Maximum specific pro-UK production rate was achieved at 15 mllmin of perfusion rate as $5.7 \times 10^{-8}$$\mu g$/h/cell by cytostatic cultivation of human cell line 579 with DMEM and 590 FBS. As perfusion rates were increased, glutamine uptake rates were also increased but ammonium production rates remained relatively constant, which resulted in low ratio of ammonium to glutamine at high perfusion rate. Partially it quantitatively explains why the productivity is increased in perfusion cultivations. At maintenance period of 15 days by controlling metabolic process, such as 5 mM of glucose, 2 mM of gtutamine, 10% of air saturation and pH 6.2, high speecific product production rate and product yield on substrate were obtained as $12\times 10^{-8}$$\mu g$/h/cell abd 0.226 mglg of glucose, respetively. This product yield corresponds to 0.223 mg/day of productivity at 10 mllmin of perfusion rate.
We synthesized HPP-g-GMA copolymer using pre-irradiation method by E-beam and aminated HPP-g-GMA using amination reaction. Degree of grafting increased with increasing GMA monomer concentration and showed the maximum value of 130% at 1.46 M of GMA. The degree of amination increased with increasing the degree of grafting. When the degree of grafting was 100%, degree of amination showed the maximum value of 37.4%. The ion exchange capacity of aminated HPP-g-GMA was about 3.78 meq/g, and it showed remarkable adsorption ability of hollow fiber ion exchanger. Through the BET analysis, the surface area of aminated HPP-g-GMA was 54.83 $\m^2/g$ and the mean pore size was $26\AA$. These showed the decrease of surface area and the slight increase of the mean pore size. SEM results show that the thickness of fiber increased after the step of reaction and there pore blocking phenomena was not observed. The aminated HPP-g-GMA was synthesized successfully and found to be suitable for the adsorption and separation of anion.
Although the incidence of pulmonary tuberculosis is declining, the number of extrapulmonary tuberculosis has remained constant. Tuberculous Lymphadenitis accounts for over 50% of total inflammatory lymphadenitis and the most common site is cervical lymph node. We report a case of single cervical tuberculous cold abscess associated with multiloculated and septated tuberculous pleurisy. Intracavitary urokinase instillation via percutaneous catheter is indicated in loculated and septated pleural effusion. And our result was satisfactory without complication.
The high-level expression of a human single chain urokinase-type plasminogen activator (scu-PA) was achieved by employing a methotrexate (MTX)-dependent gene amplification system in Chinese hamster ovary (CHO) cells. By cotransfecting and coamplifying a scu-PA expression plasmid and dihydrofolate reductase (DHFR) minigene, several scu-PA expressing CHO cell lines were selected and gene-amplified. These recombinant cell lines, NGpUKs, secreted a completely processed scu-PA of 54 kD and up to 60mg/L was accumulated in the culture medium when they were adapted to an optimal MTX concentration. Over 95% of the scu-PA expressed was secreted in the culture medium and identified having the proper function of a plasminogen activator when activated by plasmin. Based on a genomic Southern analysis, a representative subclone, MGpUK-5, exhibited MTX-dependent scu-PA gene amplification, plus the initial single-copy gene of scu-PA eventually turned into about 150 copies of the amplified gene of scu-PA after gradual adaptation to 2.0$\mu$M of MTX. Meanwhile, the transcripts kof the scu-PA gene increased, although -early saturation of transcription was identified at 0.1$\mu$M of MTX. The scu-PA production by the MGpUK-5 subclone also increased relative to the gene amplification and increased transcripts, however, the relationship was not linearly proportional. Accordingly, since the MGpUK cell lines expressed elevated levels of enzymatically active scu-PA, these cell lines could be applied to the largescale production of scu-PA.
Chunkookjang, fermented soybean is rich in diverse oligopeptides which derived from cleavage of soybean proteins during fermentation. Microarray data containing differently expressed genes in breast cancer cells treated with fermented soybean extract and well known breast cancer metastasis markers were combined, and a new network was constructed. It is used to check interactions between the marker proteins and the differently expressed genes. Based on the network analysis, PLAU (plasminogen activator, urokinase, uPA) and ERBB2 (epidermal growth factor receptor 2) are chosen as possible metastasis genes. We treated breast cancer MCF7 cells with fermented soybean extract and measured expression levels of PLAU and ERBB2. Fermented soybean extract suppressed PLAU and ERBB2 expressions conspicuously. In the cancer cells treated with fermented soybean extracts, an inflammation marker, NO production was also reduced. It will be interesting to find specific peptides to suppress PLAU and ERBB2 expressions in human breast cancer cells.
Kim Yong Gil;Lee Kyung Hee;Kim Min Kyung;Lee Jae Lyun;Hyun Myung Sue;Kim Sang Hun;Kim Hee Sun
Journal of Gastric Cancer
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v.4
no.4
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pp.207-212
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2004
Purpose: Invasion and metastasis in solid tumors require the action of tumor-associated proteases. The serine protease urokinase-type plasminogen (uPA) and receptor (uPAR) appear to have a major function in these processes. Expression of the uPAR is elevated in breast and colon carcinomas, and this is often associated with invasiveness and poor prognosis. The purpose of this study was to determine whether the expression of the uPAR gene correlates with clinico-pathological parameters in human gastric carcinomas. Materials and Methods: We examined the expression of uPAR mRNA by using northern blot analysis and RT-PCR in 35 gastric carcinomas and the surrounding normal mucosa. Macroscopic and histopathological tumor findings and survival rates were obtained from the patient records and from endoscopic, surgical, and pathological reports. Results: The expression of uPAR and was higher in most neoplasms than in the corresponding normal mucosal tissue. uPAR mRNA expression in tumors correlated well with lymph-node metastasis (P<0.02) and tumor stage (P<0.01). The survival rate of patients with tumors displaying high uPAR expression levels was significantly lower (P<0.04) than that of patients without uPAR expression, but IL-8 showed only the tendency of survival difference. Conclusion: These results suggest that uPAR may be an important prognostic factor in human gastric carcinomas.
The purpose of this study was to investigate the characteristics of preschoolers' giftedness by their parents' perception. Total 3 groups of 148 subjects from age 30 months to 6 years 10 months old young gifted children's parents participated. The major findings were as follows : (1) There were critical characteristics of preschoolers' giftedness by parents' perception, which were 'good memory', 'high curiosity', 'read and understand of math', 'enjoy of learning and high motivation', 'high concentration', reading books', 'verbal ability', 'creativity', 'questions', and 'independency', (2) These characteristics of preschoolers' giftedness showed more strong and intense as they got older, and (3) Some characteristics revealed more, but the other characteristics revealed less as they got older. These findings suggested the consideration of child's age as the reliable identification process of young gifted children.
Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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1997.05a
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pp.57-60
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1997
Aloe의 추출 시료들 중 혈관생성을 촉진하는 물질이 G1M1D1M1 분획에 있음을 chorioallantoic-membrane(CAM) assay, in vitro angiogenesis assay, u-PA, PAI, u-PAR, 및 matrix metalloprotease(MMP)의 유전자 발현조사, gelatin zymogram assay, modified CAM assay를 하여 확인 하였다. 그런 다음 G1M1D1M1 분획을 다시 분리하여 단일 성분인 NY932와 3종의 분획들을(U>3,000, 3,000>U>1,000, U<1,000) 얻었다. 이들 각각에 대한 혈관 생성 촉진 작용을 CAM assay 방법으로 조사한 결과 순수단일 성분인NY932가 혈관 생성 촉진 활성을 가장 높게 나타났다. 즉 NY932의 농도를 100ng, 2, 10, 35, 60 $\mu$g으로 투여하였을 때, 각각 2/18($11\%$), 4/10($49\%$), 16/22($73\%$), 15/17($88\%$), 9/9($100\%$)의 혈관생성 촉진 효과를 보였다. 따라서 순수 단일 성분인 NY932의 혈관 생성 촉진 작용기전을 규명하기 위하여 혈관 생성에 관련된 효소들[matrix metalloprotease(MMP)s, urokinase-plasminogen activator(uPA) 등]과 그 저해제들(TIMPs, PAI)의 유전자 발현을 조사하였으며, wounding migration assay등을 수행하였다.
The production of fibrinolytic enzyme from Bacillus subtilis BK-17 was studied in the shake flask cultures. The important medium components studied include nitrogen source, carbon source and inorganic salts. The environmental conditions include initial pH, temperature, shaking speed and working volume. Among various N-sources, C-sources and inorganic salts tested, soybean flour, D-glucose and Na2HPO4 gave the best results, and their optimal concentrations were 1.5%, 0.5% and 0.05%, respectively. The optimal pH and temperature were 9.0 and 37$^{\circ}C$. With decreasing working volume in the range of 25∼100ml in the 250ml flask or increasing shaking speed in the range of 100∼300rpm, the enzyme production was greatly enhanced. The enzyme activity under the optimal conditions was about 1400I.U./ml with urokinase as a standard.
Prosthetic valve thrombosis is rare but it is one of fatal complication after heart valve surgery. Improvements of the valve design and the material have decreased the frequency of thrombosis but have not eliminated completely. And some cases of prosthetic valve thrombosis during pregnancy were reported inspite of adequate anticoagulation therapy.Urgent surgical intervention is indicated for prosthetic valve thrombosis but it is associated with high operative risk, therefore medical thrombolytic therapy such as urokinase or streptokinase therapy is regarded as an alternative therapy. This is a case report of the successful thrombolytic therapy for valve thrombosis in a pregnant patient after mechanical mitral valve replacement.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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