Hidayat, Sri Hendrastuti;Haryadi, Dedek;Nurhayati, Endang
The Plant Pathology Journal
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제25권4호
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pp.328-332
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2009
Diseases caused by Pepper yellow leaf curl virus infection is considered to be emerging plant diseases in Indonesia in the last five years. One key factor for disease management is the availability of accurate detection of the virus in plants. Polyclonal antibody for Pepper yellow leaf curl Indonesia virus-Bogor (PYLCIV-Bgr) was produced for detection of the virus using I-ELISA and DIBA methods. The antibody was able to detect PYLCIV-Bgr from infected plants up to dilution 1/16,384 and cross reaction was not observed with Cucumber mosaic virus (CMV), Tobacco mosaic virus (TMV), and Chilli veinal mottle virus (ChiVMV). Positive reaction was readily detected in membrane containing Begomovirus samples from Yogyakarta (Kaliurang and Kulonprogo) and West Java (Bogor and Segunung). Infection of PYLCIV-Bgr in chillipepper, tomato, and Ageratum conyzoides was also confirmed using polyclonal antibody for PYLCIV-Bgr in DIBA. Polyclonal antibody for PYLCIV-Bgr is suggested to be included in disease management approach due to its good detection level.
우리나라 파프리카에 발생하는 주요 바이러스는 오이모자이크바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV), 고추모틀바이러스(Pepper mottle virus, PepMoV), 잠두위조바이러스2(Broad bean wilt virus2, BBWV2), 고추약한모틀바이러스(Pepper mild mottle virus, PMMoV), 토마토반점위조바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV) 및 사탕무황화바이러스(Beet western yellows virus, BWYV) 등 6종이다. 생산량 감소 및 고품질 규격품 생산의 가장 큰 제한요인이 되고 있는 바이러스병의 피해를 최소화하기 하기 위하여 바이러스별 병징 및 발생원인에 따른 예방법을 알아본다.
우리나라에서 주로 재배되는 가지과작물의 종자 전염 병원균 중에서 세균성 병원균 Xanthomonns campestris pv. vesicatoria(Xcv), Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm), Erwinia carotovora subsp. carotovora (Ecc)와 바이러스 병원균 Pepper mild mottle virus (PMMoV) and Tobacco mild green mosaic virus (TMGMV)를 종자로부터 동시검출하기 위한 One-step Multiplex RT-PCR을 개발하였다. 각각의 병원균을 특이적으로 증폭시키는 병원균 검출용 프라이머 15세트를 primer-blast 프로그램을 이용하여 제작하였고 각각의 병원균을 특이적으로 검출할 수 있는 5세트의 프라이머 세트(Cmm-F/R, Ecc-F/R, Xcv-F/R, PMMoV-F/R, TMGMVF/R)를 선발하였다. 이들 프라이머 세트는 프라이머간의 또는 병원균 cDNA간의 간섭없이 타겟 병원균만을 검출하였다. 가지과 작물 중에서 유통 중인 고추종자 20품종과 토마토종자 10품종에 대한 종자 감염 병원균 검출을 위한 PCR을 수행한 결과, 2개 품종의 토마토종자에서 Ecc가 검출되었고 4개 품종의 고추종자에서도 Ecc가 검출되었다. 특히 고추 종자에선 Ecc가 검출된 4개 품종 외에 1개 품종에서 PMMoV, TMGMV가 동시 검출되었다. 이로 인해 개발된 One-step multiplex RT-PCR은 서로 간섭 현상 없이 병원균을 효율적으로 검출할 수 있음을 보여 주었다.
A defective RNA3 (D3Yα) of strain Y of cucumber mosaic virus (CMV-Y) was examined on host-specific maintenance, experimental conditions, and a viral factor required for its generation in plants. D3Yα was stably maintained in cucumber but not in tomato plants for 28 days post inoculation (dpi). D3Yα was generated in Nicotiana tabacum or N. benthamiana after prolonged infection in the second and the third passages, but not in plants of N. benthamiana grown at low temperature at 28 dpi or infected with CMV-Y mutant that had the 2b gene deleted. Collectively, we suggest that generation and retention of D3Yα depends on potential host plants and experimental conditions, and that the 2b protein has a role for facilitation of generation of D3Yα.
시판중인 18품종의 토마토 종자에 대하여 TMV, ToMV, CMV의 오염률과 종자 전반률을 조사한 결과 TMV와 ToMV는 각각 9품종에서 오염이 확인되었으며, CMV는 3품종에서 바이러스 오염을 확인하였다. TMV는 3.8%로 가장 높은 오염률을 보였고, ToMV는 2.6%, CMV는 1.4%의 오염률을 보였다. 자연적인 종자 전반률을 조사한 결과, 공시한 9품종의 토마토종자에서 ToMV는 3품종에서 4.4%, CMV는 4품종에서 2.2%의 종자 전반률을 확인할 수 있었으며, TMV는 본실험에서는 종자 전반을 확인할 수 없었다. 1999년 10월부터 2000년 10월까지 충청북도 주요 토마토 재배지역에서 TMV, ToMV CMV의 지역별 바이러스 감염률과 병정별 감염률 및 생육시기에 따른 세 바이러스의 감염률을 조사한 결과, 각 지역의 토마토 포장에서는 잎말림, 괴저 및 왜화 등의 다양한 병징을 보였으며, 대부분의 포장에서 잎말림 증상이 관찰되었으며, 모자이크 증상과 누렁증상 등의 병징도 많이 관찰되었으며, 로꾸산마루 품종에서 다양한 병징이 관찰되었다. 지역별로는 옥산 지역의 로꾸산마루 포장과 가금지역의 꼬꼬 포장 및 노은지역의 로꾸산마루 포장에서 TMV와 ToMV 및 CMV의 감염률이 높았으며, ToMV의 감염률은 가금지역의 꼬꼬 포장에서 43.3%로 가장 높았으며, CMV의 감염률은 노은지역의 로꾸산마루 포장에서 40.0%로 다른 포장보다 높았다. 병징에 따른 바이러스의 감염률은 누렁증상을 보이는 병징에서 ToMV가 가장 높았고, 괴저 증상을 보이는 잎에서는 CMV가 가장 높았으며, 잎말림 과총생 및 얼룩무늬 등 대부분의 병정에서 ToMV의 감염을 확인하였고, TMV의 감염률은 낮았다. 생육단계별에 따른 바이러스 감염률을 조사한 결과 생육초기보다 생육중기와 후기가 바이러스의 오염률이 높았으며, 생육중기와 생육후기의 감염률은 차이가 없었다.
A Tomato spotted wilt virus (TSWV-KP) was isolated from Paprika (Capsicum annuum var. grossum) showing necrosis spot on the leaves and malformation of the fruit in Yesan, Korea. The virus infected Chenopodium amaranticolor, C. quinoa, Petunia hybrida, Nicotiana glutunosa, Gomphrena globosa, and Physalis floridana. Ten plants including tomato were observed to have systemic TWSV-KP infection. The virus produced necrosis or necrotic ring spots on the inoculated leaves and mosaic, vein necrosis or death on the upper leaves of Datura stramonium, N. clevarandii, N. rustica, and N.tabacum cvs. Thin sections of the infected leaf tissue contained spherical to oval particles, a characteristic of a Tospovirus. The virion contained three molecules of genomic RNAs, which were approximately 9.0, 4.9 and 3.0 kb. The nucleocapsid (N) protein of the purified virion migrated as a single band with molecular weight of about 29 kDa in SDS-PAGE. The N gene of TSWV-KP showed 96.5-97.2% and 97.7-98.5% identities to the three different TSWV isolates of Genbank Database at the nucleotide and amino acid, respectively.
Capsicum annuum (CA) is grown outdoors across fields in Jeollabuk-do, South Korea. The weeds surrounding these fields were investigated regarding the infection of 11 viruses infecting CA during the year 2014-2018. In the reverse transcription polymerase chain reaction diagnosis, 546 out of 821 CA samples (66.5%) were infected by nine viruses, and 190 out of 918 weed samples (20.7%) were infected by eight viruses. Correlation analysis of the mutual influence of the viruses infecting CA and weeds during these 5 years showed that five viruses had significant positive correlations with the infection in both CA and weeds. Over the study period, the weeds infected by cucumber mosaic virus (CMV) in the previous year were positively correlated with the incidence of CMV infection in CA in the current year, although the correlation was lower for tomato spotted wilt virus (TSWV) compared to CMV. The CMV infection percent was 14.0% in summer annuals, 11.4% in perennials, and 7.8% in winter annuals. However, considering the overwintering period without CA, the infection percent was 5.2% higher in winter annuals and perennials than that in summer annuals, indicating that winter annual and perennial weeds served as the main habitats for insect vectors. The TSWV infection percent in weeds was 10.4% in summer annuals, 6.4% in winter annuals, and 6.2% in perennials. The weeds surrounding CA fields, acting as the intermediate hosts, were found to be the potent sources of infection, influencing the spread and diversity of CA-infecting viruses. The results of this study can contribute to prevent viral infection in agricultural fields.
We conducted a survey on pepper virus diseases in 31 regions in Korea from November 2001 to December 2004. Using electron microscopy, test plant reaction, rapid immuno-filter paper assay (RIPA), reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and/or analysis of viral nucleotide sequences, we found a number of viruses from 1,056 samples that we collected. These included Cucumber mosaic virus (CMV), Pepper mottle virus (PepMoV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), Tobacco mild green mosaic virus (TMGMV), and Tomato spotted wilt virus (TSWV). Of the samples analyzed, $343(32.5\%)$ were infected with CMV, $209(19.8\%)$ with PepMoV, $141(13.4\%)$ with PMMoV, $12(1.1\%)$ with BBWV2, $40(3.8\%)$ with TMGMV, $5(0.5\%)$ with TSWV, $153(14.5\%)$ with CMV and PepMoV, $54 (5.1\%)$ with CMV and PMMoV, $31(2.9\%)$ with PepMoV and PMMoV, $3(0.3\%)$ with CMV and BBWV2, $1(0.1\%)$ with CMV, PepMoV and BBWV2, $8(0.8\%)$ with CMV, PepMoV and PMMoV, and $30 (2.8\%)$ samples were infected with viruses which were not identified. CMV was the most predominant virus in all inspected fields and the number of the samples infected with PMMoV was relatively low as compared PepMoV infection level in pepper. TMGMV was only found in the southern part of Korea, while TSWV was isolated in Anyang and Yesan. However, we did not encounter in this survey the Alfalfa mosaic virus (AMV), Potato virus Y (PVY), Tobacco mosaic virus (TMV), and Pepper vein chlorosis virus (PVCV).
To ascertain the effect of over-expressed maize calreticulin in tomato plant on tobamovirus movement in addition to validating potentiality of the gene (ZmCRT) as a means for the virus-resistance resource, four ZmCRT-expressing homozygous lines were generated from the T0 plants as using an Agrobacterium-mediated transformation, nucleic acid analyses, and a conventional breeding method. Of them, a line was subjected to the bioassay for tolerances to tobacco mosaic virus-U1 (TMV-U1) and tomato mosaic virus (ToMV) followed by RT-PCR and a chlorophyll fluorescence quenching analyses. Both transgenic plants transcribing ZmCRT and wild-type plants showed no symptom by 20 days after viruses inoculation, however the photosystem II quantum yield parameter measured from the upper leaves of ToMV-inoculated plants revealed that ZmCRT transgenic plants have higher photosynthetic ability than wild-type ones at that time, which indirectly implies that over-expressed ZmCRT product acts as a barrier to the cell-to-cell and/or systemic movement of ToMV. Moreover, ZmCRT transgenic plants showed remarkably longer shoot length than wild-type ones in 40 days after TMV-U1 or ToMV inoculation each, which might be resulted from higher photosynthetic ability during the phase not yet showing any external symptoms. Collectively, over-expressed ZmCRT protein in tomato plants is able to interrupt the systemic movement of infected TMV-U1 and ToMV even though not perfect.
Cucumber mosaic virus (CMV) belongs to genus Cucumovirus. The Cucumovirus group contains three distinct members: CMV, Tomato aspermy virus (TAV), and Peanut stunt virus (PSV). The type member, CMV is the most widespread and most studied. CMV is isometric particles about 30 nm in diameter. The genome of CMV is divided into three RNAs. In addition, RNA extracted from virus particles contains a fourth RNA that is a subgenomic RNA generated from RNA3. RNA1 and RNA2 are each encapsidated in separate particles, whereas RNAs3 and 4 are coencapsidated in a third particle. Hence, inoculation by three particles, transmitted either mechanically or by the aphid vector, is required to infect plants.(중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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