Numerous factors concern with the absorption of substances through the membrane of the gastrointestinal tract. To simplify the experimental condition, present work has been restricted to observe the disappearance rate of substance from the intestinal loop which was made in the jejunum, 70 cm apart from the pylorus of the adult rabbit. The purpose of the study is to clarify the absorption of urea through the jejunal wall is solely attributable to the concentration difference between the luminal fluid and plasma, and to observe the effect of adding red pepper upon the rate of absorption. The rabbits were anesthetized with nembutal, 35mg/kg I.V. Jejunal loop was made by ligating at 2 spots, 70 cm and 80cm apart from the pylorus. After rinsing with normal saline solution through the polyethylene tubing inserted from the end of the loop, 8 ml of test solution was placed through the same tubing. The test solution contained 200 mg% of urea and 150mg% of polyethylene glycol(M.W. 4,000) in normal saline solution. Right after placing the test solution the first specimen was taken through the tubing, and successive samplings were performed at 5, 10, 20, and 30 minutes. Logarithm of the difference of urea concentration between the luminal fluid and plasma was plotted against time elapsed after the onset of the experiment. If straight line is revealed, it would verify the nature of transport mechanism as diffusion, obeying the Fick's principle. The concentration of polyethylene glycol (PEG) was also measured in order to examine the change in the volume. PEG was used as the marker substance because it is not absorbable in the intestinal tract. Consequently the concentration of PEG relates inversely to the volume of the loop. Instantaneous concentration of urea in the loop times the volume will give the amount of urea remaining in the luminal fluid. The change in the amount of any substance is directly relate to the volume of the compartment and differs from the change in the concentration which is independent of the volume. After completion of the experiment without red pepper, it was added in the test solution and was centrifuged after thorough mixing. Supernatant of the mixture was placed in the loop and similar sampling were performed with the same time intervals that of previous run in order to observe the effects of the red pepper on the passive transport of the water soluble small substance, urea. The results obtained were as follows: 1. Logarithm of the concentration difference of urea between the luminal fluid and plasma was diminished exponentially as time elapsed. The decay constant in the experiment without red pepper was 0.0563/min. By adding red pepper in the test solution as much as the concentration rose to 4,000 mg% and 8,000 mg%, the decay constants were lowered to 0.0493/min and to 0.0506/min, respectively. The time interval by which the concentration difference dropped to one half of the initial value was prolonged. Without red pepper the half concentration time was 13.30 minutes, and by adding extract of red pepper, 15.31 minutes and 15.71 minutes were revealed. 2. The profile of the diminishing rate of tile amount of urea was quite different from that of the concentration because of the change in the volume of the loop during the observed period. 3. By adding the extract of red pepper, it slowed down the rate of absorption of urea in the intestinal loop, suggesting an increase in the diffusional barrier. 4. Larger dosage of red pepper brought an increase in the secretion of intestinal fluid with concomitant expansion of the luminal volume, and the retardation of the absorption of urea was noticed. This effect was largely dependent on the sensitivity of the individual animal to the red pepper, extract. The amount of urea remained after 10 minutes interval was 55.5% of the initial amount in the experiment without red pepper. On the other hand it was not consistent after administration of red pepper, showing 50.6% and 66.5% of the initial figures by adding 400 mg and 800 mg of red pepper in the test solution, respectively. It was postulated that symptom of diarrhea often encountered by taking a hot (red pepper) food might be attributable to the increase of secretion and the retardation of absorption in the intestinal tract.
A variety of stem cells has been emerging as therapeutic cells that can replace organ transplantation in human liver diseases. The present study focused on whether human eyelid adipose-derived stem cells (HAD) might differentiate into functional hepatocyte-like cells in vitro. HAD were isolated from human eyelid adipose tissue. Effect of dimethyl sulfoxide (DMSO), fibroblast growth factor (FGF)-2 and FGF-4 on the hepatic differentiation of HAD have been examined in vitro. Immunocytochemical analysis and PAS staining showed that HAD cultured in both DMSO and FGF-4 exhibited the most intense staining than HAD of the other experimental groups. These HAD expressed numerous hepatocyte-related genes. Immunoblotting analyses showed that HAD cultured in the presence of DMSO and FGF-4 secreted higher amount of human albumin than HAD cultured in other conditions. Urea analysis also demonstrated that these HAD produced higher amount of urea than any other groups of HAD. In conclusion, combined treatment of DMSO and FGF-4 could effectively induce the functional differentiation of HAD into hepatocyte-like cells.
Kume, S.;Numata, K.;Takeya, Y;Miyagawa, Y;Ikeda, S.;Kitagawa, M.;Nonaka, K.;Oshita, T.;Kozakai, T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제21권8호
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pp.1159-1163
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2008
Data of 42 balance measurements from dry and lactating Holstein cows and blood and urine samples from 24 Japanese Black cows were collected to evaluate the potential for predicting urinary nitrogen (N) excretion from plasma urea nitrogen (PUN). Similar positive correlations were obtained between N intake and apparent N absorption in dry and lactating cows. The regression equations of N intake on urinary N excretion varied in dry and lactating cows, and the difference of urinary N excretion between dry and lactating cows was due to the N secretion into milk. Highly positive correlations were observed between urinary N contents and urinary urea N in Japanese Black cows, and urinary urea N increased with increasing PUN. There were positive correlations between N intake and PUN in dry and lactating cows, but PUN and urinary N excretion in lactating cows were higher than in dry cows. There were positive correlations between PUN and urinary N excretion per BW in dry and lactating cows. Although urinary N excretion could be calculated as (N clearance rate of kidneys)PUNBW, high N clearance rate of kidneys, such as 2.08 L/d/kg BW, may be suitable to calculate urinary N excretion in lactating cows, compared with 1.33 L/d/kg BW in dry cows.
This study was conducted with adult cockerels to determine whether dietary RNA affects feed intake and renal weight and function, and if the responses are similar to dietary adenine. Chickens were ad libitum fed a RNA diet (100 g/kg) or an adenine diet (9.1 g/kg) for 14 d and catheterized in right jugular vein, hepatic portal vein and both urethers, and saline together with para-amino hippuric acid and sodium thiosulfate was continuously infused into them to evaluate renal functions. Dietary RNA reduced feed intake and body weight, and dietary adenine increased kidney weight expressed as a proportion of body weight (P < 0.05). Feed intake and body weight on the adenine diet and kidney weight on the RNA diet showed similar though non significant tendencies. No calculi were detected in the kidney in chickens fed either the RNA or adenine diets. Plasma inorganic phosphate (IP), Ca and 1,25 $(OH)_2$ vitamin $D_3$ concentrations were increased by dietary RNA and adenine, although the increases of IP and Ca in adenine-fed chickens were not significant. Uric acid and urea concentrations in the blood plasma were unaffected by dietary RNA or adenine. Both dietary RNA and adenine increased renal blood flow rates 3.5-3.7 fold, renal plasma flow rates 3.4-3.7 fold and glomerular filtration rates (GFR) 2.9-3.0 fold (p < 0.01). Clearance of urea, IP and Ca were also enhanced by dietary RNA, but not by dietary adenine. However, neither RNA nor adenine affected uric acid clearance. Only IP clearance was significantly augmented at the glomerular level by dietary RNA (p < 0.05). Glomerular filtration of uric acid, urea, IP and Ca and reabsorption of urea, IP and Ca at the renal tubule were increased by dietary RNA and adenine (p < 0.05), whereas tubular secretion of uric acid was decreased by both dietary treatments. It is concluded that dietary adenine is effective in changing renal function and P and Ca metabolism in chickens.
An extremely thermostable xylanase gene, xynB, from the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritima MSB8 was successful expressed in Kluyveromyces lactis. The response surface methodology (RSM) was also applied to optimize the medium components for the production of XynB secreted by the recombinant K. lactis. The secretion level (102 mg/l) and enzyme activity (49 U/ml) of XynB in the optimized medium (yeast extract, lactose, and urea; YLU) were much higher than those (56 mg/l, 16 U/ml) in the original medium (yeast extract, lactose, and peptone; YLP). The secretory efficiency of mature XynB was also improved when using the YLU medium. When the mRNA levels of 13 characterized secretion-related genes in the K. lactis cultured in YLP and YLU were detected using a semiquantitative RT-PCR method, the unfolded protein response (UPR)-related genes, including ero1, hac1, and kar2, were found to be up-regulated in the K. lactis cultured in YLU. Therefore, the nutrient ingredients, especially the nitrogen source, were shown to have a significant influence on the XynB secretory efficiency of the host K. lactis.
LEE , JI-HYUN;LEE, DOO-HOON;SON, JEONG-HWA;PARK, JUNG-KEUG;KIM, SUNG-KOO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권1호
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pp.7-13
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2005
Chitosan-alginate capsules were formed by electrostatic interactions and exhibited an appropriate mechanical strength, permeability, and stability for the culture of hepatocytes. Pig hepatocytes were isolated and hepatocyte spheroids formed and immobilized in chitosan-alginate capsules. An encapsulation procedure of 3 min and spheroid formation period of 24 h were the optimum conditions for the best liver functions. Pig hepatocytes with a cell density of $6.0{\tomes}10^6$ cells/ml in the capsules were found to be most suitable for application in a bioartificial liver support system. The encapsulated pig hepatocyte spheroids exhibited stable ammonia removal and urea secretion rates in a bioreactor for 2 weeks. Accordingly, chitosan-alginate encapsulated hepatocyte spheroids in a packed-bed bioreactor would appear to have potential as a bioartificial liver.
Objectives: Indongdeungjikolpi-tang(IJT) is used as a traditional treatment of diabetes in oriental clinincs. This study aimed to evaluate the anti-diabetic effect of Indongdeungjikolpi-tang(IJT) in streptozotocin(STZ)-induced diabetic rats. Methods: Diabetes was induced by intraperitoneal injection of streptozotocin(STZ; 60 mg/kg BW) to Sprague-Dawley male rats. Experimental animals(six per group), were treated by oral administration of IJT(100 and 500 mg/kg BW) and glibendimide(3 mg/kg), a known antidiabetic drug for comparison, during 4 weeks. We measured the levels of glucose, insuline, triglyceride, creatinine and urea in sera of each group. An oral glucose tolerance test(OGTT) was also performed in all groups. Results: IJT(100 and 500 mg/kg) significantly reduced blood glucose levels and increased plasma insulin levels in STZ-induced diabetic rats. IJT also significantly reduced the plasma levels of tryglyceride, creatinine and urea in STZ-induced diabetic rats. The OGTT results showed a significant improvement in glucose tolerance in IJT-administrated rats. Conclusions: These data indicate that IJT may improve glocose homeostasis in STZ-induced diabetes, which could be associated with stimulation of insulin secretion.
Four Korean native steers ($511{\pm}17.2kg$; $2{\times}2$ replicated crossover design) fitted with duodenal cannulas were used to investigate the influence of oral administration of soluble whey protein (WP; 82.29% crude protein) on ruminal fermentation, gastrointestinal (GI) hormone secretion in the blood, pancreatic ${\alpha}$-amylase activity in the duodenum, and disappearance rate in each segment of the GI tract. Steers were orally fed the basal diet (control; TMR [total mixed ration] 9 kg/d) or the basal diet with enriched WP (400 g/d) for 14 days. The apparent crude protein disappearance rate in the rumen of the WP was higher than in control (p < 0.05). However, no difference between groups was observed in the apparent crude protein disappearance rate in the intestine and the apparent starch disappearance rates in the rumen, GI tract. The level of cholecystokinin, secretin, and ghrelin in serum and pancreatic ${\alpha}$-amylase activity in the duodenum of the WP also did not change. The changes in the level of blood urea nitrogen related to protein metabolism were higher in the WP than in the control (p < 0.05). However, the levels of total protein, lipid, carbohydrate and mineral metabolites did not change. Consequently, we suggest that the oral administration of WP in steers assisted in ruminal fermentation due to the population increase of microbes in the rumen but did not improve the starch digestion rate in the small intestine because GI hormone secretion in the blood and pancreatic ${\alpha}$-amylase activity did not change.
To treat fulminant hepatic failure (FHF) patients, various extracorporeal bioartificial liver (BAL) systems have been developed. Several requirements should be met for the development of BAL systems: hepatocytes should be cultured in a sufficiently high density; their metabolic functions should be of a sufficiently high level and duration; and the BAL systems module should permit scaling-up and aseptic handling. Several investigators have found that freshly isolated primary hepatocytes can be cultured into three dimensional, tightly packed, freely suspended, multicellular aggregates, or spheroids. These specialized cell structures exhibited enhanced liver specific functions and a prolonged differentiated state compared to cells maintained in a monolayer culture. Cells in spheroids appear to mimic the morphology and ultrastructure of the in vivo liver lobule. The ability of hepatocytes to organize into three-dimensional structures was hypothesized to contribute to their enhanced liver-specific activities. In this study, the ammonia removal rate and urea secretion rate of pig hepatocytes spheroids encapsulated in Ca-alginate bead were determined. A packed-bed bioreactor with encapsulated pig hepatocytes was devised as BAL support system. The efficacy of the system was evaluated in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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