Objectives This study was designed to investigate whether the Cheongajihwang-Tang (CT) has an inhibitory effect association with oxidation or inflammation in RAW264.7 cells. Methods Cytotoxic activity of CT extract on RAW264.7 cells was evaluated by using 3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) solution. Nitric oxide production was measured using Griess reagent system. The total phenolic contents and 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity was measured to evaluate the anti-oxidative effects of CT. Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) has been used as a substrate for measuring intracellular oxidant production. Results Cheongajihwang-Tang does not impair the cell viability in tested concentration. CT showed anti-oxidative effects in vitro by decreasing electron donating ability, and also showed anti-inflammatory effects suppressing NO and ROS expression in LPS induced RAW264.7 activation. CT inhibited the generation of intracellular ROS production as dose dependant manner. Conclusions CT has anti-oxidative effects and anti-inflammatory activities. These results indicate that CT extract has an anti-inflammatory activities via anti-oxidative effects.
Objectives: This study was undertaken to investigate the effects of Gugijagami-bang (GGB) in a hyperlipidemic animal model induced by a high-fat diet using diverse biological methods. Methods: This study was to determine whether fractionated GGB extracts inhibit reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) in RAW 264.7 cells. Hyperlipidemia was induced by a high-fat diet fed for 6 weeks. Total cholesterol, LDL cholesterol, HDL cholesterol, triglyceride, liver function and histologic change of liver were measured after oral administration of GGB. Results: 1. DPPH scavenging bow performance was increased in a concentration-dependent manner by GGB. 2. Compared to the control group, NO production (%) and ROS production (%) were decreased significantly by GGB. 3. Total-cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride were decreased significantly by GGB. 4. HDL cholesterol increased more than the control group, but not significantly. 5. In histopathologic examination, fatty liver (hepatic steatosis) was inhibited, almost no rounds of fat were observed in the liver. Conclusions: GGB would appear effective in the prevention and treatment of atherosclerosis, ischemic heart disease, other cardiovascular diseases caused by hyperlipidemia.
(-)-Epicatechin gallate (ECG) is a polyphenol compound of green tea exhibiting biological activities, such as antioxidant and anticancer effects. To examine the effect of ECG on porcine oocytes during in vitro maturation (IVM), oocytes were treated with 0-, 5-, 15-, and $25{\mu}M$ ECG. After maturation, we investigated nuclear maturation, intracellular glutathione (GSH) and reactive oxygen species (ROS) levels and subsequent embryonic development after parthenogenetic activation (PA) and in vitro fertilization (IVF). After 42 hours of IVM, the $5{\mu}M$ group exhibited significantly increased (p< 0.05) nuclear maturation (89.8%) compared with the control group (86.1%). However, the $25{\mu}M$ group observed significantly decreased (p< 0.05) nuclear maturation (83.5%). In intracellular maturation assessment the 5-, 15-, and $25{\mu}M$ groups had significantly increased (p< 0.05) GSH levels and decreased ROS levels compared with the controls. The 5- and $15{\mu}M$ group showed significantly increased (p< 0.05) embryo formation rates and total cell number of blastocysts after PA (18% and 68.9, 15% and 85.1 vs. 12% and 59.5, respectively) compared with controls. Although the $25{\mu}M$ group observed significantly lower blastocyst formation rates after PA (27.6% vs. 23.2%) than control group, the $5{\mu}M$ group showed significantly increased blastocyst formation rates after PA (37.2% vs. 23.2%) compared to the control group. Furthermore, the $5{\mu}M$ group measured significantly increased blastocyst formation rates (20.7% vs. 8.6%) and total cell number after IVF ($88.3{\pm}1.5$ vs. $58.0{\pm}3.6$) compared to the control group. The treatment of $5{\mu}M$ ECG during IVM affectively improved the porcine embryonic developmental competence by regulating intracellular oxidative stress during IVM.
In order to reveal the aluminum (Al) stress tolerance mechanisms in alfalfa plant at low pH soil, a proteomic approach has been conducted. Alfalfa plants were exposed to Al stress for 5 days. The plant growth and total chlorophyll content are greatly affected by Al stress. The malondialdehyde (MDA) and $H_2O_2$ contents were increased in a low amount but free proline and soluble sugar contents, and the DPPH-radical scavenging activity were highly increased. These results indicate that antioxidant activity (DPPH activity) and osmoprotectants (proline and sugar) may involve in ROS ($H_2O_2$) homeostasis under Al stress. In proteomic analysis, over 500 protein spots were detected by 2-dimentional gel electrophoresis analysis. Total 17 Al stress-induced proteins were identified, of which 8 protein spots were up-regulated and 9 were down-regulated. The differential expression patterns of protein spots were selected and analyzed by the peptide mass fingerprinting (PMF) using MALDI-TOF MS analysis. Three protein spots corresponding to Rubisco were significantly down-regulated whereas peroxiredoxin and glutamine synthetase were up-regulated in response to Al stress. The different regulation patterns of identified proteins were involved in energy metabolism and antioxidant / ROS detoxification during Al stress in alfalfa. Taken together, these results provide new insight to understand the molecular mechanisms of alfalfa plant in terms of Al stress tolerance.
Objectives : This study was undertaken to investigate the effects of Samulhwalhyeol-tang (SM) in a hyperlipidemic animal model induced by a high-fat diet using diverse biological methods. Methods : This study was to determine whether fractionated EtOH extracts of SM inhibit reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) in RAW 264.7 cells. Hyperlipidemia was induced by a high-fat diet fed for 6 weeks. Total cholesterol, LDL cholesterol, HDL cholesterol, triglyceride, glucose, liver function, cholesterol gene revelation control efficiency, and histologic change of liver were measured after oral administration of SM. Results : 1. Compared to the control group, ROS production (%) and NO production (%) were decreased significantly by SM. 2. Total cholesterol, LDL cholesterol, triglyceride were decreased significantly by SM. 3. HDL cholesterol was increased significantly by SM. 4. Rats' body weight and glucose were decreased significantly by SM. 5. AST, ALP were decreased significantly by SM. 6. In histopathologic examination, fatty liver and fiver fibrosis were inhibited, almost eliminated as round of fat was observed in the liver. Conclusions : SM would appear that effective in the prevention and treatment of atherosclerosis, ischemic heart disease, other cardiovascular diseases, fatty liver and nephrotic syndrome caused by hyperlipidemia.
The aim of the present study was to investigate the antioxidant efficacies between extracts of Prunus yedoensis(PY) and Betulae platyphyllae var. japonica(BP). HPLC pattern was different between barks and extract solvents. Content of total phenolic compound was the highest in ethanol extract of BP(382.201 mg/g ext.) and its content was 1.9 times higher than that from the water extract of PY. Total antioxidant efficacy also was the highest in ethanol extract of BP (292 copper reducing equivalents). Nitric oxide scavenging activity was almost 70% in ethanol extract of BP treated 200 ug/ml and it was higher than positive control(ascorbic acid). DPPH radical scavenging ability was up by 80% in all samples. ABTS cation decolorization from each barks was activated over 85% in all samples at 100 ug/ml concentration, especially, the activity was the highest (94.4%) in ethanol extract of BP. Hydrogen peroxide scavenging activities were also highest (45%) in ethanol extract of BP at 200 ug/ml concentration and were as high as positive control. Stimulation of the macrophages RAW 264.7 cells with lipopolysaccharide (LPS) increased intracellular ROS levels and ethanol extract of BP at 200 ug/ml concentration reduced ROS levels up to 41 %. The results indicated that the barks of PY and BP has potent antioxidant activities and ethanol extract of BP of them has the highest antioxidant activities.
Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) has become the most prevalent liver disease in parallel with worldwide epidemic of obesity. Reactive oxygen species (ROS) contributes to the development and progression of NAFLD. Peroxisomes play an important role in fatty acid oxidation and ROS homeostasis, and catalase is an antioxidant exclusively expressed in peroxisome. The present study examined the role of endogenous catalase in early stage of NAFLD. 8-week-old male catalase knock-out (CKO) and age-matched C57BL/6J wild type (WT) mice were fed either a normal diet (ND: 18% of total calories from fat) or a high fat diet (HFD: 60% of total calories from fat) for 2 weeks. CKO mice gained body weight faster than WT mice at early period of HFD feeding. Plasma triglyceride and ALT, fasting plasma insulin, as well as liver lipid accumulation, inflammation (F4/80 staining), and oxidative stress (8-oxo-dG staining and nitrotyrosine level) were significantly increased in CKO but not in WT mice at 2 weeks of HFD feeding. While phosphorylation of Akt (Ser473) and $PGC1{\alpha}$ mRNA expression were decreased in both CKO and WT mice at HFD feeding, $GSK3{\beta}$ phosphorylation and Cox4-il mRNA expression in the liver were decreased only in CKO-HF mice. Taken together, the present data demonstrated that endogenous catalase exerted beneficial effects in protecting liver injury including lipid accumulation and inflammation through maintaining liver redox balance from the early stage of HFD-induced metabolic stress.
This study was performed to investigate the antioxidant and antidyslipidemic effects of Artemisiae iwayomogii Herba, Curcumae longae Radix and Plantaginis Semen complex extract(ACP) on HepG2 cells. We measured total polyphenols, total flavonoids, radical scavenging activity, and ABTS radical scavenging activity of ACP to evaluate its antioxidant activity. HepG2 cells were treated with ACP. Then, we evaluated ROS production; intracellular GSH content; GPx, GR, SOD, and catalase activities; free fatty acids and MDA levels; and mRNA expression levels of ACAT1 and HMG-CoA reductase. Results: ACP contains polyphenols and flavonoids and increased the DPPH and ABTS radical scavenging activities in HepG2 cells in a dose dependent manner. Also, ACP significantly reduced ROS production in HepG2 cells compared to the control group and significantly increased the GSH content, and elevated the enzyme activities of GPx, GR, and catalase in HepG2 cells compared to the control group. In addition, ACP reduced the mRNA expression of ACAT1 and HMG-CoA reductase in HepG2 cells compared to that in the control group. Conclusion: These results suggest that ACP has an antioxidant effect and may suppress the expression of dyslipidemia - associated genes and thus may be useful for the improvement of dyslipidemia.
Oxidative stress derived from excess reactive oxygen species (ROS) is a major damaging factor for plants exposed to environmental stresses. Sweetpotato [Ipomoea batatas (L.) Lam] has a relatively broad adaptability to harsh environmental conditions compared to other staple crops. In this study, to select stress-tolerant sweetpotato cultivars for sources of molecular breeding on marginal lands, we evaluated the ion leakage values in 10 different cultivars after treatment of methyl viologen (MV), an ROS-generating nonselective herbicide, to leaf discs. DPPH radical scavenging activity and the contents of total phenolics were also investigated. The ion leakage of each cultivar showed a diverse value, which is well correlated with DPPH radical scavenging activity of each cultivar. DPPH radical scavenging activity also showed a high corelation with the contents of total phenolic contents. Three cultivars of Yanshu 8, Shinhwangmi and Shinzami showed high antioxidant activity. Our results suggest that a simple and efficient DPPH radical scavenging activity would be a suitable method to select potential cultivars with enhanced tolerance to multiple environmental stress.
All the parts of the Cedrela sinensis A. Juss., including the seeds, roots, and leaves, have been known to exert medicinal effects. The C. sinensis and its major compound, quercetin, were previously reported to exhibit the anti-inflammatory and anti-oxidative activities. However, the hepatoprotective effects of the C. sinensis leaves against the alcohol-induced oxidative stress in the HepG2 cells have not been studied. In this study, we investigated the antioxidant activities and analyzed the flavonoid contents of the C. sinensis-leaf extract (CE). The total flavonoid contents of the CE is 1,874.5 mg/100 g dry weight (DW), while the total quercetin 3-O-rhamnoside (quercitrin) contents, which was identified as the major flavonol in the CE, is 1,456.0 mg/100 g DW. In the ethanol-stimulated HepG2 cells, the CE effectively prevented the cytotoxic effect and increased the gene expression of the antioxidant enzymes, such as the heme oxygenase-1 (HO-1) and the glutathion peroxide (GPx). The level of the reactive oxygen species (ROS) production was significantly decreased in the CE-treated HepG2 cells. In conclusion, the C. sinensis extract suppressed the alcohol-induced oxidative stress in the HepG2 cells via the induced GPx and HO-1 gene expressions. It is expected the CE positive effects will likely be attributed to the flavonoids, like the quercetin, within the CE.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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