesthesia and liver tissues were taken from each group. Some specimens were immersed 1 hr in the same solution used in the perfusion. After an overnight rinse in 0.1M Na-cacodylate buffer containing 10% DMSO and 7.6% sucrose, $75{\mu}m$ fronzen sections were made for cytochemical study. The sections were incubated in thiamin pyrophosphatase (TPPase) and inosine diphosphatase (ID Pase) media for 70 min at $37^{\circ}C$ respectively and acid phosphatase (AcPase) medium for 40 min at $37^{\circ}C$. They were postfixed in 1 % $OsO_4$ for 1 hr. The other specimens were immersed for 8 hrs in the fixative consisting of 2.5% glutaraldehyde and 3.0% paraformaldehyde buffered with Na-cacodylate (pH. 7.4). All of the osmificated specimens were processed for electron microscopy. In both normal and biligrafin injected groups, endoplasmic reticulum (ER), vacuoles, Golgi apparatus and lysosomes were seen in the vicinity of bile canaliculus. In the biligrafin injected groups, however, the Golgi apparatus appeared to be decreased and ER and vacuoles were dilated and increased. The rough endoplasmic reticulum (RER) having a few attached ribosomes appeared to be the round saccule, especially at 20 min after biligrafin injection. Smooth endoplasmic reticulum (SER) seemed to be formed by the detachment of ribosomes at the cisternal end of RER. The cistern of SER showed saccules which probably budded off to form the vacuole. The vacuoles were devoid of visible centents. This finding seemed to be in agreement with the biochemical property of the bile constituents. The fusion between the vacuoles and bile canaliculus were frequently seen in the groups injected with biligrafin. The lysosome did not show any changes in the biligrafin injected groups. Accumulation of some material and lipid droplets were seen at the 40 and 80 min after biligrafin injection, especially at the latter. At 160 and 320 min after biligrafin injections, however, they were decreased successively while the RER stack, free ribosomes and polysomes were increased. Although the reactive products of TPPase and IDPase were observed in the ER saccules and vesicles of the normal control and biligrafin injected groups, the fusion between the bile canaliculus and saccules or vesicles could easily be seen in the latter. The AcPase activity, however, was observed in the cistern at the maturing face of Golgi apparatus and lysosomes in both normal and biligrafin groups. The results suggest that the biligrafin is excreted via the vesicles, vacuoles or sacoules probably derived from the SER without the participation of Golgi apparatus and lysosomes, and the excess amount of material is stored as inclusions during the repairing of the organelles being overactive.
For better understanding the interrelationship of hemorrhage and aggregation mechanism, cyclopiazonic acid(CPA) known as promoting the aggregation of platelet, aflatoxin $B_1(AFB_1)$ inhibiting platelet aggregation were used as toxic mycotoxins in these studies. In order to investigate the potential role of prostaglandin metabolism on the platelet aggregation, a variety of prostaglandin metabolites such as $PGF_{2{\alpha}}$, $PGE_2$ and $TXB_2$ were measured in homogenized rabbit platelets by TLC and LSC. And the role of $Ca^{{+}{+}}$ on the platelet aggregation was investigated by flow cytometer. Finally, the morphological effects of mycotoxins on platelet were determined by transmission electron microscope. The results and conclusions obtained from these studies are: 1) CPA induced no changes but $AFB_1$ increased $PGE_2$ and $TXB_2$. 2) CPA promoted ADP, collagen, thrombin, A.A., and PAF-induced $Ca^{{+}{+}}$ release. $AFB_1$, however, decreased $Ca^{{+}{+}}$ level except collagen-induced $Ca^{{+}{+}}$ release. When the calcium blocker, verapamil, was used, CPA decreased thrombin-induced $Ca^{{+}{+}}$ release and increased collagen, ADP, PAF and A.A.-induced $Ca^{{+}{+}}$ release. $AFB_1$ in contrast decreased the all factors induced $Ca^{{+}{+}}$ release. 3) $AFB_1$ did not induce any ultrastructural changes except large vacuole formation in a few platelets. And CPA also did not induce any changes except moderate shape change, indicator of platelet activation. In conclusion, CPA promoted platelet aggregation by the increases of $Ca^{{+}{+}}$ release but had no changes in A.A. metabolites. Antiaggregating effects of $AFB_1$ may be due to decreases of $Ca^{{+}{+}}$ release and increases of $PGE_2$ and $PGF_{2{\alpha}}$ formation. These data provide the basis for the future study of mobilization and function of $Ca^{{+}{+}}$ in platelet aggregation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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