갑상선호르몬의 전구체인 thyroglobulin (Tg)이 어떻게 dimerization이 일어나는지를 조사하였다, 변성 혹은 비변성전기영동법으로 관찰한 결과 새롭게 만들어지기 시작한 Tg는 15분에 처음으로 구조적으로 불안정하지만 folded monomer가 관찰되었다. 그 이후에 monomer가 dimer로 바뀌어 결국 30분에 dimer Tg가 만들어지기 시작하여 40분에는 dimer Tg가 관찰되었다. 최종적으로 60분에 완전하게 dimerization된 Tg가 만들어졌다.
Thyroglobulin antibody (TgAb) is a class G immunoglobulin and a conventional marker for thyroid autoimmunity. From a clinical perspective, TgAb is less useful than thyroid peroxidase antibodies for predicting thyroid dysfunction. However, TgAb is found more frequently in differentiated thyroid cancer (DTC) and can interfere with thyroglobulin (Tg) measurements, which are used to monitor the recurrence or persistence of DTC. Recent studies suggested a small but consistent role for preoperative TgAb in predicting DTC in thyroid nodules, and in reflecting adverse tumor characteristics or prognosis, including lymph node metastasis, but this is still controversial. Postoperative TgAb can serve as a biomarker for remnant thyroid tissue, so follow-up measures of TgAb are useful for predicting cancer recurrence in DTC patients. Since high serum TgAb levels may also affect the fine needle aspiration washout Tg levels from suspicious lymph nodes of DTC patients, it is important to use caution when interpreting the washout Tg levels in patients who are positive for TgAb.
목적: 혈중 thyroglobulin 농도 측정(혈중 TG)은 갑상선암 수술 후 재발 및 전이여부를 판단하는데 중요한 지표이다. 최근엔 혈중 TG와 함께 침생검 검체의 washout solution을 이용한 TG 농도 측정(washout TG)이 추적 검사에 빈번히 사용되고 있다. 본 연구는 혈중 TG와 washout TG간에 어떠한 연관성이 있는지 알아보고자 한다. 대상 및 방법: 2007년 1월부터 2008년 2월까지 국립암센터에 내원한 갑상선암 환자 중 washout TG 와 혈중 TG를 함께 측정한 47명 중 혈중 Anti-Tg Ab 양성(${\geq}$100 U/mL)인 환자 6명을 제외한 41명을 대상으로 하였다. 혈중 TG와 washout TG와 세포검사결과와의 연관성도 조사하였다. 결과 및 결론: Washout TG는 혈중 TG보다 현저하게 높았으며 두 경우의 검사결과 간에 유의한 차이를 보였다(p=0.0394). washout TG와 세포검사결과와의 일치도는 87.8%, 혈중 TG와의 일치도는 56.1%였다. washout TG가 양성인 경우는 28명(세포검사결과 양성: 24, 양성의심: 4), 음성인 경우는 13명(세포검사결과 양성의심: 1, 음성: 12)이었다. serum TG가 양성인 경우는 26명(세포검사결과 양성: 17, 양성의심: 3, 음성: 6), 음성인 경우는 15명(세포검사결과 양성: 8, 양성의심: 1, 음성: 6)이었다. 갑상선암에서의 추적 검사로써 washout TG와 혈중 TG가 상호보완적으로 시행되어질 때 재발과 전이를 찾아내는데 유용하다.
The nascent thyroglobulin (Tg) multimer molecule, which is generated during the initial fate of Tg in ER, undergoes the rapid reductive depolymerization. In an attempt to determine the depolymerization process, various types of Tg multimers, which were generated from deoxycholate-treated/reduced Tg, partially unfolded Tg or partially unfolded/reduced Tg, were subjected to various GSH (reduced glutathione) reducing systems using protein disulfide isomerase (PDI), glutathione reductase (GR), glutaredoxin or thioredoxin reductase. The Tg multimers generated from deoxycholate-treated/reduced Tg were depolymerized readily by the PDI/GSH system, which is consistent with the reductase activity of PDI. The PDI/GSH-induced depolymerization of the Tg multimers, which were generated from either partially unfolded Tg or partially unfolded/reduced Tg, required the simultaneous inclusion of glutathione reductase, which is capable of reducing glutathionylated mixed disulfide (PSSG). This suggests that PSSG was generated during the Tg multimerization stage or its depolymerization stage. In particular, the thioredoxin/thioredoxin reductase system or glutaredoxin system was also effective in depolymerizing the Tg multimers generated from the unfolded Tg. Overall, under the net GSH condition, the depolymerization of Tg multimers might be mediated by PDI, which is assisted by other reductive enzymes, and the mechanism for depolymerizing the Tg multimers differs according to the type of Tg multimer containing different degrees and types of disulfide linkages.
The molecular fate of thyroglobulin (Tg) is controlled by oligomerization, a means of storing Tg at high concentrations, and deoligomerization. The oligomerization of bovine Tg are intermolecular reactions that occur through oxidative processes, such as disulfide and dityrosine formation, as well as isopeptide formation; disulfide formation is primarily responsible for Tg oligomerization. Here, the protein disulfide isomerase (PDI) and/or peroxidase-induced oligomerization of unfolded thyroglobulins, which were prepared by treating bovine Tg with heat, urea or thiol/urea, was investigated using SDS-PAGE analyses. In addition, the enzymatic oligomerization was compared with non-enzymatic oligomerization. The thermally-induced oilgomerization of Tg, dependent on glutathione redox state, was affected by the ionic strength or the presence of a surfactant. Meanwhile, PDI-catalyzed oligomerization, time and pH-dependent, was the most remarkable with unfolded/reduced Tg, which was prepared from a treatment with urea/DTT, while the thermally-unfolded Tg was less sensitive. Similarly, the oligomerization of unfolded/reduced Tg was also mediated by peroxidase. However, PDI showed no remarkable effect on the peroxidase-mediated oligomerization of either the unfolded or unfolded/reduced Tg. Additionally, the reductive deoligomerization of oligomeric Tg was exerted by PDI in an excessively reducing state. Based on these results, it is proposed that PDI catalyzes the oligomerization of Tg through the disulfide linkage and its deoligomerization in the molecular fate, and this process may require a specific molecular form of Tg, optimally unfolded/reduced, in a proper redox state.
목적 : Thyroglobulin (Tg)은 갑상선질환의 병태생리에 중추적 역할을 하고 있으며, 분화갑상선암 환자에서 갑상선암 재발에 대한 추적관찰에 가장 중요한 표지자의 하나로 임상에서 널리 이용된다. 혈청 Tg는 방사면역검사법 및 면역방사계수검사법으로 주로 측정되는데, 항 Tg 항체가 Tg측정값의 부정확성에 주된 영향인자임이 알려져 있으며 본 연구진에서도 보고한 바 있다. 본 연구자들은 국내에서 가장 널리 이용되는 면역방사계수법 Tg 키트 2종류를 이용하여, Tg측정 시 항 Tg 항체 영향이 사용된 키트에 따라 어떤 차이가 있는지 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 면역방사계수법을 이용한 Tg 측정키트 2가지(A와 B)를 이용하였다. 검사시료로서는 Tg와 항 Tg 항체 표준용액을 혼합한 시료과 Tg 농도가 높은 환자의 혈청과 항 Tg 항체의 농도가 높은 환자의 혈청을 혼합한 시료를 이용하였다. 검사방법은 A 및 B 키트 모두 제조회사에서 제시한 표준방법을 이용하여 검사를 시행하였다. 통계학적 분석은 ANOVA test 를 이용하였다. 결과: Tg와 항 Tg 항체 표준용액을 혼합한 시료를 이용한 검사 시 두 가지 키트 모두에서 항 Tg 항체가 존재하는 경우 Tg값이 유의하게 낮게 측정되었다. 그러나 A 키트를 이용한 경우 그 정도가 현저하였으며, B 키트를 이용한 경우 임상적으로 의미가 없을 정도로 미약하였다. 환자의 혈청을 이용한 검사에서는 A 키트에서만 Tg측정값이 과소평가되는 결과를 나타내었다. 결론: 항 Tg 항체의 존재는 면역방사계수법을 이용한 혈청 Tg 측정시 과소평가를 일으킬 수 있으며, 그 정도는 사용한 Tg측정 키트에 따라 상이하게 나타남을 알 수 있다. 그러므로 Tg측정 시 항 Tg항체의 측정이 꼭 필요하며, 항 Tg 항체를 가진 혈청에서의 Tg 측정치를 해석할 경우 세심한 주의가 필요하리라 생각된다. 추적검사로 $^{18}F$-FDG PET, 흉부 CT, 그리고, 혈액검사를 시행받았다. PET추적검사 상 이전에 높은 섭취를 보였던 7명 중 6명에서 peak 및 mean SUV의 감소를 보였고 이전에 높은 섭취를 보인 나머지 1명과 낮은 섭취를 보인 1명에서는 병변이 완전히 소실되었다. 이러한 변화 소견은 흉부 CT 추적검사 소견과도 일치하였다. 결론: 원발성 과호산구증가 증후군 환자군에서 폐침범을 보이는 경우, 폐병변은 FDG PET 영상에서 폐암과 유사한정도의 높은 섭취를 보이는 위양성 결과를 나타내어 한번의 PET검사만으로는 양성과 악성을 감별할 수 없었다. 이러한 경우, 추적검사로 CT 및 $^{18}F$-FDG PET를 시행하여 병변의 위치 및 범위, SUV의 변화 소견을 같이 보는 것이 원발성 과호산구증가 증후군 환자에 있어서 보일 수 있는 폐침범 소견과 악성 종양을 감별하는 데 도움을 줄 수 있을 것으로 생각된다. 심벽두꺼워짐의 향상과는 상관성이 없었다. 심근기능의 전부하 후부하에 독립적인 지표인 탄성도는 실제 부피의 증가와 연관되지 않으면서도 생존능이 있는 심근의 기준과 일치하는 양상을 보였으므로 독립적인 매개변수로 사용될 수 있을 것으로 기대한다.높았다. 그러나 두 약제 섭취율 증가의 차이는 동물실험에서는 관찰되지 않았다. 이러한 결과로 보아 MIBI와 tetrofosmin은 Pgp와 MRP에 의한 다약제내성의 발현을 평가할 수 있는 방사성의약품으로 판단되며, 다약제내성 극복제의 시험관내 효능평가에는 MIBI가 tetrofosmin보다 더 우수할 것으로 사료되었다.변화는 없었다. 결론: Verapamil은 암세포의 종류에 따라 MIBI와 TF의 섭취를 감소시켰고, 고용량에는 MDR세포의 섭취도 감소시켰으며 이러한 현상은 세포독성 이나 PKC효소 아형과는 관련이 없었다. 그러므로
To evaluate the significance of assay of serum thyroglobulin(Tg) in monitoring the course of the thyroid cancer or its response to treatment, serum thyroglobulin levels were measured in 41 patients with thyroid cancer who visited Seoul National University Hospital from August, 1981 to August, 1982. The results were as follows: 1) Serum Tg levels $1\sim3$ months after thyroidectomy was $31{\pm}23$ ng/ml$(mean{\pm}S.D.)$ in 14 patients without metastasis, $66{\pm}41$ ng/ml in 21 patients with regional metastasis and $176{\pm}59$ ng/ml in 6 patients with distant metastasis and there were significant differences among three groups(p<0.01). 2) Serum Tg levels in 13 patients with metastasis before and after $^{131}I$ treatment were $134{\pm}62ng/ml$ and $67{\pm}52ng/ml$ respectively. 3) In the follow-up measurement of serum Tg levels every 3 months for about 1 year, almost all serum Tg levels were below 60 ng/ml in 12 patients without distant metastasis and serum Tg levels were elevated above 60 ng/ml in 5 of 6 patients with distant metastasis. 4) In 6 patients with distant metastasis, serum Tg levels were elevated in 5 patients and $^{131}I$ whole body scan showed definite metastatic evidence in 3 patients and suspicious evidence in 1 patient. From above results, we concluded that serum Tg level is very useful as an indicator of recurrence or metastasis in patients with thyroid cancer after operation.
갑상선암 환자의 경부 림프절에서 미세침흡인생검술(fine needle aspiration biopsy, FNAB)을 시행하며 얻은 미세침세척액의 티로글로불린(thyroglobulin, Tg)측정법의 진단적 성적과 유용성을 알아보고자 FNAB 세포검사의 결과와 비교하였다. 갑상선암의 경부림프절 전이가 의심되어 초음파 시행한 총 37명의 환자 48개의 FNAB 검체를 대상으로 하였고, 수술 후 조직검사결과 또는 장기간 영상 추적검사를 기준으로 하여 세포검사와 미세침세척액 티로글로불린(FNAB-Tg)측정법을 비교하여, 각 검사의 특이도, 민감도 및 정확도를 평가하였다. 추가적으로 Tg-항체가 양성일때 FNAB-Tg 검사에는 어떠한 영향을 미치는지 Tg-항체 검사를 같이 시행한 34명을 대상으로 분석하여 보았다. FNAB 검체의 세포검사에서 전이 음성인 36개 검체 중 35개 검체에서 음성을 보였고, 전이 양성인 12개 검체 중 9개 검체에서 양성을 보였다. FNAB-Tg측정법의 경우 전이 음성인 36개의 검체 중 32개의 검체에서 음성을 보였고, 전이 양성인 12개의 검체 중 12개 검체 모두 양성을 보였다. 따라서 세포검사의 민감도와 특이도는 각각 75.0% (9/12)와 97.2% (35/36)였고, 위음성이 25% (3/12)였다. 반면에 FNAB-Tg 측정법의 민감도와 특이도는 각각 100% (12/12)와 88.9% (32/36)였고, 위양성이 11.1% (4/36)였다. 정확도는 두 검사 모두 91.7% (44/48)였다. Tg-항체에 대한 검사 결과를 얻을 수 있는 34명을 따로 분석한 결과, Tg-항체의 존재 유무가 FNAB-Tg 측정법의 진단 성능에 영향을 주지 않음을 확인할 수 있었다. FNAB 검체를 이용한 세포검사는 특이도가 높고 반면, FNAB-Tg 측정법은 민감도가 높은 검사임을 확인할 수 있었다. 따라서 림프절 전이가 의심되는 갑상선환자에서 FNAB를 시행할 때 세포검사와 FNAB-Tg 측정법은 동시에 시행되어야 할 상호보완적인 검사들이다.
This retrospective study aimed to investigate whether there was a difference in the success rate of removal of residual thyroid tissue in patients with the same cutoff serum thyroglobulin (Tg) value-measured 2 weeks after thyroid hormone withdrawal (THW)-for different radioactive iodine (RAI) activities. We identified 132 patients with papillary thyroid cancer who were treated with total thyroidectomy and RAI therapy to evaluate the efficacy of three radioactivities of I-131: 1,110, 3,700, and 5,550 MBq. Serum Tg testing was performed 1 week before RAI treatment and 2 weeks after THW (pre-Tg); the cutoff pre-Tg level was below 10 ng/mL. Stimulated Tg levels were measured on the day of I-131 administration (off-Tg). After 6 months of treatment, we compared the groups for complete ablation, defined as no uptake on a diagnostic I-131 scan, stimulated Tg level of <1.0 ng/mL, and Tg antibody level of <100 ng/mL. Ninety-five patients (72.0%) achieved complete ablation, with 57.1% (8/14), 78.2% (68/87), and 61.3% (19/31) in the 1,110 MBq, 3,700 MBq, and 5,550 MBq groups, respectively. There was no significant difference in the complete ablation rates between the three groups. In the multivariate analysis, the off-Tg level was a significant predictor of complete ablation. RAI therapy with low radioactivity (1,110 MBq) seemed sufficient for ablation in patients with papillary thyroid cancer with a pre-Tg level below 10 ng/mL. The off-Tg level is a promising and useful predictor of complete ablation after initial RAI therapy.
Fate of the nascent thyrolglobulin (Tg) molecule is characterized by multimerization. To establish the formation of Tg multimers, the partially unfolded/reduced Tg or deoxycholate-treated/ reduced Tg was subjected to protein disulfide isomerase (PDI)-mediated multimerization. Oxidized glutathione/PDI-mediated formation of multimeric Tg forms, requiring at least an equivalent molar ratio of PDI/Tg monomer, decreased with increasing concentration of reduced glutathione (GSH), suggesting the oxidizing role of PDI. Additional support was obtained when PDI alone, at a PDI/Tg molar ratio of 0.3, expressed a rapid multimerization. Independently, the exposure of partially unfolded Tg to GSH resulted in Tg multimerization, enhanced by PDI, according to thiol-disulfide exchange. Though to a lower extent, a similar result was observed with the dimerization of deoxycholate-pretreated Tg monomer. Consequently, it is implied that intermolecular disulfide linkage may be facilitated at a limited region of unfolded Tg. In an attempt to examine the multimerization site, the cysteine residue-rich fragments of the Tg were subjected to GSH-induced multimerization; a 50 kDa fragment, containing three vicinal dithiols, was multimerized, while an N-terminal domain was not. Present results suggest that the oxidase as well as isomerase function of PDI may be involved in the multimerization of partially unfolded Tg or deoxycholate-treated Tg.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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