Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.110.3-111
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2003
The effect of biological control on the severity of hot pepper wilt disease was evaluated in the vinyl house with plants cultivated in the nursery soil containing chitin and chitinolytic microorganisms. The chitinolytic microorganisms, Trichoderma harzianum and Chromobacterium sp. strain C-61, were well survived in the nursery soil containing chitin. The hot pepper damping-off was markedly suppressed in the nursery soil containing chitin and chitinolytic microorganisms. The survival of chitinolytic microorganisms and suppression of damping-off were superior as the amounts of chitin added to the nursery soil increased, but growth of hot pepper was inhibited in the 10% (w/w) chitin treatment. When the plants cultivated in the nursery soil containing 1% chitin and chitinolytic microorganisms were transplanted in the vinyl house, the vegetative growth increased and the wilt disease was reduced as comparison with those of control.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.110.2-110
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2003
The effect of biological control on the severity of hot pepper wilt disease was evaluated in the vinyl house with plants cultivated in the nursery soil containing chitin and chitinolytic microorganisms. The chitinolytic microorganisms, Trichoderma harzianum and Chromobacterium sp. strain C-61, were well survived in the nursery soil containing chitin. The hot pepper damping-off was markedly suppressed in the nursery soil containing chitin and chitinolytic microorganisms. The survival of chitinolytic microorganisms and suppression of damping-off were superior as the amounts of chitin added to the nursery soil increased, but growth of hot pepper was inhibited in the 10% (w/w) chitin treatment. When the plants cultivated in the nursery soil containing 1% chitin and chitinolytic microorganisms were transplanted in the vinyl house, the vegetative growth increased and the wilt disease was reduced as comparison with those of control.
A fluorescent glucose analogue,2-[N-(7-nitrobenz-2-ox a-1,3-diazol-4-yl) amino] -2- deoxy-D-glucose (2-NBDG), which had previously been developed for the analysis of glucose uptake in living cells, was investigated to determine its biological activity on microorganisms.2-NBDG did not show any inhibitory effect on growth of yeast cells and bacteria. In contrast, 2-NBDG exhibited strong inhibitory effects on filamentous fungal growth. The growth of filamentous fungi was completely inhibited, when 2-NBDG was supplemented as sole carbon source. The inhibitory effect was decreased by the addition of glucose in the test medium. Furthermore, 2-NBDC inhibited chitinase activity of Trichoderma sp. These results suggested that the inhibitory effects of 2-NBDG on filamentous fungi might be partially due to the inhibition of chitinase.
Trophic interactions of introduced biocontrol fungi with soil animals can be a key determinant in the fungal proliferation and activity. This study investigated the trophic interaction of an introduced biocontrol fungus with soil nematodes. The biocontrol fungus Trichoderma harzianum ThzID1-M3 and the fungivorous nematode Aphelenchoides sp. (10 per gram of soil) were added to nonsterile soil, and microbial populations were monitored for 40 days. Similar results were obtained when the experiment was duplicated. ThzID1-M3 stimulated the population growth of indigenous nematodes (p < 0.05), regardless of whether Aphelenchoides sp. was added. Without ThzID1-M3, indigenous nematodes did not increase in number and the added Aphelenchoides sp. nematodes almost disappeared by day 10. With ThzID1-M3, population growth of nematodes was rapid between 5 and 10 days after treatment. ThzID1-M3 biomass peaked on day 5, dropped at day 10, and then almost disappeared at day 20, which was not influenced by the addition of nematodes. In contrast, a large quantity of ThzID1-M3 hyphae were present in a heat-treated soil in which nematodes were eliminated. Total fungal biomass in all treatments peaked on day 5 and subsequently decreased. Addition of nematodes increased the total fungal biomass (p < 0.05), but ThzID1-M3 addition did not affect the fungal biomass. Hyphae of total fungi when homogenously distributed did not support the nematode population growth; however, hyphae of the introduced fungus did when densely localized. The results suggest that soil fungivorous nematodes are an important constraint on the hyphal proliferation of fungal agents introduced into natural soils.
The solid complexes of La(III), Ce(III), Pr(III), Nd(III), Sm(III) and Gd(III) with 4-hydroxy-3-(1-{2-(2,4-dihydroxy-benzylidene)-amino phenylimino}-ethyl)-6-methyl-pyran-2-one ($H_2$L) derived from o-phenylenediamine, 3-acetyl-6-methyl-(2H)pyran,2,4(3H)-dione (dehydroacetic acid or DHA) and 2, 4-dihydroxy benzaldehyde have been synthesized and characterized by elemental analysis, conductometry, magnetic susceptibility, UV-visible, FT-IR, $^1H$-NMR, X-ray diffraction, thermal analysis study, and screened for antimicrobial activity. The FT-IR spectral data suggest that the ligand behaves as a dibasic tetradentate ligand with ONNO donor atoms sequence towards central metal ion. From the microanalytical data, the stoichiometry of the complexes has been found to be 1:1 (metal: ligand). The physico-chemical data suggests distorted octahedral geometry for La(III), Ce(III), Pr(III), Nd(III), Sm(III) and Gd(III) complexes. The X-ray diffraction data suggests monoclinic crystal system for La(III) and Ce(III) and orthorombic crystal system for Pr(III) and Nd(III) complexes. Thermal behavior (TG/DTA) of the complexes was studied and kinetic parameters were determined by Horowitz-Metzger and Coats-Redfern methods. The ligand and its metal complexes were screened for antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus Sp. and fungicidal activity against Aspergillus Niger, Trichoderma and Fusarium oxysporum.
Studies were made to optimize the simultaneous hydrolysis-fermentation (SSF) process for the production of ethanol from rice straw. Trichoderma sp. KI 7-2 was selected to produced cellulase by solid culture for SSF. Ethanol production was highest when the SSF process utilized koji culture of the fungus grown on a medium of wheat bran-rice straw 3 : 2 mixture with moisture content of 50% adjusted to pH 4.5 for 7 days as the enzyme source. It was found that pretreatment of the substrate is not necessary. To ferment 1g of rice straw by SSF 2.47 units of cellulase were required, and the initial yeast concentration of 2.5$\times$10$^{7}$ cell/$m\ell$ was found to be sufficient. Optimum pH and temperature for the process were 4.5 and 4$0^{\circ}C$, respectively. It was also found that higher ethanol concentration in the broth can be obtained by the addition of substrate or substrate and enzyme to SSF broth.
To reduce the production cost of $Pleurotus$$ostreatus$, discarded medicinal sludge was collected from oriental medical clinics to develop the $Pleurotus$$ostreatus$ culture medium. According to the analysis of the proximate composition of the materials used in Korean herb medicine, the crude ash contents of $Carthamus$$tinctrius$ L stem and $Acanthopanax$$chiisanensis$ were 11.6% and 10.1% respectively, which were relatively higher than the 9.6% of the control medium, waste cotton. Crude protein was detected in 9.8% of the waste cotton medium, whereas it was detected in 14.9%, 13.9%, 13.4%, and 11.5%, of wild mugwort, $Acanthopanax$$\underline{chiisanensis}$, medicinal sludge, and $Carthamus$$tinctrius$ L stem, respectively, which are all higher than the control. The pH of medicinal sludges, wild mugwort, and $Aacanthopanax$$chiisanenses$ ranged from 5.27 to 5.72, which was similar to the 5.70 pH value of waste cotton. In the case of addition concentration of each Korean herb medicine material influencing mycelial growth of the $Pleurotus$$ostreatus$, the 9% concentration was more favorable compared to that of 3% and 6%. However, the addition of Korean herb medicine materials did not significantly affect the growth of $P.$$tolaassi$ and $Trichoderma$$sp.$ According to a field experiment that added 9% of medicinal sludge into the waste cotton medium, the mycelial growth of mushrooms was facilitated by approximately 2 days, and the mushroom yield was increased by 10~15%. Furthermore, pileus and stipe of the mushrooms were even and superior in quality.
Characteristics of TNP-cellulose which prepared from carboxymethyl cellulose powder, CM32, as substrate for cellulase activity assay were investigated. Enzymatic hydrolysis of TNP-cellulose occured on the cellulose moiety but not on amide bonds, following Michaelis-Menten kinetics. Three cellulase preparations from Trichoderma viride, Aspergillus niger, and Cellulomonas sp. were tested for their pH and temperature dependences and compared with the method determining the increase in reducing power. The enzyme activity was found to have the same temperature range in both methods, however the pH range was broadened in the case of using TNP-cellulose as substrate. The colorimetric method for cellulase assay using TNP-cellulose as substrate was compared with the other methods: one based on determination of the increase in reducing power; and the other based on determining the decrease in viscosity of Na-CM-cellulose solution. The activities measured by the colorimetric method showed a linear correlation with the enzyme concentration of certain range in all three enzymes tested, and the activity values were proportional to those obtained from the other methods. Depending on the enzyme, however, the activity values from this method were not always in proportion to those from the viscometric method. suggesting that this method was not specific for determination of the endo-type cellulase.
Attempts were made to investigate the conditions of mycelia of one low-temperature type strain and one high-temperature type strain of shiitake showing poor fruit-body formation in bed-log, and to survey harmful microorganisms formed on the log surface in Gapyung County, Korea. When tested the growing ability of mycelia, the low-temperature type strain showed ca. 1.1% decrease compared with preserved original strain. And, the high-temperature type one showed ca. 8.0% decrease. The growth of isolated mycelia was tested in sawdust medium. The high-temperature type strain showed ca. 10.8% decrease compared with original strain, and the low-temperature type one showed ca. 25.1% decrease. Weight reduction rate was investigated. The high-temperature strain showed ca. 20.1% decrease and the low-temperature one ca. 19.0%. When compared with non-treatment, original high-temperature type strain showed 107.0% decrease, the isolated high-temperature type strain 49.5%, original low-temperature type one 85.4%, isolated low-temperature type one 50.0%. As the results of confrontation culture, the high-temperature type strain and the low-temperature type one were same as the original ones, respectively. And, in the bed-logs, Hypoxylon truncatum, Coriolus versicolor, Inonotus xeranticus, Daedaleopsis tricolor, Graphostroma platystoma, two species of Myxomycetes, Trichoderma sp. Hypoxylon fragiforme, H. howeianum, and Nitschkia confertula were observed as harmful microorganisms, and the bed-logs were not in good condition.
An antagonistic bacterial isolate, that inhibits the growth of plant pathogens, was selected and identified from 5,000 isolates screened from the rhizosphere of various crop plants. An isolate Bacillus sp. N32, tested against Colletotrichum gloeosporioides causing anthracnose disease in hot pepper, produced both a heat resistant antifungal protein and a heat sensitive antifungal protein. The heat resistant protein was partially purified by Ammonium sulfate fractionation and gel filtration chromatography. The bioautography showed that the proteins possessed high antifungal activity. The biosynthetic gene cluster responsible for the heat resistant antifungal protein was cloned from cosmid library using DNA probe obtained from PCR product with the primers targeting the conserved nucleotide sequence of the synthetic genes reported earlier, Most of the clones obtained showed higher homology to fengycin antibiotic synthetic gene family reported earlier. On the other hand, the heat sensitive protein was isolated from SDS-PAGE and electroblotting to determine the N-terminal amino acid sequences. The heat sensitive antifungal protein gene was cloned from the ${\lambda}-ZAP$ libraries using a DNA probe based on the N-terminal amino acid sequences of the heat sensitive protein. We are contemplating to clone and sequence the whole gene cluster encoding the heat sensitive protein for further analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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