• KSBB Journal
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• 제14권6호
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• pp.724-730
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• 1999

본 연구에서는 인뇨에서 분리 정제한 urokinase와 유전자 재조합 CHO(Chinese Hamster Ovary) 세포 배양액으로부터 분리 정제한 pro-urokinase의 물리화학적 특성과 혈액 내에서의 효소활성을 비교 분석하였다. Two chain form인 urokinase와 single chain form인 pro-urokinase를 각각 순수 분리한 후, electrophoresis한 결과 모두 54 kd의 단일밴드를 나타냈다. 그러나 urokinase는 환원시켰을 때 33 kd과 21 kd으로 나누어짐을 확인하였으나 gel filtration결과 분자량이 54 kd 정도임을 확인되어 용액 내에서 단일분자로 존재함을 알 수 있었다. Urokinase와 pro-urokinase가 물리화학적으로 거의 동일한 구조를 가졌다는 사실은 isoelectro focusing에 의한 pI 값이 모두 8.6으로 동일하다는 점과, 아미노산 조성을 분석한 결과 동일하다는 사실로도 알 수 있었다. N-terminal 아미노산 서열을 분석한 결과, urokinase는 이중사슬구조이므로 N-terminal이 두개 존재하여 pro-urokinase의 서열(Ser-Asn-Glu-Leu-His-Gln-Val-Pro-Ser-Asn)이외에도, 159번째의 Ile다음부터 Ile-Gly-Gly-Glu-Phe-Thr-Thr-Ile-Glu가 같은 peak로 나타남을 확인하였다. 효소활성 조사결과 pro-urokinase와 urokinase는 모두 농도 의존적으로 혈전용해 활성을 보였으나, 특이하게도 짧은 반응시간동안에는 urokinase가 동일 농도 하에서 강한 활성을 보인 반면, 2시간이 지난 오랜 반응조건에서는 pro-urokinase가 혈전용해활성을 나타내었다. Fibrinogen에 대한 분해활성을 조사한 결과, urokinase는 혈장 내 fibrinogen을 상당히 손상시키지만, pro-urokinase는 거의 영향을 주지 않아 혈전선택성이 매우 좋음을 알 수 있었다.

• KSBB Journal
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• 제5권2호
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• pp.183-189
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• 1990

1,000l 규모의 인뇨로부터 순수한 urokinase를 정제하는 새로운 공정이 고안되었다. 2가 금속이온인 아연을 첨가하여 선택적으로 urokinase를 침전시켰으며, 이 방법은 뇨 중에 포함된 다른 단백질을 100~1,000배 농축할때도 사용할 수 있으며 10~20배의 경제효과를 얻었다. 침전물 속에 포함된 urokinate를 경제적으로 용출할기 위하여 0.1M EDTA/0.5M glycine, pH 9.0용액이 조성되었고, 용출액속에 포함된 높은 농도의 salt와 ion,뇨색소 등이 CM-Toyopeal column에 의해 신속하고 효과적으로 제거되었다. 최종적으로 사용된 benzamidine-Sepharose chromatog-raphy는 urokinase 정졔에 매우 효과적이었다. 이상의 공정을 통해, 1,000liter의 인뇨로부터 3$\times$$O^6IO$의 urokinase가 순수 정제 되었으며, 수욜은 약 50%, 정제도는 1,300배이었다. 또한 urokinase중에 12~14%의 pro-urokinase가 함유되어 있음이 확인되었다.

• Archives of Reconstructive Microsurgery
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• 제3권1호
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• pp.40-44
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• 1994

Microsurgery has advanced beyond its nascent stages reaching success rates of 90% to 95%. However, this means that even in the best circumstances, 5% to 10% of free flaps and replants fail. Almost all failures are due to vessel thrombosis, resulting in ischemia of the transplanted tissue. Many attemps have been undertaken to treat and reverse its effects. Zdeblick and colleagues noted an improvement in the viability of amputated limbs replanted after an extended period of ischemia following intraarterial infusion of urokinase. Subsequent studies have investigated many modalities of urokinase administration in various animal models by differing ischemic periods. These studies, however, have failed to establish a definitive, generally accepted protocol for administration of urokinase in the salvage of tissue subjected to prolonged ischemia. Our clinical observations suggest that a bolus of urokinase delivered under pressure may increase the thromoblytic effect of the drug, probably by means of increased delivery to microvasculature. We intend to investigate the role of selective pressure perfusion of ischemic flaps as a new means for increasing the effectiveness of urokinase in the treatment of the "no-reflow" phenomenon. A total of 32 male New Zealand rabbits were used and divided into the four groups according to the method of infusion. After 12 hours of ischemia the flaps were injected with Hartmann's solution or with urokinase and the percent survival of the flap was determined at 7 days following flap reperfusion. As the result, the flap survival rate was highest in the pressure injection of urokinase group.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제43권5호
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• pp.683-692
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• 1996

연구배경: 결핵성 흉막염 환자의 일부에서 소방이 형성된 경우는 흉막액의 섬유화나 흉막의 비후가 일어나 폐기능의 장애가 초래되나 치료에 대해서는 논란이 많은 실정이다. 최근에는 농흉환자에서 흉막강내 섬유소를 용해하는 방법으로 혈전 용해제를 흉막강내에 주입하여 섬유소 융해효과를 관찰해 좋은 결과를 확인한 바 있다. 본 연구는 결핵성 흉막 질환에서 소방이 형성된 정도에 따라 반복적 흉막천자, 경피적 도관솔 및 경피적 도관술을 통한 흉막강내 urokinase를 주입하여 배액하는 방법에 따른 치료 효과를 전향적으로 비교하였다. 방법: 흉부 초음파상에 다발성 소방이 형성된 결핵성 흉막염 환자 총 48명을 대상으로 control군, catheter군, urokinase군으로 구별하였다. 소방의 정도는 흉부 초음파로 선상, 중정도, 벌집 모양형으로 나누었다. 초기 치료 효과와 장기적 효과를 단순 흉부 x-선의 호전 정도를 각 군간에 비교하였다. 결과: 치료 초기 효과를 각 군간에 비교하였을 때 흉막 천자의 횟수, 배액 기간 중의 도관의 폐쇄 횟수와 도관을 삽입하고 있는 기간은 urokinase군에서 의미 있게 적었다. 총 배액양은 control군과 urokinase군에 비하여 catheter군에서 양이 많았다. 단순 흉부 X 선상의 치료 효과 초기의 단순 흉부 방사선의 변화는 urokinase군이 가장 호전되었으며, 장기적인 단순 흉부 방사선상의 변화는 각 군간에 차이가 없었다. 그러나 comrol군 13명중 4명이 흉막 유착으로 수술을 받았으며, catheter군 12명중 1명이 합병증으로 인한 농흉으로 수술을 받았으나, urokinase군은 수술 받은 자가 없었다. 격막의 정도에 따른 각 군의 방사선학적 효과는 격막이 선상으로 형성된 결핵성 흉막염에서 단순 흉부 방사선상의 변화는 각 군 사이에 유의한 차이가 없었으나 벌집 모양의 격막이 형성된 경우의 단순 흉부 방사선상의 변화는 각 군 사이에 유의한 차이가 없지만 control 군의 경우 치료 실패로 인해 초기에 1명, 추적 관찰하면서 3명이 수술로 호전되어 사실상 catheter군과 urokinase군에 비하여 현저한 차이를 보였고(P<0.01), catheter군과 urokinase군 사이에는 유의한 차이가 없었다. 결론: 이상의 결과로 urokinase를 사용한 군이 경피적 도관을 시행한 군보다 흉막 천자 횟수, 도관의 기간, 도관의 폐쇄 등의 초기 치료 효과는 효과적이나, 단순 흉부 X-선으로 비교한 장기적 치료 효과적 측면에서는 차이가 없었다. 소방이 형성된 결핵성 흉막염에 대한 urokinase의 흉강내 투여는 urokinse의 가격 등을 고려하여 사용하여야 할 것으로 생각된다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제45권11호
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• pp.1397-1402
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• 2002

목 적 : 대퇴동맥 혈전증은 하지 절단같은 극단적인 재앙뿐만 아니라 하지의 성장 장애를 초래할 수 있는 심도자술의 심각한 합병증이지만, 소아에서 이에 대한 표준적 치료법은 아직 정립되지 못한 상태이다. 저자는 심도자술후 발생한 대퇴동맥 혈전증에서 urokinase의 동맥내 국소 주입요법의 유용성을 검토하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법 : 1994년 1월부터 2002년 8월까지 심도자술 후 발생한 대퇴동맥 혈전증으로 동아대학교병원 소아과에서 동맥내 urokinase 국소 주입법을 이용해 혈전용해술을 받은 9명, 12례를 대상으로 하여, 병력지와 혈관조영 소견을 후향적으로 분석하였다. 결 과 : 1) 대퇴동맥을 이용한 심도자술이 행해진 391례 중 전신적 헤파린 또는 urokinase에 반응을 보이지 않았던 대퇴동맥 혈전증의 발생빈도는 2.8퍼센트였다. 2) 대상 환아들의 연령은 기하평균 5.8개월(1-71개월)이었고 체중은 $8.5{\pm}4.6kg$(3.5-20.5 kg)였다. 3) Urokinase는 1,000-4,400 unit/kg/hr로 $50.6{\pm}29.2$시간(18-110시간)에 걸쳐 주입하였는데, 치료중 2례에서 환측의 천자부위로 출혈이 있었으며, 한명은 수혈이 필요했다. 심도자술후 4일 이내에 치료를 시작했던 환아들은 모두 혈전의 완전 소실을 보였다. 혈전 형성후 각각 12일과 19일째 치료를 시작했던 2례는 호전되지 않아 풍선 혈관성형술을 실시하였는데 부분적으로 도움이 되었다. 결 론: 심도자술후 발생한 대퇴동맥 혈전증에서, 전신적 혈전용해제 투여로 회복되지 않으면, 반대측 대퇴동맥을 통한 국소적 동맥내 혈전용해제 투여를 조기에 시행하는 것이 효과적이다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제84권2호
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• pp.134-139
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• 2021

Background: Intrapleural urokinase is one of the most widely used fibrinolytic agents in the treatment of complicated parapneumonic effusion (CPPE). However, little research has been performed on the optimal urokinase dosage. The aim of this study was to evaluate the treatment efficacy of half dose urokinase compared with conventional dose urokinase. Methods: We retrospectively enrolled 92 patients with CPPE or empyema who underwent intrapleural urokinase treatment at two tertiary hospitals. Patients received antibiotics, chest tube drainage, and other treatments as part of routine care. The primary outcome was the treatment success rate in the half dose urokinase group (50,000 IU daily for maximal 6 days) and the conventional dose urokinase group (100,000 IU daily). Treatment success was defined as clinical and radiological improvements without surgical treatment or re-admission within one month. Results: Forty-four patients received half dose urokinase, whereas 48 patients were treated with conventional dose urokinase. Both groups were relatively well matched at baseline, excluding higher serum white blood cell count and higher empyema prevalence in the half dose urokinase group. The treatment success rate was not different between the two groups (p=0.048). There were no differences in the rate of in-hospital death and surgical treatment, hospitalization duration, and indwelling catheter duration. In the multivariate analysis, urokinase dose was not a predictor of treatment success. Conclusion: Half dose intrapleural urokinase is equally effective conventional dose urokinase in treating patients with CPPE or empyema.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제6권4호
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• pp.210-214
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• 1985

Urokinase, a plasminogen activator, was conjugated with dextran by the cyanogen bromide activation-coupling method. The resulting water-soluble conjugate was purified by gel permeation chromatography on Sephadex G-200. The maximal activity was obtained when the ratio of urokinase/dextran was 1/20 for the coupling. The final preparation showed 5 CTA units/mg conjugate, 300 CTA units/mg protein, 8.4 % activity retention, and 47 % protein retention. The urokinase-dextran conjugate had good thermal, pH and storage stabilities. In addition, it showed greater resistance to the inhibitory effect of human plasma than native urokinase. Also in vitro biological half-life of urokinase increased 40 times by this conjugation. In view of activity, excellent stability and increased half-life, the conjugate can be a potential fibrinolytic agent in an injectable form.

• KSBB Journal
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• 제16권5호
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• pp.500-504
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• 2001

Sepharose CL-6B 의 기능기를 aldehyderl로 활성화시킨 후 urokinase와 공유결합 시켜 고정화하는 방법을 6mL 규모에서 250 mL 규모로 스케일업한 결과 고정화 수율 및 고정화 된 UK에 의한 절단반응 수율 등에서 스케일업 전후의 결과에 차이가 없었다. 따라서 위의 고정화 방법의 scale-up 효능은 매우 우수한 것으로 나타났다. hGH와 GST 절편으로 구성된 융합 단백질의 고정화 UK 컬럼에 의한 절단 반응 후 용출액의 pH를 3.5로 낮춤으로써 이물질들을 침전시키고 이를 expanded bed chromatography zf칼럼에 통과시킨 결과, 이 물질들의 제거와 hGH 단량체의 흡착분리가 동시에 이루어졌다. 흡착된 단량체는 NaCL에의해 용출되었으며 이 단계의 수율은 거의 100%이었다. 따라서 칼럼에 의한 절단 반응과 t산 침전에 의한 이물질 침전 바능, EBA에 의한 이물질 제거 및 단량체 회수 반응을 연속적으로 진행할 수 있는 기초를 제시하였다. 또한 고정화된 UK는 guanidine HCl(6 M)을 이용하여 unfolding 시키고 이를 세적하여 refolding 시킨 결과 20회의 반복적인 처리 후에도 초기 활성의 약 80% 수준을 유지하였다. 이는 UK 가 공유결합된 상태에서 solid-phase refolding이 가능하다는 증거이며, 고정화 효소 칼럼의 수명을 크게 향상시켜 경제성을 확보하는 방안으로 이용될 것으로 기대된다.

• 한국임상약학회지
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• 제2권1호
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• pp.1-9
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• 1992

Protective effect of urokinase on reperfusion were studied followed by global ischemia in the isolated perfused rat heart. Separately, anti-platelet aggregation effect of urokinase also investigated. Urokinase exhibited positive effect for the protection of rat heart function by increasing the LV dp/dt, coronary flow(CF) and the Tate pressure product(RPP), and by decreasing the LVEDP on reperfusion. Urokinase also decreased arrhythmia by $74.7\%(P<0.05) induced by global ischemia in the rat heart. In the platelet aggregation study, urokinase did not show the inhibitory effect of ADP or collagen induced platelet aggregation inviuo and exvivo.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제32권1호
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• pp.8-12
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• 2015

Background: Enlargement of subdural hematomas is relatively rapid in subacute stage of hematoma with clinical deterioration, which eventually necessitates surgery. The purpose of this study is to investigate the feasibility and safety of burr hole drainage using urokinase for management of patients with subacute subdural hematoma (SASDH). Methods: Nine patients with SASDH were treated by burr hole drainage using urokinase. Under local anesthesia a catheter was inserted into the hematoma through a burr hole. Burr hole drainage was followed by hematoma thrombolysis with instillation of urokinase (10,000 units) every 12 hours. Drainage was discontinued when a significant decrease of hematoma was observed on cranial computed tomography. Results: The patients' median age was 70 years (range, 62-87). The median Glasgow Coma Scale score before surgery was 15 (range, 11-15). Drainage was successfully performed in all patients. All patients had Glasgow Outcome Scale scores of 5 at discharge. There was no surgery-related morbidity or mortality. Conclusion: A burr hole drainage using urokinase could be a safe, feasible and effective minimally invasive method with low morbidity in treatment of selected patients with SASDHs.