Park, Kyung-Hyun;Lee, Young-eun;Kim, Eun-Heui;Sohn, Sang-Gyu
Journal of fish pathology
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v.22
no.1
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pp.35-44
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2009
The potential pathogenicity of Vibrio splendidus biovar II, which was isolated from triploid larvae of pacific oyster with bacillary necrosis and fish pathogenic V. anguillarum were investigated. The 5-day-old larvae infected with V. splendidus biovar II at the dose of $1.81{\times}10^{4}$ CFU/$m\ell$ started to die within 8 hours after exposure and the mortality were reached to 100% in 16 hours. However, $1.13{\times}10^{4-5}$ CFU/$m\ell$ of V. anguillarum caused 5.5-20% mortality of the larvae after 24 hours. The 10-day-old larvae infected with V. splendidus biovar II at the dose of $5.0{\times}10^{5}$ CFU/$m\ell$ showed mortality from 8 hours after challenge and led to a marked mortality of 90.47% after 24 hours. But V. anguillarum at doses of $5.08{\times}10^{3-6}$ CFU/$m\ell$ did not show mortality in the 10-day-old larvae. Therefore V. splendidus biovar II exhibited stronger virulence in 5-day-old larvae than 10-day-old and young oyster. Changes in the concentration of Vibrio in sea water showed that V. anguillarum decreased from $1.13{\times}10^{5}$ CFU/$m\ell$ to 1.7${\times}$105 CFU/$m\ell$ and V. splendidus biovar II increased from $1.81{\times}10^{4}$ CFU/$m\ell$ to $1.7{\times}10^{7}$ CFU/$m\ell$. This strong survival ability of V. splendidus biovar II in seawater was thought as one of the virulence factors against oyster larvae. The mortalities of 5-day-old and 10-day-old oyster larvae were decreased by addition of 30 $\mu{g}/m\ell$ of antibacterial agent(oxytetracycline or streptomycin). These results suggest that bacillary necrosis by V. splendidus biovar II can be occurred in oyster larvae in Korea. And virulence of V. splendidus biovar II is stronger than that of V. anguillarum in oyster larvae causing significant mortality at the density of $10^{4}$ CFU/$m\ell$.
This study was carried out to investigate the optimal condition for multiple propagation through leaf tissue culture and to apply anther culture techniques to Pulsatilla koreana Nakai breeding. Leaf and anther of Pulsatilla koreana Nakai were cultured on MS, MT, LS and $B_5$ media supplemented with several growth regulators and nitrogen sources under various conditions. For callus induction and differentiation from the Pulsatilla koreana leaf segments were more effective in the combination of zeatin and auxin than auxin alone. The color of the callus was green when treated with IBA alone. Shoot differentiation was more effective when treated with zeatin than auxin alone, especially the best hormoal combination for shoot differentiation was zeatin 1.0mg/l +NAA 0.1mg/l, while 2,4-D inhibited shoot differentiation. The appeared rate of S pollen was 35% in vivo, while that of S pollen by low temperature$(4^{\circ}C)$ pretreatment for 4 days was increased by 53% and the optimum culture time for callus induction from anther was uni-nucleate stage. $B_5$ basal medium supplemented with NAA 0.5mg/l and zeatin 1 mg/l was the most effective on callus formation and the best results of plant regeneration were obtained from combination of NAA 0.5mg/l and zeatin 0.5mg/l in anther culture. $NH_{4}NO_3$ as more effectives as the nitrogen source than $KNO_3$ and the combination with zeatin 2.0mg /L was the best effective. The best combination for plant regeneration in callus induced from anther was $NH_{4}NO_3$ 1650mg/l + $KNO_3$ 3800mg/l + zeatin 2.0mg/l. Ploidy level of anther-derived plants appeared 28% haploid, 47% diploid and the others were triploid, tetraploid and mixploid. In compare with E.S.T, M.D.H and P.X banding patterns were distinguished among callus, haploid and diploid plants in electrophoresis.
Park, Song Kyoung;Park, In Sook;Kim, Chang Kil;Jee, Sun Ok;Lim, Ki Byung
FLOWER RESEARCH JOURNAL
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v.17
no.4
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pp.279-284
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2009
In order to recover fertility from sterile interspecific OA-1 $F_1$ hybrid (Oriental hybrid 'Mero Star' ${\times}$ Asiatic hybrid 'Connecticut King'), various concentrations (0.1, 0.3 and 0.5%) of caffeine were injected directly into flower buds and then confirmed the viability of OA-1 $F_1$ hybrid at the flowering time. After the caffeine treatment, fertilized $F_1$ hybrids were crossed as female with Asiatic hybrid 'Lanzarote' as male. Five plantlets were obtained from seven embryos of 16 pollinated flowers at 0.3% treatment of caffeine while 0.5% treatment of caffeine obtained one plant let and 0.1 % treatment of caffeine plantlet did not produce at all. Thus 0.3% of caffeine treatment was considered as optimum concentration to produce subsequent progenies and the OA-l $F_1$ hybrid treated with caffeine produced 51% of putative 2n gametes. Pollen germination of OA-2 ('Romero Star' ${\times}$ 'Lady Rosa') and OA-3 ('Expression' ${\times}$ 'Lady Rosa') was not differ between temperature treatment alone and in combination with caffeine and temperature treatment. In the reciprocal crosses of OA-1 and Asiatic hybrid 'Lanzarote' or Oriental hybrid 'Sorbonne', A ('Lanzarote') ${\times}$ OA-1 or OA-1 ${\times}$ A crosses showed better results than O ('Sorbonne') ${\times}$ OA-1 or OA-1 ${\times}$ a crosses in plant obtaining. All progenies obtained from A ${\times}$ OA-1 or OA-1 ${\times}$ A crosses were confirmed as triploids by GISH analysis.
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