Taurine has been shown to be tissue-protective against oxidant-induced injury and is a powerful regulator of the immune system. However, there is no study on the antimelanogenic effect of taurine. In this study, we investigated the whitening effect of taurine in B16F10 mouse melanoma cells. Cell viability was measured by MTT assay. We examined melanin contents and tyrosinase activity according to time and concentration. Extracellular signal regulated kinase (ERK) is an important regulator of melanogenesis. It has been reported that activated ERK induced microphthalmia associated transcription factor (MITF) phosphorylation and its subsequent degradation and thus reduced melanin synthesis. In our B16F10 cell culture system, taurine led to decrease melanin contents by 21% at 48 hr. We then observed taurine effects on ERK-P, MITF and tyrosinase by Western blot. ERK was activated at 18 hr and 24 hr, whereas MITF reduced. We could not observe any differences in the levels of tyrosinase. These results suggested that taurine inhibited melanogenesis by ERK signal pathway via MITF degradation. We expect that taurine has potential skin whitening agents in cosmetics.
Protoplasts were isolated from mesophyll of tobacco(Nicotiana glauca) transformed with kanamycin-resistant gene (NPT II gene) and potato hairy root callus containing Ri plasmid of Agrobacterium rhiEogenes, and protoplasm fusion was made between the isolated protoplasts. The transgenic tobacco leaf tissue could grow on the media containing high concentrations of kanamycin, but not on the phytohormone-free media. On the other hand, the potato hairy root calli could be cultured on the phytohormone-free media but not on media containing more than 40 ㎍/ml kanamycin. In these conditions, the viability of both protoplasts were above 90%, These selection markers were used for the selection of protoplasts fused between the two, i.e. protoplast fusion was detected using selection media containing 100㎍/ml kanamycin and with no phytohormone. The mixture of 1.0% cellulase, 0.3% macerozyme, and 0.7M mannitol was best for the maximum protoplast production for tobacco, and that of 2.0% cellulase, 2.0% macerozyme, 1.0% dricelase, and 0.5M mannitol for potato. Both tobacco mesophyll and potato callus protoplasts were fused by using PEG solution on the selectable medium. Cell walls were regenerated after 5 days in this medium, and colonies were alive until 4 weeks after cultural, but died after 6 weeks.
This study reports significant improvement of atopic dermatitis condition as a result of experiment using Xanthium strumarium L. extract (XS-E) at the dorsal skin of induced atopic dermatitis Nc/Nga mice. Skin clinical score has decreased ($2.75{\pm}0.85$, *p<0.05), showing visible change of skin condition. IgE (***p<0.001) and IgG1 ($2522.00{\pm}32.80$, ***p<0.001) in plasma also decreased significantly. mRNA (gene expression) level increased ($RQ=2.75{\pm}0.10$, ***p<0.001) within skin tissue of CD4+CD25+Foxp3+ Treg cell that's activated by XS-E dosage, thereby discovering that there is an effect of suppressing proliferation and viability of Th2 cell, eosinophils, mast cell and inflammatory cell. Upon examining cells permeated with H&E and toluidine blue staining technique, thickness of epidermis and mast cell's permeation decreased, and the result of examining the distribution of CCR 3+ eosinophils within ALN showed that it's level fell down to that of wild type (normal group, NC/Nga-WT). By such results, it is suggested that XS-E is highly effective on atopic dermatitis, and it is considered that continued quantitative research and case study of clinical research such as effect of cell number in individual tissues or change of total cell number are necessary.
Journal of The Korean Society of Integrative Medicine
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v.8
no.3
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pp.53-62
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2020
Purpose :Periodontal ligament stem cells maintain tissue homeostasis in periodontal ligament. The purpose of this study was to determine the characteristics of periodontal ligament stem cells isolated from premolar teeth and observe protective effects against oxidative damage caused by Triethylene glycol dimethacrylate (TEGDMA) following treatment with N-acetylsysteine amide (NACA) drug known as enzymatic antioxidants. Methods : Primary periodontal ligament stem cell (PDSC) culture was performed from simply extracted human premolar of orthodontic patients. The characteristics of the primary cultured PDSCs was analyzed using the FACS system. PDSCs was incubated with TEGDMA and NACA. The cell proliferation and survival was determined using WST-1 assay. Collected data were analyzed using SPSS Window 20. Results : Primary cultured PDSCs grow on the floor and develop rapidly in a cluster form from up to 14 days. The morphology of PDSCs showed the spindle-shaped cells and grew directionally. FACS analysis, In addition, positive expression of visible cells were observed in mesenchymal stem cell biomarkers. PDLSCs cell viability was significantly decreased at high concentration in both 3 and 6 hours after TEGDMA treatment. We observed a decrease in the number of cells as well as a morphological change of PDLSCs. Antioxidative effect was notable since the death of PDLSC death was significantly inhibited compared to the control group at 24 and 48 hours after NACA treatment. Conclusion : Therefore, based on the results of this study, further research should be encouraged considering the development of clinical treatment methods using various antioxidants as well as regenerative engineering techniques utilizing periodontal ligament stem cells.
The purpose of this study was to evaluate the genotypic characterization of Actinobacillus actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans) using arbitrarily primed polymerase chain reaction (AP-PCR), to investigate the cytotoxicity of both clinical isolates and standard strains of A. actinomycetemcomitans for the human Jurkat T cells, and to measure the osteoclastogenic cytokines released by Jurkat cells infected with these bacterial strains. The random sequence primer 15 and 16 could distinguish different AP-PCR profiles between clinical isolates of A. actinomycetemcomitans. A. actinomycetemcomitans significantly suppressed Jurkat cell viability in time dependent fashion and the results of DNA fragmentation assay indicated that this bacterial species induced apoptosis in Jurkat cells undergoing apoptosis released the osteoclastogenic cytokine, IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$. These data support the hypothesis that induction of apoptosis is at least one essential step in A. actinomycetemcomitans induced local immunosuppressive pathway, and that A. actinomycetemcomitans can modulate the immunomodulatory cell population in the periodontal tissue by inducing T cell death through apoptosis, and that apoptosis of local resident T cells may play an active role in bone resorption by releasing osteoclastogenic cytokines, e.g. IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$.
Jabed Md. Anower;Kamal Tania;Lee Seung-Min;Kim Byung Ki
Reproductive and Developmental Biology
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v.29
no.4
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pp.241-245
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2005
Porcine oviduct epithelial cells (POEC) are widely used in co-culture experiments to improve early embryonic development, in vitro fertilization in embryo transfer programs for domestic animals and in vitro maturation of immature germ cells. POEC were mechanically isolated and cultured in tissue culture medium 199. Cells grew continuously, and confluent monolayers were formed after 7 days. After forming confluent monolayer of epithelial cells, supernatant was collected as the condition medium for maturing round spermatids in vitro. Round spermatids were also separated mechanically and cultured in the POEC condition medium. In this study we observed that $20\%$ of round spermatid cultured were matured into elongating spermatid after 24 h, and about $10\%$ of round spermatid cultured showed complete elongation (elongated spermatid) within $24\~48$ h of in vitro culture. No further development was observed within $50\~72$ h and transformed cells lost their viability after 72 h. These preliminary findings suggest that the condition medium from POEC may be possible to overcome the round spermatid block by improving the milieu of culture system.
Kim, Kyung-Ah;Kim, Mee-Jeong;Ryu, Chung-Kyu;Chang, Moon-Jeong;Chung, Jin-Ho
Archives of Pharmacal Research
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v.18
no.4
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pp.256-261
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1995
The elevation of intracellular $Ca^{2+}$ in various tissue through oxidative stress induced by menadione has been well documented. Increase of $Ca^{2+}$ level inplatelets results in aggreaction of patelets. To test the hypothesis that menadione-induced $Ca^{2+}$ elevations can play a role in platelet aggregation, we have studied the effect of menadione on aggragation of platelets isolated from female rats. Treatment with menadione to platelet rich plasma (PRP), which proved to be 60% as determined by aggregometry. however, exposure of PRP to menadione leads to a loss of cell viability, as measured by lactae dehydrogenase (LDH) leakage, suggesting that menadione might induce cell lysis rather than aggregation of platelets. Turbidty changes induced by menadione were unaffected by addition ofl dicoumarol, which is a quinone reducellular factions of patelets. These data, which indicate an absence of the QR detoxifying pathway, suggest that platelets may be more susceptible to menadione-induced cytotoxicity than certain other cell, as hepatocytes.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.21
no.1
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pp.70-82
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2008
Objective : The purpose of this study is to examine the effects of Baickbujasan(BB) on the skin damage and depigmentation. Method : The inhibition of tyrosinase activity, melanogenesis and cell viability in cultured B16 melanoma cells were measured. In order to test effects of reduction of melanogenesis, B16 F-10 mouse melanoma stem line was employed to extract melanin from cultured cell, where BB was added or not, and was dissolved in alkali for colorimetric analysis. Also, in order to test skin alteration in C57BL/6 after UV irradiation, the animals were grouped into a UV urradiation group and UV irradiation after BB application group. Dopa oxidase tissue staining was excuted to invesitage the change in the distribution of active melanin cell. The distribution of active melanin cell in inner skin of iNOS after damage from UVB irradiation and the manifestation condition of P53 which takes part in natural death of keratinocyte were examined. Result : The results indicate that BB has significant effects on tyrosinase activity, and melanogenesis in vivo test. BB seems to reduce C57BL/6, external dermatological damage, for instance, erythematous papule, eczema, loss of keratinocyte, reduction in pus, and relieves dermatological damages. Conclusion : BB can be applied externally for UV protection and depigmentation.
Chitosan is a biodegradable and non-toxic material with a molecular weight of 800-1,500Kd which can be obtained in various forms with extraordinary chemical structures and biological characteristics of which enables it to be used in many fields as a biomaterial. Ion irradiation is a useful tool to modify chemical structures and physical properties of high molecular weight polymers. The basic hypothesis of this study is that when surface properties of chitosan in a sponge form are modified with ion beam-irradiation and cell adhesion properties of chitosan would improve and thereby increase the regenerative ability of the damaged bone. The purpose of this study was to illuminate the changes in the cytocompatibility of chitosan sponges after ion beam-irradiation as a preliminary research. Argon($Ar^+$) ions were irradiated at doses of $5{\times}10^{13}$, $5{\times}10^{15}$ at 35 keV on surfaces of each sponges. Cell adhesion and activity of alkaline phosphatases were studied using rat fetal osteoblasts. The results of this study show hat ion beam-irradiation at optimal doses($5{\times}10^^{13}\;Ar^+\;ion/cm^2$) is a useful method to improve cytocompatibility without sacrificing cell viability and any changing cell phenotypes. These results show that ion beam-irradiated chitosan sponges can be further applied as carriers in tissue engineering and as bone filling materials.
Bovine bone-derived bone substitutes are widely used for treatment of bone defects in dental and orthopedic regenerative surgery. The purpose of this study was to evaluate the basic characteristics of deproteinized bovine bone mineral as a bone graft substitute. Commercially available products from three different bovine bone minerals-Bio-Oss(GeistlichPharma, Switzerland), BBP(Oscotec. Korea), Osteograf/N-300(Dentsply Friadent Ceramed, USA) - were investigated. They were evaluated by scanning electron microscopy(SEM), energy dispersive X-ray spectrometer(EDS), surface area analysis(BET), and Kjeldahl protein analysis. Cell viability on different products was evaluated by 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT) assay. The results of this study indicated that each bone substitute displayed distinct surface properties. Furthermore, Kjeldahl protein analysis indicated that residual crude proteins are present in deproteinized bovine bone mineral. BBP showed relatively large amount of residual protein, which indicated that the possibility of disease transmission can not be safely ruled out. Based on the results of this study, it is suggested that active quality management is strongly needed in operations that involve processing bovine bone tissue for medical use.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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