본 연구는 피부화상으로 유도된 심근손상에서 protein kinase C (PKC)의 역할을 알아보고자 하였다. 수컷 흰 쥐(SD계)에 15%의 피부전층화상을 유도한 뒤, PKC activator인 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)와 PKC inhibitor인 bisindolylmaleimide (BIS)를 투여하여 5시간, 24시간 후에 심장을 적출하여 생화학적 미세구조적 입체해석학적 방법을 실시하였다. 혈청 AST와 creatinine 은 화상 후 5시간군과 화상 후 5시간+BIS 투여군에서 높게 나타났고, KC와 MPO 활성은 PMA 투여군이 BIS 투여군보다 낮게 나타났다. 미세구조적 관찰 결과 PMA 투여군에서는, 화상으로 인한 핵의 분열, 과수축대 형성, 사이원반의 분리 현상이 다소 완화된 형태로 관찰되었고, BIS 투여군에서는 화상 단독군에서 나타나는 형태적 변화 뿐만 아니라 비정상적인 형태의 사립체도 일부 관찰되었다. 전체적으로 5시간에서 24시간군으로 가면서 손상이 완화된 양상을 나타내었다. 입체해석학적 결과에서는 화상으로 인한 근원섬유의 체적밀도 감소가 PMA와 BIS 투여로 인해 증가되었고, 사립체의 체적밀도와 수밀도의 증가는 BIS군에서 가장 높게 나타났다. 결론적으로 PKC의 활성화는 화상으로 인해 손상된 심근에서 염증반응을 감소시켜 심근 손상을 보호한다고 사료된다.
To study the age-related morphological differences of the retinal pigment cells and Bruch's membrane of mouse, retinae of one week-old, five weeks-old, eight weeks-old, six months-old, twelve months-old, eighteen months-old, twenty-four months-old and thirty months-old ICR mice were dissected out under anesthesia. Pieces of the tissue taken from the posterior region of the retina were fixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde (0.1 M Millonig's phosphate buffer, pH 7.3), and 1% osmium tetroxide (0.1 M Millonig's phosphate buffer, pH 7.3), and embedded in araldite mixture. The ultrathin sections were stained with uranyl acetate and lead citrate, and were observed under a JEM 100 CX-II electron microscope. Observed results were as follows: 1. Retinae of one week old mouse exhibit that some parts of the pigment cell provided with basal foldings, whereas other parts of the one contain without basal foldings. After (ive weeks-old, all retinal pigment cells have the basal infoldings. 2. In the one week-old, stage 1 and stage 2 melanosomes were observed in the retinal pigments cells, but after five weeks-old, most of the retinal pigment cells contain some matured stage melanosomes (stage III and stage IV). 3. The phagosomes in the retinal pigment cells were increased during aging. 4. After eighteen months-old, electron dense materials are observed within the basal infoldings. 5. After eighteen months-old, the thickness of the Bruch's membrane is prominently increased. The thickness of the basal laminae of the pigment cell and the choriocapillary endothelium is more prominently increased as compared with that of the other components of the Bruch's membrane. 6. The thickness of the basal lamina of the pigment cell is more prominently increased as compared with that of the choriocapillary endothelium on aging. From the above results, it was suggested that the pigment cell and Bruch's membrane matures structurally In five weeks, and the function of the pigment cell is prominently suppressed around eighteen months-old, and thereafter the functional suppression is continued on aging.
To understand the structural changes of the myocardial myocytes and endothelial cells in ischemic and reperfused heart, and to elucidate their roles in those conditions, the authors observed cat and rat myocardium ultrastructurally and evaluated them with morphometric techniques. In cat, mild ischemia and moderate degree reperfusion injury was induced by ligation of the anterior interventricular branch of left coronary artery and reperfusion. In rat, severe ischemia and irreversible reperfusion iniury was made using in vitro Langendorff techniques. In normal cat myocytes, the volume densities of cytoplasm, myofibrils, mitochondria, sarcoplasmic reticulum and T tubules were $0.11{\pm}0.013,\;0.51{\pm}0.096,\;0.25{\pm}0.082,\;0.09{\pm}0.008,\;0.02{\pm}0.010$ (Mean${\pm}$S.D.) respectively, and the myofibril/mitochondria ratio was $2.33{\pm}1.379$. The numerical density and average volume of mitochondria were $0.76{\pm}0.210/{\mu}m^3$ and $0.33{\pm}0.057{\mu}m^3$ respectively. In normal cat endothelial cells, the volume densities of cytoplasm, cytoplasmic vesicles, tubular systems (including endoplasmic reticulum and Golgi apparatus) and mitochondria were $0.43{\pm}0.023,\;0.28{\pm}0.007,\;0.22{\pm}0.021,\;0.03{\pm}0.014$ respectively. The mean thickness of endothelial cells was $230{\pm}45.2{\mu}m$. The numerical density and average volume of cytoplasmic vesicles were $508{\pm}55.0/{\mu}m^3,\;578{\pm}104.8nm^3$ respectively. In cat myocytes which received mild ischemic injury, the volume densities of organelles were not changed significantly in ischemic and reperfusion states. In reperfusion group myocytes, the numerical density of mitochondria was decreased significantly and the average volume was increased significantly. In endothelial cells, the volume density of tubular system in ischemic group and the average volume of cytoplasmic vesicles in reperfusion group were increased significantly. In rat myocytes which received severe ischemic injury, the volume density and average volume of mitochondria were increased significantly, and the volume density of sarcoplasmic reticulum and numerical density of mitochondria were decreased significantly in both ischemic and reperfusion groups. In ischemic and reperfused endothelial cells, the volume density and numerical density of cytoplasmic vesicles, the volume density of cytoplasm were decreased significantly. The volume densities of tubular system were increased significantly in both ischemic and reperfused groups. The volume density of mitochondria in ischemic group and the average volume of cytoplasmic vesicles in reperfusion group showed significant increase. The authors, based on the above observations, conclude that the mitochondria of myocytes and the cytoplasmic vesicles of endothelia are the first group of targets in ischemic and reperfusion injury and in this respect, the degree of ischemic insult is not significant. The role of myocyte mitochondria in reperfusion injury may be insignificant, but endothelial cells may contribute actively to reperfusion injury.
본 연구에서는 생쥐에서 키토산의 방사선저항성 효과를 알아보자고 하였다. 건강한 ICR 생쥐를 본 실험에 사용하였다. SOD와 MDA는 방사선조사 후 48, 72시간째에 측정하였다. 간 미세구조는 방사선조사 후 24, 48, 72시간째에 측정하였다. 실험군은 세 가지로 나누었다. 실험군 1은 대조군으로 방사선 조사 후 키토산올리고당을 처치하지 않은 군, 실험군 2는 방사선조사 30일 전에 키토산 올리고당 용액을 선처치 한 군, 실험군 3은 방사선조사 후 키토산올리고당을 처치한 군 등으로 각 실험군 당 10마리 생쥐를 사용하였다. 방사선조사 30일 전에 키토산올리고당 용액을 선처치한 군에서 SOD와 MDA 발현 수치가 감소함을 알 수 있었다(P<0.01). 조직학적 결과는 다음과 같다. 방사선 조사군 - 핵은 함입되어 불규칙한 형태이며 미토콘드리아는 팽대되고 내강이 파괴되었다. 조면소포체는 심하게 팽대되었고 리보소옴의 탈락 현상이 관찰되었다. 선처치군- 핵은 비교적 원형을 이루었고 미토콘드리아는 타원형의 형태로 관찰되었다. 조면소포체는 약간 팽대되었으나 리보소옴이 부착된 형태로 관찰되었다. 후처치군- 핵은 약간 함입되어 불규칙한 형태이고, 미토콘드리아는 약간 팽대되었다. 조면소포체는 약간 팽대되었고 일부에서 리보소옴의 탈락 현상이 관찰되었다. 결론적으로 키토산올리고당이 방사선저항성 효과가 있어 방사선방어물질로 잠재력이 있다고 사료된다.
Morphological difference of the renal glomerulus at different age groups have been studies in one week-old, five weeks-old, eight weeks-old, six months-old, twelve months-old, eighteen months-old, twenty-four months-old, and thirty months-old ICR mice. Pieces of the tissue taken from the renal corticies were fixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solution (0.1 Millonig's phosphate buffer pH 7.3), and 1% osmium tetroxide solution (0.1 M Millonig's phosphate buffer, pH 7.3), and were embedded in araldite mixture. The ultrathin sections were stained with uranyl acetate and lead citrate solution, and were observed under a JEM 100CX-II electron microscope. The results were as follows: 1 In the one week-old mouse, thicknesses of the three layers of the glomeluar basal lamina (lamina densa, lamina rara interna and lamina rara externa) are similar, but in the five weeks-old mouse, thick lamina densa becomes a greater portion of the thickness of whole glomerular basal lamina. 2. No difference was noticed between thickness of the renal glomerular basal lamina of the five weeks-old mouse compare with that of the one week-old one, but basal lamina of the eight weeks-old one is thickened considerably and thicknesses were maintained through twelve months-old one. After eighteen months, the thickness of the glomerular basal lamina is increased remarkably. 3. After eighteen months, electron dense deposits within the basal lamina of the renal glomeruli are observed frequently. 4. Amount of the microfilaments in the mesangial cells and the mesangial matrices are increasing during aging. 5. The thicknesses of the basal laminae of the Bowman's capsule are increasing during aging. 6. After twenty four months, the proximal tubular cell-like parietal cells with well developed microvilli are observed frequently. From the above results, it was suggested that the renal glomerulus matures structurally in five weeks, and the function of the glomerulus is suppressed after eighteen months.
비행량과 비행형태가 다른 곤충 날개근육의 차이를 형태학적 관점에서 알아 보고자 어리호박벌 (벌목, 꿀벌과), 쇠측범잠자리 (잠자리목, 부채장수잠자리과), 넓적사슴벌레(딱정벌레목, 사슴벌레과)의 3종을 실험에 이용하였다. 실험군은 광학현미경적 방법, 투과전자현미경적 방법, 입체해석학적 방법을 이용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 광학현미경적 관찰 결과, 비행량이 많은 어리호박벌은 매우 규칙적인 분포를 나타내는 근원세사 사이에서 많은 수의 사립체가 관찰되었고, 근절도 짧게 나타났다. 쇠측범잠자리는 근절이 길어 어리호박벌과 비행형태의 차이가 있음을 반영했다. 날개근육을 거의 사용하지 않는 넓적사슴벌레는 사립체가 거의 관찰되지 않았고, 근절은 매우 길게 나타났다. 전자현미경적 관찰 결과, 어리호박벌과 넓적사슴벌레에서 적은 수의 근형질세망과 가로소관이 관찰되었고, 쇠측범잠자리에서는 근형질세망이 많이 분포하였으며 지방소적이 많이 관찰되었다. 입체해석학적 관찰 결과, 근원섬유의 체적밀도는 넓적사슴벌레에서 가장 높았으며, 어리호박벌, 쇠측범잠자리의 순으로 낮게 나타났다. 사립체의 체적밀도는 어리호박벌에서 가장 높았으며, 근형질세망의 체적밀도는 쇠측범잠자리에서 가장 높게 관찰되었다. 사립체의 수밀도는 어리호박벌에서 가장 높았다. 따라서 비행량과 비행형태에 따른 곤충 날개근육의 형태학적 차이는 운동량과 운동형태에 영향을 미치는 서식습성에 의해 변화되는 것으로 나타났다.
Testosterone과 cyclic AMP(cAMP)가 부정소에 미치는 영향을 조사하기 위하여 흰쥐의 복강내로 testosterone 및 cAMP를 투여하여 acid phosphatase(ACP),alkaline phosphatase(ALP), lactate dehydrogenase(LDH)의 활성도를 측정하였으며 상피세포내 미세구조의 변화를 전자현미경으로 관찰하였다. 그 결과 거세한 실험군에서 ACP활성도는 거세 후 3일째까지 감소하기 시작하였으며 ALP활성도는 5일째,LDH활성도는 7일째부터 각각 감소하였다. 또한 거세 후 14일째 부터 testosterone을 7일간 투여한 경우 ACP와 ALP의 활성도는 5일간 계속 투여하였을 때,LDH의 활성도는 7일간 계속 투여하였을 때만 각각 유의성있게 증가하였다. cAMP 및 cAMP-theophyllin을 투여한 경우 LDH 및 ACP의 활성도가 증가하였으나 그 증가폭은 큰 의미가 없었다. ALP의 활성도는 두 가지의 경우에서 모두 증가를 나타내었다. 미세구조를 관찰한 결과는 거세한 실험군에서 골지체가 점차 변형되어 층상구조가 없어지며 미토콘드리아도 파괴되었고 상당수 존재하던 부동모 (stereocilia)도 파괴되었다. 이 경우 testosterone투여시 파괴되었던 고리지체, 미토콘드리아 및 부동모가 회복되었고 cAMP 및 cAMP-theophyllin 을 투여하였을 때는 골지체 및 여러 세포기관들이 대조군과 같은 수준으로 회복되었으나 부동모는 거세군과 같은 수준으로 관찰되었다. 이상의 결과는 부정소액에서 정자성숙시 나타나는 효소활성도 증가와 유사하게 나타났는데, 이것은 정자↔부정소액↔부정소 상피세포 와 같은 상호작용을 통하여 정자성숙이 이루어지며 이는 상피세포에서 합성된 물질이 부정소내 강으로 방출된다는 것을 의미하며 cAMP를 처리하였을 경우 효소활성도 증가 및 여러 세포소기관의 회복 등 testosterone과 유사한 작용을 나타내는 것은 cAMP가 웅성호르몬 작용시 화확적으로 전달자로 작용할 수 있다는 가능성을 나타내는 것으로 생각된다.
In order to investigate the histopathological, mechanism of Rompun-induced shock, the development of mammary carcinoma, the numerical changes and the morphological findings of the mast cells appeared in the carcinoma were microscopically observed in the rat treated with DMBA and each chemical of compound 48/80 and Rompun. Also mast cell degranulation induced by Rompun was observed with electron microscope. The results observed were summarized as follows: Tumor appeared in 100% of the animals. Tumors grew more rapidly to $10{\times}10mm$ in rats depleted of mast cells ($37.7{\pm}4.2$ days) than was observed in the control group ($42.5{\pm}4.7$ days) (p<0.005). The mean number of tumors per rat was $2.8{\pm}1.3$ in the compound 48/80- treated group in contrast to $3.4{\pm}1.3$ in the control group. No significant difference was apparent in the tumor induction time of Rompun treated group compared with the compound 48/80-treated group, but the tumor measuring at least $10{\times}10mm$ appeared more quickly in the Rompun treated group than in the control group (p<0.005). The numbers of mast cells in the control group were inclined to increase significantly according to the mammary tumor development (p<0.005). In contrast, the mast cells were fewer significantly in the compound 48/80-treated group and Rompun-treated group than in the control group (p<0.005). The numbers of mast cells in the compound 48/80-treated group and Rompun-treated group were inclined to reduce significantly according to the stages of the mammary carcinoma growth in contrast to the control group respectively. The ultrastructural morphologies of mast cells at 30 minutes after Rompun injection were appeared many normal granules in the cytoplasm, but many normal and degranulated granules were scattered along the cell membrane. And at 1 hour after Rompun injection mast cell granules were disappeared nearly or rarely seen. many long cytoplasmic projections were folded back to adhere to their own surface membrane. and mast cells resulted in a reduced size of these cells. Otherwise. compound 48/80 caused extensive degranulation of mast cells by disrupting cell membrane. but mast cell degranulation by Rompun was observed exocytosis of granules through a channel. From the above results. it is concluded that the Rompun may give rise to the dealth of animals as a shock caused by mast cell degranulation.
본 실험은 화상을 입은 생쥐에서 SQ의 치유 효과를 알아보기 위함에 있다. 실험군은 7개군으로 구분하였다; 대조군, 화상군, 그리고 화상을 입헌 후 SQ를 처치한 군. 대조군을 제외한 모든 군은 등 부위에 2도 화상을 입혔다. SQ를 처치한 모든 군은 하루에 한 번씩 10초 간격으로 순수한 SQ 3방울을 도포하였다. 화상 후 10일 동안 조직학적 및 미세구조적 변화를 광학 현미경과 전자현미경으로 관찰하였다. 광학현미경으로 관찰한 결과, 화상군의 표피층의 모든 부분은 SQ를 처치한 군보다 더 심한 상처를 입었다. SQ를 처치한 6째와 10일째 군에서, 기저층은 분화가 활발하였고, 가시층의 각화세포는 수적으로 매우 증가하였다. 전자현미경으로 관찰한 결과, SQ를 처치한 모든 군의 기저층에서 세포분열이 화상군에서보다 더 활발하게 나타났다. 특히, SQ를 처치한 10일군에서는 이상적인 결과를 얻을 수 있었다; 대조군보다 더 두꺼운 가시층과 많은 각화세포, 뚜렷한 세포간교, 그리고 멜라닌세포를 포함하는 튼튼한 기저층. 이와 같은 결과로 보아 SQ은 표피성장인자(EGF)를 활성화시키고, 유해산소의 제거 역할을 하며, 막계에 에너지원을 제공할 가능성이 있다. 이 실험의 결과는 SQ가 화상 치료에 특수한 효과가 있다고 사료된다.
Morphological evaluation of the small intestine mucosa and apoptosis activity (caspase-3) is necessary to assess the severity of damage to the small intestine. At the same time, proliferative index based on Ki-67 can be used to assess the regenerative potential of the small intestine. Fragments of small intestine of Wistar rats (n=60) of three groups: I) control (n=20); II) experimental group (n=20; local single electron irradiation at a dose of 2 Gy), III) experimental group (n=20; local single electron irradiation at a dose of 8 Gy) were studied by light microscopy using hematoxylin and eosin staining and immunohistochemical reactions with antibodies to Ki-67 and caspase-3. In all samples of the experimental groups, a decrease in all morphometric indices was observed on day 1 with a tendency to recover on day 3. Small intestinal electron irradiation led to disturbances in the histoarchitecture of varying severity, and an increase in cell apoptosis was observed (increased expression of caspase-3 and decrease in Ki-67). In addition, modulation of the PI3K/AKT and MAPK/ERK signaling pathways was detected. The most pronounced destructive changes were observed in the group of 8 Gy single electron irradiation. Local irradiation of the small intestine with electrons at a dose of 2 and 8 Gy results in a decrease in the number of enterocytes, mainly stem cells of the intestinal crypts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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