The enzyme-linked immunosorbent assay using the so-called "double-sandwich"technique was applied to determine Clostridium botulinum type F toxin. Polystyrene tubes were coated with horse anti-type F toxin serum and then toxin sample was added. The tubes were subsequently treated with rabbit anti-type F toxin IgG and sheep anti-rabbit serum IgG-horseradish peroxidase conjugate. By this technique, about 10 mouse intraperitoneal 50% lethal doses (ip LD/50/) of type F toxin could be detected. Low back-ground reading was achieved with the use of phosphate-buffered saline containing 0.05% Tween 20 and 1% bovine serum albumin as diluents of rabbit IgG and conjugate. Addition of EDTA in the diluents of toxin increased ELISA extinction value significantly. No cross-reaction was observed with botulinum type A and B toxin, but type E toxin gave sleight cross-reaction.
Soil samples and the intestinal contents of arthropods, mollusca, pisces, aves, and mammals were examined for the presence of Clostridium botulinum. Demonstration of Clostridium botulimun was accomplished by identifying its toxin in liquid cultures inoculated with soil or material from the alimentary tract of tested animals with toxin neutralization tests in addition to morphological, cultural and biochemical tests. Incidences of Clostridium botulinum in tested samples were 5.0% in soil, 6.7% in mammal and 8.7% in fish, respectively. All of the positive cultures were identified as Clostridium botulinum type E and any other type was not demonstrated throughout the survey. Canned foods and solid ham/sausage mixture formulated as can with distilled water were inoculated with Clostridium botulinum type E and checked for toxin production by using the mouse bioassay. Clostridium botulinum type E toxin was produced as a large quantity in canned foods of fish, shell, meat and ham and, however, no significant toxin was detected in sausages and fruit samples.
Botulinum toxin-A, a neurotoxin derived from Clostridia Botulinum, has been injected into the laryngeal muscle(s) for the treatment of the spasmodic dysphonia at the Voice Clinic, Yonsei Institute of Logopedics and phoniatrics since December 1995. We analyzed 355 patients with spasmodic dysphonia, using Botox register review. In the 355 patients, female is 86.8%. male is 13.2%. 305 patients (85.9%) had adductor type of spasmodic dysphonia and 35 patients (9.9%) were vocal tremor type and 15 patients were abduction and mixed type. Botulinum toxin type-A (Botox) injection using EMG was most frequently conducted as 587 cases, comparing with flexible nasopharyngoscopy gudied injection (68cases) and tele- laryn-goscopy guided injection (31cases). In the respect of frequency of Botox injection, 137 patients(38.6%) were injected one time but 1 patient was injected 17times. The mean dose of Botox is 6.2U. Clinically, initial dose of Botulinum toxin-A was high dose (7-8U) but current dose is small dose (3U). And the mean duration of Botox injection is 6.4 month. In conclusion, to optimize effect of the treatment for spasmodic dysphonia, Botulinum toxin-A injection is combined with voice therapy.
Purpose: The purpose of this report is to present a case of persistent parotid fistula treated successfully with preoperative botulinum toxin type A injection into the parotid parenchyma, followed by fistulectomy. Methods: A 72-year-old female patient presented to the hospital with a 5-month history of clear, watery discharge from a tiny opening on the left cheek, which increased during food intake. A chemistry test of the fluid revealed an high amylase level. An ultrasonography of left parotid gland showed a $1.13{\times}0.6cm$ sized fistula. After demarcating the left parotid gland with assistance of ultrasonography, a total 40 units of botulinum toxin type A (Botox, Allergan, Irvine, CA) was injected into 4 subdivisions of the left parotid gland. The clear serous discharge ceased completely on the 5th day after botulinum toxin injection. On the 7th day, a fistulectomy was performed under the local anesthesia. Results: The parotid fistula healed completely without complications. During the 6-month follow up period, there was no discharge from the cheek. Conclusion: On the basis of our experience with type A botulinum toxin as a local anticholinergic agent in treating parotid fistula, preoperative botulinum toxin A injection seems to be very useful to prevent recurrence after fistulectomy.
The Purpose of this study is to report the effect botulinum toxin type A injection for the masseter hypertrophy patient with bruxism. Nine patients enrolled in this study were diagnosed as masseter hypertrophy associated with bruxism and the patients were injected with a 25U of botulinum toxin type A (BTXA:Lanzhou) to each masseter muscles. All nine patients showed marked reduction of masseter hypertrophy and eight patients reported the resolution of bruxism in 8 weeks after injection, with no significant complications. This preliminary study suggest that the botulinum toxin type A injection is an alternative method to treat the masseter hypertrophy with bruxism.
Journal of the Korean Society of Laryngology, Phoniatrics and Logopedics
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v.14
no.1
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pp.40-46
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2003
Background and Objectives : The vocal fold granuloma has been associated with vocal abuse, gastroesophageal reflux, endotracheal intubation and habitual throat clearing etc.. Granuloma is benign growth of hypertrophic granulation tissue. It is usually located on the posterior third of vocal fold, in one or both vocal process of the arytenoid cartilage In spite of the voice therapy, steroid therapy, anti-reflex therapy and surgical procedure. The distinct advantage and uniform success rate of each methods have not been generally shown. Authors report that localized injection of botulinum toxin type A (BOTOX$^{\circledR}$) is the promising method both as an initial treatment and as an alternative treatment in patients who do not respond to standard therapy or who are poor surgical candidates. Materials and Method : We carried out a retrospective study of 9 patients with the diagnosis of vocal fold granuloma on the videostroboscopic examination from Jan 2000 to Mar 2003. The botulinum toxin type A was injected into one or both thyroarytenoid muscle or lateral cricoarytenoid muscle under the electromyography. The average dosage ranges from 6U to 8U per injection. Results : Unilateral vocal fold granuloma in 7 patients had been resolved completely within 2-3 months after first injection : 5 patients received th\ulcorner GER medical therapy in addition to the Botulinum toxin injections, 2 patients was resolved completely who had shown recurrence after $CO_2$ laser vaporization. 2 patients who had shown recurrence after $1^st$ injection were also completely resolved within 6 months after further injections. Conclusion : We expect that localized injection of Botulinum toxin type A can provide an alternative treatment for the refractory cases to the traditional forms of therapy and avoid the recurrence in conjunction with proper medical and voice therapy against GER and vocal abuse.
Among 120 U. maydis strains isolated in Korea 14 different strains containing specific viral dsRNA segments were analyzed for the distribution of dsRNA and the production of toxin protein. Several distinctive dsRNA patterns were identified, 9 cases of P type with typical H, M and L ds RNA and one case of non-P-type, the frequency of a specific isolate was decreased with increasing number of dsRNA segments. The presence of dsRNA had no effect on the cultural or morphological phenotype of the host. Two isolates containing P type dsRNA segments appeared to produce toxin protein (killer strains) which inhibited the growth of 4 isolates (sensitive strain) with different susceptibility. Two killer strains contain unique M dsRNA segment which may code for toxin protein. However, the presence of toxin-sensitive strains among dsRNA-free isolates was similar to that of ds RNA containing strains.
Journal of the Korean Society of Laryngology, Phoniatrics and Logopedics
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v.30
no.1
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pp.9-11
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2019
Botulinum toxin (BTX) has been widely used to treat muscle spasms in many voice disorders. Most commercially available forms of BTX require reconstitution before use, which may increase the risk of contamination and requires careful titration. Recently, a liquid-type BTX type A (BTX-A) has been developed, which should simplify the procedure and enhance its efficacy. In this session, I will discuss about the differences of BTX-A from existing types and the practical issues associated with it.
The neurotoxin of Clostridium botulinum type B was purified from a liquid culture. The purification steps consist of ammonium sulfate precipitation of whole culture, treatment of Polymin P(0.15%, v/v), gel filtration on Sephadex G-100 at pH5.6 and DEAE-Sephadex charomatography at pH8.0. The procedure recovered 17% of the toxin assayed in the starting culture. The toxin was homogeneous by sodium dodecyl sulfate(SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis and had a molecular weight of 163, 000. Subunits of 106, 000 and 56, 000 molecular weight were found when purified toxin was treated with a disulfide-reducing agent and electro phoresed on SDS-polyacrylamide gels.
Synaptobrevin is a kind of vesicle associated membrane proteins (VAMPs) which plays a secretary role in the neuronal synapse and was recently known as the biochemical target of botulinum neurotoxin type B. The structural gene of the synaptobrevin was cloned from mouse brain using RT-PCR technique and was seqrtenced. The deduced amino acid sequence showed that the synaptobrevin protein from mouse brain is exactly the same with that of the rat brain in the amino acid level. The synaptobrevin gene was subcloned into pET3a vector and expressed in E. coli. The molecular weight of the recombinant protein was 19 kDa as expected. Moreover, when the recombinant synaptobrevin protein was incubated with the native neurotoxin of Clostridium botulinum type B, it was cleaved by the toxin in a time dependent manner. This implies that the recombinant synaptobrevin protein and the native toxin are reacted in the same way as the native synaptobrevin did in the neuronal cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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