• 제목/요약/키워드: U2OS

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Inhibition of c-FLIP by RNAi Enhances Sensitivity of the Human Osteogenic Sarcoma Cell Line U2OS to TRAILInduced Apoptosis

  • Zhang, Ya-Ping;Kong, Qing-Hong;Huang, Ying;Wang, Guan-Lin;Chang, Kwen-Jen
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제16권6호
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    • pp.2251-2256
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    • 2015
  • To study effects of cellular FLICE (FADD-like IL-$1{\beta}$-converting enzyme)-inhibitory protein (c-FLIP) inhibition by RNA interference (RNAi) on sensitivity of U2OS cells to tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)-induced apoptosis, plasmid pSUPER-c-FLIP-siRNA was constructed and then transfected into U2OS cells. A stable transfection cell clone U2OS/pSUPER-c-FLIP-siRNA was screened from the c-FLIP-siRNA transfected cells. RT-PCR and Western blotting were applied to measure the expression of c-FLIP at the levels of mRNA and protein. The results indicated that the expression of c-FLIP was significantly suppressed by the c-FLIP-siRNA in the cloned U2OS/pSUPER-c-FLIP-siRNA as compared with the control cells of U2OS/pSUPER. The cloned cell line of U2OS/pSUPER-c-FLIP-siRNA was further examined for TRAILinduced cell death and apoptosis in the presence of a pan-antagonist of inhibitor of apoptosis proteins (IAPs) AT406, with or without 4 hrs pretreatment with rocaglamide, an inhibitor of c-FLIP biosynthesis, for 24 hrs. Cell death effects and apoptosis were measured by the methods of MTT assay with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide and flow cytometry, respectively. The results indicated that TRAIL-induced cell death in U2OS/pSUPER-c-FLIP-siRNA was increased compared with control cells U2OS/pSUPER in the presence or absence of AT406. Flow cytometry indicated that TRAIL-induced cell death effects proceeded through cell apoptosis pathway. However, in the presence of rocaglamide, cell death or apoptotic effects of TRAIL were similar and profound in both cell lines, suggesting that the mechanism of action for both c-FLIP-siRNA and rocaglamide was identical. We conclude that the inhibition of c-FLIP by either c-FLIP-siRNA or rocaglamide can enhance the sensitivity of U2OS to TRAIL-induced apopotosis, suggesting that inhibition of c-FLIP is a good target for anti-cancer therapy.

uPC player : 윈도우 운영체제에서의 OS가상화 기반 무상태 컴퓨팅 실행환경 지원 기술 (uPC player : An OS Virtualization-based Technique to Support Stateless Computing Execution Environment on Windows)

  • 성백재;박찬익
    • 한국정보과학회논문지:컴퓨팅의 실제 및 레터
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    • 제16권1호
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    • pp.125-129
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    • 2010
  • Stateless computing[1,2]은 컴퓨팅 환경의 이동성을 용이하게 지원하는 기술로써, 여러 사용자들이 컴퓨팅 자원을 공유하는 환경에서 각 사용자 별 보안성을 확보하는 주요 기술로 자리잡고 있다. 또한 최근 가상화 기술의 확산 및 cloud computing의 발전에 따라, 사용자가 사용하는 설정과 데이터들(state)을 원격의 서버등과 같은 임의의 저장장치에 저장 후, 향후 어떠한 환경에서든 저장된 내용을 복원하여 사용자의 computing 환경을 이어가는 개념을 지원하기 위한 핵심적인 요소이다. 본 논문에서 제안하는 uPC player는 사용자에게 Windows 운영체제 환경에서의 Stateless computing 실행환경을 지원하는 기술로써, uPC player는 OS 기반 가상화 모듈인 uPC[3,4]를 기반으로 사용자에게 Windows 운영체제 컴퓨팅 환경을 지원한다. 본 논문에서는 Stateless computing 실행환경을 지원하기 위해 uPC player를 어떻게 설계하고 구현하였는지 설명한다. uPC player는 Windows desktop 환경과 연동하여 호스트 시스템의 실행환경과 uPC 가상 실행환경을 자유롭게 이동 가능하며, OS 기반 가상화 모듈에 기반함으로써 uPC player를 이용한 사용자 실행환경을 지원하는데 소요되는 시간이 약 1초 정도이다.

Suppression of Ku80 Correlates with Radiosensitivity and Telomere Shortening in the U2OS Telomerase-negative Osteosarcoma Cell Line

  • Hu, Liu;Wu, Qin-Qin;Wang, Wen-Bo;Jiang, Huan-Gang;Yang, Lei;Liu, Yu;Yu, Hai-Jun;Xie, Cong-Hua;Zhou, Yun-Feng;Zhou, Fu-Xiang
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제14권2호
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    • pp.795-799
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    • 2013
  • Ku70/80 heterodimer is a central element in the nonhomologous end joining (NHEJ) DNA repair pathway, Ku80 playing a key role in regulating the multiple functions of Ku proteins. It has been found that the Ku80 protein located at telomeres is a major contributor to radiosensitivity in some telomerase positive human cancer cells. However, in ALT human osteosarcoma cells, the precise function in radiosensitivity and telomere maintenance is still unknown. The aim of this study was to investigate the effects of Ku80 depletion in the U2OS ALT cell line cell line. Suppression of Ku80 expression was performed using a vector-based shRNA and stable Ku80 knockdown in cells was verified by Western blotting. U2OS cells treated with shRNA-Ku80 showed lower radiobiological parameters (D0, Dq and SF2) in clonogenic assays. Furthermore, shRNA-Ku80 vector transfected cells displayed shortening of the telomere length and showed less expression of TRF2 protein. These results demonstrated that down-regulation of Ku80 can sensitize ALT cells U2OS to radiation, and this radiosensitization is related to telomere length shortening.

Trichostatin A 처리에 의하 세포주기 조절인자들의 전사활성화 및 불활성화 (Transcriptional Activation and Repression of Cell Cycle Regulatory Molecules by Trichostatin A)

  • 백종수;이희경;조영수;김성영;박관규;장영채
    • 생명과학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.994-1004
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    • 2005
  • Dihydrofolate reductase (dhfr) promoter에는 전사 인자 Spl과 E2F가 결합하는 cis-acting 배열을 가지고 있다. dhfr 유전자의 전사는 세포 주기 Gl/S기 동안 최대의 발현을 나타낸다. 또한 Spl 전사 인자는 dhfr 유전자 발현의 활성화 및 불활성화를 조절하는 다양한 역할에 대한 연구가보고 되고 있으며, 최근 Spl-Rb과 E2F4-pl30 복합체가 CHOC400 세포에서 dhfr 유전자 발현에 안정한 형태를 형성하여 dhfr 발현을 억제한다는 연구 결과가 보고되었다. 본 연구에서는 Rb-양성 골육종 세포인 U2OS 및 Rb음성인 자궁경부암 C33A 세포에서 histon deacetylase (HDAC)에 대한 특이적인 저해제인 trichostatn A (TSA)를 처리한 후 세포주기 조절에 중심적 인자들인 dhfr cyclin E 및 cyclin A의 전사활성에 대한 HDACl의 기능을 조사하였다. U2OS 및 C33A 세포에서 TSA를 처리한 후, dhfr, cyclin E, cyclin A에 대한 mRNA 및 단백질 발현을 조사한 결과 U2OS 세포 특이적으로 dhfr cyclin E의 mRNA 발현과 단백질 발현이 크게 증가하였지만, cyclin A의 발현은 감소하였다. U2OS 세포에서 dhfr promoter construct에 대한 전사활성을 검사한 결과, TSA 처리는 dhfr promoter 영역으로부터 E2F 결합부위를 제거시킨 DHFR-Spl-luc를 통하여 dhfr promoter활성이 약 14배 증가되었다, 그러나 dhfr promoter 영역으로부터 Spl 결합부위를 제거시킨 DHFR-E2F-luc 영역을 포함하고 있는 promoter 활성은 TSA 처리에 의해 크게 증가되지 않았다. 본 연구에서 이러한 결과는 HDACI이 Spl을 통하여 dhfr promoter활성을 제어한다는 사실을 입증하였다. 한편 TSA는 U2OS 세포에서 HDAC의 활성을 통해서 세포주기 관련 인자들 가운데서 Gl 후기부터 활성화되는 대표적인 인자들인 dhfr과 cyclin E의 발현을 증가시키지만 G2 기에서 활성화되는 대표적인 인자인 cyclin A의 발현을 억제하는 상반된 기능을 가지고 있다는 사실을 확인하였다.

Effect of Ginsenosides from Panax ginseng on Proliferation of Human Osteosarcoma Cell $U_2OS$

  • Deqiang Dou;Jie Ren;Yingjie Chen;Youwei Zhang;Xinsheng Yao
    • 고려인삼학회:학술대회논문집
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    • 고려인삼학회 2002년도 학술대회지
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    • pp.376-384
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    • 2002
  • Object To find out which of the 27 ginsenosides isolated from Panax ginseng C.A. Mey that may inhibit the proliferation of human osteosaocoma cell line $U_2OS$. Methods Effects of each individual ginsenoside on the proliferation of $U_2OS$ cell were studied by determining the viability of cancer cells during culture with or without the presence of the test compound. DNA assay was determined by flow cytometry. Results Ginsonosides -Ro, $-Rh_l,\;-Rh_2,\;-F_1\;and\;-L_8$ at concentrations of 5 ,umol/L could obviously suppress the proliferation of $U_2OS$ cells while ginsenosides $-Rg_1,\;-F_3,$ -Rf, PPT and PT significantly inhibited the cancer cells. Flow cytometry revealed that ginsenosides $-Ro,-Rg_1-Rf,-F_1-Rh_2,PPT$ and PT induced cell cycle arrest at $G_0/G_1$ phase with obvious decrease of cell count at Sand $G_2+M$ phase, Moreover, ginsenosides $-Rf_1,-Rg_1,\;-F_1$ and PPT induced significantly high rates of cell death as compared with the control. Conclusion These data suggested that ginsenosides inhibited $U_2OS$ proliferation Via cell cycle arrest or induction of cell death.

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Jab1 has negative effects on p53-mediated genotoxic stresses

  • Lee, Eun-Woo;Lee, Sang-Sik;Song, Jae-Whan
    • BMB Reports
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    • 제42권5호
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    • pp.299-303
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    • 2009
  • In this study, we use promoter analysis to show that interaction between Jab1 and p53 induces suppression of p53 activation in U2OS and H1299 cells. Interaction between p53 and Jab1 was further confirmed by immunoprecipitation and immunofluorescent analyses. In particular, Jab1 was able to induce nuclear export of p53 as previously reported. When Jab1 was overexpressed in U2OS cells followed by etoposide or hydrogen peroxide ($H_2O_2$), cell death induced by such stresses was protected against. On the contrary, when the level of Jab1 was suppressed in U2OS cells, cytotoxicity imposed by etoposide and $H_2O_2$ was dramatically increased, suggesting a cell protective role for Jab1. These results indicate that Jab1 is a negative regulator of p53 and a plausible oncogene.

U2OS 골육종 세포주의 세포자멸사에서 MMP억제제와 Doxorubicin 작용의 비교연구 (A Comparison Study of MMP Inhibitors' and Doxorubicin's Effects on the Apoptosis of U2OS Osteosarcoma Cell Line)

  • 문정석;염범우
    • 대한골관절종양학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.88-95
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    • 2007
  • 목적: wild-type p53 단백질을 가지고 있는 U2OS 인간 골육종 세포주의 세포자멸사에서 MMP억제제와 doxorubicin의 작용을 비교하고자 하였다. 대상 및 방법: 배양한U2OS 세포주에 Doxorubicin, MMP억제제(MMPI III)를 따로 투여한 것과 두 약물을 동시에 투여한 것을 비교하였다. 또한 Doxorubicin의 작용이 Fas/FasL 경로를 통해 유발되는지 알아보기 위해 Fas 중화항체를 doxorubicin과 함께 투여하였다. 약물을 처리하여 배양한 세포에서 발생한 세포자멸사와 세포괴사를 확인하기 위해서 유세포 검사를 시행하였다. 결과: Doxorubicin을 처리한 세포가 처리하지 않은 세포보다 약물 농도에서 더 많은 세포괴사(p=0.000)를 보였다. 이에 반해 MMPI III를 처리한 세포는 약물 농도와 반응시간에 따른 세포자멸사 및 세포괴사에서 차이를 보이지 않았다. 두 약물을 동시에 투여한 군은 그렇지 않은 군에 비해 세포 자멸사 및 세포괴사에서 차이가 없었다. Doxorubicin에 Fas 중화항체를 추가한 군과 doxorubicin 단독 투여 군 사이에 세포자멸사 및 세포괴사에서 차이가 없었다. 결론: Doxorubicin과 같이 MMP 억제제를 골육종 치료에 사용하려면 wild-type p53 뿐만 아니라 wild-type p14를 가지고 있는 골육종 세포에 대한 검사가 필요할 것으로 사료된다.

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용골(龍骨)(부용치)(附龍齒)의 품질표준(品質標準) 및 포제전후의 성분비교(成分比較) (Study for the standardization of Os Draconis and comparison composition before and after using processed method on Os Draconis)

  • 이장천
    • 대한한의학방제학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.171-195
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    • 2003
  • Objectives: This experimental study has been done to compare the Os Draconis composition before and after using processing method. Os Draconis has a quality for calming the liver meridian function and relaxation the mind. Methods: I studied the Os Draconis and processed Os Draconis by vinegar to compare the compositions and its' character. Results: Os Draconis is not a dinosaur's bone fossil but a mammal's bone fossil which has a Calcite mineral, an Apatite mineral, $SiO_2\;Al_2$ O, etc. Os Draconis contains a main ingredients CaO>50.00%. Processed Os Draconis which is heated and soaked in vinegar changes to weak condition Conclusion: Os Draconis is supposed to be a mammal's bone fossil. Some Os Draconis has a radioactive substance like a U, Th so we pay heed to deal with it in a medical clinic.

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4각 덕트내에서 난류 맥동유동의 난류특성에 관한 연구 (A Study on Turbulent Characteristics of Turbulent Pulsating Flows in a Square Duct)

  • 박길문;고영하
    • 설비공학논문집
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    • 제2권3호
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    • pp.188-198
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    • 1990
  • Turbulent characteristics of turbulent pulsating flows were studied experimentally in a square duct. Velocity waveforms, velocity profiles, and turbulent intensity of turbulent pulsating flow were investigated by using a hot-wire anemometer with data acquisition and a processing system in a square duct with a ratio of 1 ($40mm{\times}40mm$) to 4,000mm long. Turbulent components were shown to be larger in decelerating than in accelerating regions and also larger for a large phase of velocity and U'rms distribution of turbulent flow. The effect of velocity amplitude ratio does not exist for specified time [${\theta}(z^{\prime})$], amplitude ratio (${\mid}U^{\prime}_{rms.os.1}{\mid}/{\mid}U_{m.os.1}{\mid}$), and phase difference (${\Delta}U^{\prime}_{rms.os.1}-{\Delta}U_{m.os.1}$) in either turbulent oscillating or cross-sectional mean velocity components. The effect of dimensionless angular frequency for specified time [${\theta}(z^{\prime})$] can be disregarded because the dimensionless angular frequency does not affect the specified time. The velocity distributions of turbulent pulsating flows for various time-averaged Reynolds numbers are in approximate agreement with the velocity distributions for equivalent Reynolds numbers and 1/7th power law of steady flow.

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PLC용 uC/OS 운영체제의 보안성 강화를 위한 실행코드 새니타이저 (Executable Code Sanitizer to Strengthen Security of uC/OS Operating System for PLC)

  • 최광준;유근하;조성제
    • 정보보호학회논문지
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    • 제29권2호
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    • pp.365-375
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    • 2019
  • PLC(Programmable Logic Controller)는 안전 지향 제어시스템(safety-critical control system)을 위한 실시간 임베디드 제어 애플리케이션들을 지원하는 고신뢰성의 산업용 디지털 컴퓨터이다. PLC의 실시간 제약조건을 만족시키기 위하여 uC/OS 등의 실시간 운영체제들이 구동되고 있다. PLC들이 산업제어 시스템 등에 널리 보급되고 인터넷에 연결됨에 따라, PLC 시스템을 대상으로 한 사이버 공격들이 증대되고 있다. 본 논문에서는, 통합 개발 환경(IDE)에서 개발된 프로그램이 PLC로 다운로드 되기 전에 실행 코드를 분석하여 취약성을 완화시켜 주는 "실행코드 새니타이저(sanitizer)"를 제안한다. 제안기법은, PLC 프로그램 개발 중에 포함되는 취약한 함수들과 잘못된 메모리 참조를 탐지한다. 이를 위해 취약한 함수 DB 및 이상 포인터 연산과 관련된 코드 패턴들의 DB를 관리한다. 이들 DB를 기반으로, 대상 실행 코드 상에 취약 함수들의 포함 여부 및 포인터 변수의 이상 사용 패턴을 탐지 제거한다. 제안 기법을 구현하고 실험을 통해 그 유효성을 검증하였다.