Purpose: The object of this study was to evaluate the development of continuous osteogenic differentiation and bone formation after the subcutaneous implantation of the tissue-engineered bone, in vitro. Methods: Human adipose-derived stem cells were obtained by proteolytic digestion of liposuction aspirates. Adipose-derived stem cells were seeded in PLGA scaffolds after being labeled with PKH26 and cultured in osteogenic differentiation media for 1 month. The PLGA scaffolds with osteogenic stimulated adipose-derived stem cells were implanted in subcutaneous layer of four nude mice. Osteogenesis was assessed by RT-PCR for mRNA of osteopontin and bone sialoprotein(BSP), and immunohistochemistry for osteocalcin, and von Kossa staining for calcification of extracellular matrix at 1 and 2 months. Results: Implanted PLGA scaffold with adipose-derived stem cells were well vascularized, and PLGA scaffolds degraded and were substituted by host tissues. The mRNA of osteopontin and BSP was detected by RT-PCR in both osteogenic stimulation group and also osteocalcin was detected by immunohistochemistry at osteogenic stimulation 1 and 2 months, but no calcified extracellular deposit in von Kossa stain was found in all groups. Conclusion: In vivo, it could also maintain the characteristics of osteogenic differentiation that adipose-derived stem cells within PLGA scaffold after stimulation of osteogenic differentiation in vitro, but there were not normal bone formation in subcutaneous area. Another important factor to consider is in vivo, heterologous environment would have negative effect on bone formation as.[p1]
Advances in Information Technology and in Biomedicine have created new uses for CAD technology with many novel and important biomedical applications. Such applications can be found, for example, in the design and modeling of orthopedics, medical implants, and tissue modeling in which CAD can be used to describe the morphology, heterogeneity, and organizational structure of tissue and anatomy. CAD has also played an important role in computer-aided tissue engineering for biomimetic design, analysis, simulation and freeform fabrication of tissue scaffolds and substitutes. And all the applications require precision geometry of the organs or bones of each patient. But the geometry information currently used is polygon model with none solid geometry and is so rough that it cannot be utilized for accurate analysis, simulation and fabrication. Therefore a case study is performed to deduce a transformation method to build free form surface from a rough polygon data or medical images currently used in the application. This paper describes the transformation procedure in detail and the considerations for accurate organ modeling are discussed.
Park, Seung-Won;Goo, Tae-Won;Kim, Seong-Ryul;Kweon, Hae-Yong;Kang, Seok-Woo
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제23권2호
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pp.193-199
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2011
Silk protein and agarose are widely known as biocompatible materials in the human body. A three-dimensional (3D) scaffold composed of agarose and low-molecular- weight silk fibroin (LSF) was fabricated and examined in terms of structural characteristics and cellular responses in bone tissue engineering. This study showed that mouse pluripotent precursor cells attached to and proliferated uniformly on and within the LSF-containing 3D scaffold. Interestingly, cell proliferation and attachment was shown to be higher in a 3D scaffold containing 0.02% LSF, as compared to other LSF concentrations. The results of this study suggest that agarose-LSF scaffolds may be useful materials for tissue engineering.
Purpose: To investigate the effects of simultaneous soft and hard tissue augmentation and the addition of polydeoxyribonucleotide (PDRN) on regenerative outcomes. Materials and Methods: In five mongrel dogs, chronic ridge defects were established in both mandibles. Six implants were placed in the mandible, producing buccal dehiscence defects. The implants were randomly allocated to one of the following groups: 1) control: no treatment; 2) GBR: guided bone regeneration (GBR) only; 3) GBR/PDRN: GBR+PDRN application to bone substitute particles; 4) GBR/CTG: GBR+connective tissue grafting (CTG); 5) GBR/VCMX: GBR+soft tissue augmentation using volume stable collagen matrix (VCMX); and 6) group GBR/VCMX/PDRN: GBR+VCMX soaked with PDRN. The healing abutments were connected to the implants to provide additional room for tissue regeneration. Submerged healing was achieved. The animals were euthanized after four months. Histological and histomorphometric analyses were then performed. Results: Healing abutments were gradually exposed during the healing period. Histologically, minimal new bone formation was observed in the dehiscence defects. No specific differences were found between the groups regarding collagen fiber orientation and density in the augmented area. No traces of CTG or VCMX were detected. Histomorphometrically, the mean tissue thickness was greater in the control group than in the other groups above the implant shoulder (IS). Below the IS level, the CTG and PDRN groups exhibited more favorable tissue thickness than the other groups. Conclusion: Failure of submerged healing after tissue augmentation deteriorated the tissue contour. PDRN appears to have a positive effect on soft tissues.
조직 공학에서는 전통적인 인공지지체 제작 방식인 가스 발포, 염 침출, 스폰지 복제 그리고 동결주조 법 등이 이용되고 있다. 하지만 다양한 공극 형태 및 크기를 가지고 있어서 세포 상호 작용 효과 및 충분한 기계적 특성에 한계가 있다. 그러나 열 용해 적층 법은 조직공학에서 폴리머 재료를 이용하여 다양한 3차원 인공지지체를 제작할 수 있는 가장 적절한 기술이다. 따라서 본 연구에서는 PCL 몰드를 제작하고 실리카와 알긴산 나트륨 염을 포함하는 세라믹 슬러리를 제조하여 몰드에 주입시켰으며, 1일 동안 자연 건조를 시켰다. 제작된 3차원 슬러리 몰드는 PCL 몰드의 제거 및 슬러리를 경화시키기 위해 $100^{\circ}C$의 오븐에서 2시간 열처리 되었고, 열처리 후에 $1100^{\circ}C$에서 소결되었다. 제작된 인공지지체는 주사전자현미경을 통해 관찰되었고, 압축 시험을 통해 알긴산 나트륨 염의 혼합량에 따른 인공지지체의 기계적 특성은 평가되었다.
생분해성 고분자인 poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA)를 이용한 조직공학용 다공성 지지체에서의 공극률, 공극의 크기, 공극의 모양 등은 주입된 세포들이 안착하여 증식하는데 있어서 중요한 요건 중 하나이다. 본 연구에서는 섬유를 세포와 다공크기와의 관계를 파악하고자 다공형성물질인 염화나트륨을 다섯 개의 범위로 분류하여 용매캐스팅/염추출법을 이용한 다양한 다공크기를 갖는 다공성 지지체를 제조하였다. (3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium-bromide) (MMT) 분석방법을 이용하여 제조된 지지체에 파종된 섬유륜 세포의 생존율과 증식률을 확인하였으며, in vitro 환경에서의 콜라겐 양과 DNA량을 측정하였다. In vitro 환경에의 세포간의 발생하는 여러 상호작용을 확인하기 위하여 면역결핍 쥐의 피하에 섬유륜 세포가 파종된 지지체를 이식하여 sulfated g1ycosaminoglycan(SGAG)의 합성정도와 조직학적인 평가를 수행하였다. 결론적으로 $180{\sim}250{\mu}m$ 다공크기를 갖는 지지체에서 높은 세포 생존율과 체내에서의 원할한 세포외기질의 형성을 보임으로써 여타의 지지체보다 섬유를 조직 재생에 적절할 것으로 사료된다.
피브리노겐 그리고 콜라겐의 생채재료는 조직재생공학에 널리 사용되고 있다. 이번 연구에서는 이 두 가지 재료를 사용하여 새로운 이중구조지지체를 만들고자 한다. 전략적으로 조직재생은 혈관 재생이 우선이기 때문에 혈관형성에 도움을 주는 피브리노겐 지지체를 이중지지체의 외부로 형성시키고 중앙에는 조직재생에 더욱 더 효과 있는 콜라겐을 위치시킴으로써 새로운 조직 재생의 상승효과를 기대하고 한다. 전례 연구에서는 이 두 가지 재료를 혼용해서 사용하고는 있지만 아직까지 중심구조(Core)시스템의 지지체 구조의 형성으로 지지체를 만들어 보고된 바는 없다. 따라서 이번 연구의 핵심인 이중지지체는 내부는 콜라겐 지지체 외부는 피브리노겐을 위치시킨 중심(Core) 구조 제조 방법을 제시하고자 한다. 실험결과는 이중구조지지체의 전략적인 생분해(Biodegradation)에 기인하여 지지체의 외부에 위치한 피브리노겐은 빠른 생분해와 약물방출이 발생했다. 반면 콜라겐 지지체는 상대적으로 피브리노겐지지체 보다는 약물의 방출 시간을 오래 유지할 수 있는 결과를 보았다. 결론적으로 이중 지지체를 만드는 방법을 적용한다면 결손 조직재생에 상승효과가 있을 것으로 사료된다.
Three-dimensional (3D) printing has been particularly widely adopted in medical fields. Application of the 3D printing technique has even been extended to bio-cell printing for 3D tissue/organ development, the creation of scaffolds for tissue engineering, and actual clinical application for various medical parts. Of various medical fields, craniofacial plastic surgery is one of areas that pioneered the use of the 3D printing concept. Rapid prototype technology was introduced in the 1990s to medicine via computer-aided design, computer-aided manufacturing. To investigate the current status of 3D printing technology and its clinical application, a systematic review of the literature was conducted. In addition, the benefits and possibilities of the clinical application of 3D printing in craniofacial surgery are reviewed, based on personal experiences with more than 500 craniofacial cases conducted using 3D printing tactile prototype models.
Kim, Chun-Ho;Park, Hyun-Sook;Gin, Yong-Jae;Son, Young-Sook;Lim, Sae-Hwan;Park, Young-Ju;Park, Ki-Sook;Park, Chan-Woong
Macromolecular Research
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제12권4호
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pp.367-373
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2004
We have developed a rigorous heat treatment method to improve the biocompatibility of chitosan as a tissue-engineered scaffold. The chitosan scaffold was prepared by the controlled freezing and lyophilizing method using dilute acetic acid and then it was heat-treated at 110$^{\circ}C$ in vacuo for 1-3 days. To explore changes in the physicochemical properties of the heat-treated scaffold, we analyzed the degree of deacetylation by colloid titration with poly(vinyl potassium sulfate) and the structural changes were analyzed by scanning electron microscopy, Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy, wide-angle X-ray diffractometry (WAXD), and lysozyme susceptibility. The degree of deacetylation of chitosan scaffolds decreased significantly from 85 to 30% as the heat treatment time increased. FT-IR spectroscopic and WAXD data indicated the formation of amide bonds between the amino groups of chitosan and acetic acids carbonyl group, and of interchain hydrogen bonding between the carbonyl groups in the C-6 residues of chitosan and the N-acetyl groups. Our rigorous heat treatment method causes the scaffold to become more susceptible to lysozyme treatment. We performed further examinations of the changes in the biocompatibility of the chitosan scaffold after rigorous heat treatment by measuring the initial cell binding capacity and cell growth rate. Human dermal fibroblasts (HDFs) adhere and spread more effectively to the heat-treated chitosan than to the untreated sample. When the cell growth of the HDFs on the film or the scaffold was analyzed by an MTT assay, we found that rigorous heat treatment stimulated cell growth by 1.5∼1.95-fold relative to that of the untreated chitosan. We conclude that the rigorous dry heat treatment process increases the biocompatibility of the chitosan scaffold by decreasing the degree of deacetylation and by increasing cell attachment and growth.
direct bone apposition during bone remodelling. To address these problem, we developed a new ceramic, calcium metaphosphate(CMP), and report herein the biologic response to CMP in subcutaneous tissue, muscle and bone. Porous CMP blocks were prepared by condensation of anhydrous $Ca(H_2PO_4)_2$ to form non-crystalline $Ca(PO_3)_2$. Macroporous scaffolds were made using a polyurethane sponge method. CMP block possesses a macroporous structure with approximate pore size range of 0.3-1mm. CMP blocks were implanted in 8mm sized calvarial defect, subcutaneous tissue and muscle of 6 Newzealand White rabbits and histologic observation were performed at 4 and 6 weeks later. CMP blocks in subcutaneous tissue and muscle were well adapted without any adverse tissue reaction and resorbed slowly and spontaneously. Histologic observation of calvarial defect at 4 and 6 weeks revealed that CMP matrix were mingled with and directly apposed to new bone without any intervention of fibrous connective tissue. CMP blocks didn't show any adverse tissue reaction and resorbed spontaneously also in calvarial defect. This result revealed that CMP had a high affinity for bone and was very biocompatible. From this preliminary result, it was suggested that CMP was a promising ceramic as a bone substitute and tissue engineering scaffold for bone formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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