Kwon, Soo-Jeong;Lee, Ui Gun;Moon, Young Ja;Cho, Gab Yeon;Boo, Hee Ock;Lee, Moon Soon;Woo, Sun Hee;Kim, Hag Hyun
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.273-273
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2017
Polyploidy has opened a new horizon for selection to sculpt a variety of new gene functions, traits, and lineages. The aim of this study was to investigate the efficacy of the colchicine concentration, temporal changes, and suitable material for inducing effective tetraploid plants of Codonopsis lanceolata. A total of 180 individuals from 16 treatment groups were germinated, and exposed to different concentrations of Colchicine. The plant height of the diploid (18.1 cm) was slightly shorter than that of the tetraploid (13.4 cm). The fresh weight of the main root in the diploid (0.5 g) was 4-fold higher than the tetraploid (2.2 g). The colchicine-treated plant regeneration rate in C. lanceolata was decreased at the elevated concentration of colchicine. A total of 126 individual plants were regenerated in the entire treatment group and tetraploid (2n=4x=32) plants were obtained. In particular, 5 individuals of the tetraploid plant were induced in the 0.05% colchicine for 6h, which is a higher rate (29.4%) than other regenerated plants. As in the seed treatment result, the plant height of the diploid was significantly higher (10.4 cm) than tetraploid. The root length of the tetraploid (10.1 cm) was longer than the diploid, and the root was also thicker. Taken together, the results obtained from the present study may be helpful for the efficient recovery of such polyploid plants through the in vitro application of colchicine, and may improve the productivity and breeding of C. lanceolata.
Suspension culture is a useful tool for culturing embryonic stem (ES) cells in large-scale, but the stability of pluripotency and karyotype has to be maintained $in$$vitro$ for clinical application. Therefore, we investigated whether the chromosomal abnormality of ES cells was induced in suspension culture or not. The ES cells were cultured in suspension as a form of aggregate with or without mouse embryonic fibroblasts (MEFs), and 0 or 1,000 U/ml leukemia inhibitory factor (LIF) was treated to suspended ES cells. After culturing ES cells in suspension, their karyotype, DNA content, and properties of pluripotency and differentiation were evaluated. As a result, the formation of tetraploid ES cell population was significantly increased in suspension culture in which ES cells were co-cultured with both MEFs and LIF. Tetraploid ES cell population was also generated when ES cells were cultured alone in suspension regardless of the existence of LIF. On the other hand, the formation of tetraploid ES cell population was not detected in LIF-free condition, in which MEFs were included. The origin of tetraploid ES cell population was turned out to be E14 ES cells and not MEFs by microsatellite analysis and the basic properties of them were still maintained despite ploidy-conversion to tetraploidy. Furthermore, we identified the ploidy shift from tetraploidy to near-triploidy as tetraploid ES cells were differentiated spontaneously. From these results, we demonstrated that suspension culture system could induce ploidy-conversion generating tetraploid ES cell population. Moreover, optimization of suspension culture system may make possible mass-production of ES cells.
닭에서 2배수성 배우자(gametes)의 생성을 통해서 4배수성 태아 생산을 위한 본 실험의 결과는 다음과 같다. 1. 2배수성 정자생산 TEM(Tri -ethyleneme-lamine) 0.37mg을 연속 3일 주사한 후 9일째(최초 TEM처리 후 12일째)에 11%로 가장 높았다. 2. 2배수성 배우자를 유도한 후 수정을 통하여 109개의 수정난 중 4배수성 태아를 3개(2.8%) 관찰할 수 있었다. 3. 4배수성 개체의 유전구조는 정상구조에서 변화가 없이 동일한 염색체가 4장으로 구성된 형태였다.
4 배체 미꾸리를 생산하기 위해 수정란에 여러 범위 의 자극 온도와 수정 후로부터 의 경과시간, 그리고 처리 시간에 따라 그 효율을 조사하였다. 4배체 생산에 가장효율이 좋은 조건은 수정 후 28분에 3분간 온도 $41^{\circ}C$에 처리하는 것으로 나타났고, 정상 2배체의 염색체 수가 2n=50으로 나타난 반면 4배체의 염색체 수는 4n=100으로 확인 되었다. 또한 4배체의 적혈구의 용적은 2배체 보다 1.65배나 더 컸으며 4배체와 2배체의 DNA 함량은 각각 6.547 및 3.067pg/cell로 나타났다.
본 연구는 체세포 배수화를 통해 생산한 4배체 OA hybrid 와 다양한 교배조합간 후대를 대상으로 염색체 구성 및 조환여부를 알아보기 위하여 수행되었다. 4배체 OA hybrid의 여교잡 후대를 분석한 결과, 2배체 아시아틱 품종을 부 또는 모본으로 정역교배한 조합에서는 3배체가, 4배체 아시아틱과 4배체 OA 품종을 부 또는 모본으로 한 교배조합에서는 4배체가 생산되었다. 그러나, 2배체 Oriental 품종을 모본으로 교배한 경우, 3배체 또는 2배체를 얻을 수 있었다. OA hybrid를 대상으로 GISH방법으로 이종염색체의 조환여부를 확인한 결과, OA hybrid의 염색체수는 24개, 그 중 12개는 모본인 Oriental hybrid, 12개는 부본인 Asiatic hybrid에서 유래한 것을 알 수 있었다. 체세포 염색체간 배수화된 OA hybrid의 여교잡 후대의 경우, $A{\times}OA$, $OA{\times}A$ 교배에서는 Oriental hybrid 염색체가 12개, Asiatic hybrid 24개, $OA{\times}OA$간 교배에서는 Oriental hybrid 염색체 24개와 Asiatic hybrid 24개로 진정한 4배체 잡종임을 확인 할 수 있었으며, 이들 후대는 어떠한 조합에서도 부분적인 이종염색체간 조환이 일어나지 않았다. 한편 $O{\times}OA$ 교배의 후대식물의 염색체 구성은 Oriental hybrid 유래 염색체만 2x=24개인 경우와 3배체(Oriental = 24, Asiatic = 12)로 판명되었다. 4배체 아시아틱계 품종을 모본으로 한 $AA{\times}OA$ 교배조합의 경우, Asiatic hybrid염색체만 48개로 나타났다.
The present study aimed to compare and investigate the morphological characteristics and yield components according to ploidy level of diploid and tetraploid Platycodon grandiflorum under vinyl-greenhouse and open field conditions. Plant height of diploid and tetraploid P. grandiflorum was 51.3 ㎝, 54.0 ㎝, respectively. The results revealed that the plants grown in the vinyl-greenhouse showed significantly higher growth compared to those grown in the open field. Regardless of the growing place, diploid and tetraploid of P. grandiflorum showed the rapid elongation of internodes after 4 and 3 internodes respectively and elongation tends to be decreased as entering the flower-bud differentiation period. The starting day of flowering in vinyl-greenhouse cultivation was found to be faster than that of the open field cultivation by 2∼3 days and tended to be delayed by about 5∼6 days in tetraploid P. grandiflorum compared to diploid. Fresh weight of roots from the vinyl-greenhouse cultivation showed a high quantity as 34.2g and 49.4g in diploid and tetraploid P. grandiflorum, respectively and especially tetraploid P. grandiflorum was found to be increased by approximately 44.4% compared to other plots.
The main grape producing regions in Korea were surveyed for the occurrence and relative incidence of crown gall disease on grapevine. The results of the survey showed that the disease tended to affect tetraploid cultivars, which produce a large and sweet fruit but are very weak to cold weather. Incidence of crown gall disease was high on the tetraploid cultivars, Kyoho (Gerbong), Daebong, and Black Olympia while it was low on the diploid cultivars, Cambell Early and Sheridan. The disease incidence was very high on Anseong, Cheonan, and Chincheon, where the major growing areas of tetraploid cultivars and grapevines were burried in the winter to protect from freeze injury, whereas it was low in Yungdong, Kimcheon, and Nonsan. Crown gall disease did not increased with grapevine age on both Cambell Early and Kyoho. It remained low in Cambell Early, but high for all ages on Kyoho, Galls were found on the crown region and mid part of the trunk, but more galls were on small branches and canes on Kyoho grapevines. More than one third of ZKyoho grapevines inspected had galls on multiple locations on grapevines. On Kyoho, 56.3% of the galls covered more than 50% of the crown gall disease affects severely on the cultivar.
The influence of ploidy level on agronomic characteristics in italian ryegrass, Lolium multiflorum Lam, italicum, was studied using diploids (2x) and tetraploids (4x) on the upland of Livestock Experiment Station, Suweon. The results are summarized as follow: 1. Tetraploid cultivars are in general dark green in leaf color and strong glittered. 2. Diploid cultivars are more resistant to cold than tetraploids but degree of resistance to cold depends on cultivars. The di-and tetraploids did not differ in summer survival and coldand heat resistance of di-Itetraploid cultivars were not related. 3. Tetraploid cultivars have larger leaf-blades, more rapid growth and higher leaf ratio to stem by heading than diploids. 4. Tetraploids possess significantly lower dry matter content than diploids. 5 . Fresh- and dry weight of tetraploids are similar with that of diploids but tetraploids are more leafy than diploids. 6. Seasonal yield depends more on the type of the cultivar than on its tetraploid nature.
당연구소(當硏究所) 북서편(北西便)에 위치(位置)한 칠보산(七寶山)에서 자연생(自然生) 광엽계통(廣葉系統)의 아까시나무를 선발(選拔)하여 몇가지 특성(特性)들을 조사(調査)하였다. 염색체수(染色體數)에 있어서는 역시 2n=40으로 인위(人爲) 4배체(倍體)와 같은 수(數)를 갖이고 있었으며 외부형태(外部形態)은 잎이 크고 농록색(濃綠色)을 나타내며 두터웠다. 그리고 기공(氣孔)의 길이와 단위면적당(單位面積當) 기공(氣孔)의 수(數)에 있어서는 2배체(倍體)와 비슷하였으나 섬유(纖維)의 길이 및 폭(幅)은 2배체(倍體)보다 증대(增大)되였고 생장상황(生長狀況)에 있어서는 인위(人爲) 4배체(倍體) 광엽(廣葉) 아까시나무와 큰 차이(差異)가 없었다.
Park, Sun-Mi;Song, Sang-Jin;Choi, Ho-Jun;Uhm, Sang-Jun;Cho, Ssang-Goo;Lee, Hoon-Taek
한국발생생물학회:학술대회논문집
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한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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pp.121-121
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2003
The standard protocol for the production of transgenic mouse from ES-injected embryo has to process via chimera producing and several times breeding steps, In contrast, tetraploid-ES cell complementation method allows the immediate generation of targeted murine mutants from genetically modified ES cell clones. The advantage of this advanced technique is a simple and efficient without chimeric intermediates. Recently, this method has been significantly improved through the discovery that ES cells derived from hybrid strains support the development of viable ES mice more efficiently than inbred ES cells do. Therefore, the objective of this study was to generate transgenic mice overexpressing human resistin gene by using tetrapioid-ES cell complementation method. Human resistin gene was amplified from human fetal liver cDNA library by PCR and cloned into pCR 2.1 TOPO T-vector and constructed in pCMV-Tag4C vector. Human resistin mammalian expression plasmid was transfected into D3-GL ES cells by lipofectamine 2000, and then after 8~10 days of transfection, the human resistin-expressing cells were selected with G418. In order to produce tetraploid embryos, blastomeres of diploid embryos at the two-cell stage were fused with two times of electric pulse using 60 V 30 $\mu$sec. (fusion rate : 93.5%) and cultured upto the blastocyst stage (development rate : 94.6%). The 15~20 previously G418-selected ES cells were injected into tetraploid blastocysts, and then transferred into the uterus of E2.5d pseudopregnant recipient mice. To investigate the gestation progress, two El9.5d fetus were recovered by Casarean section and one fetus was confirmed to contain human resistin gene by genomic DNA-PCR. Therefore, this finding demonstrates that tetraploid-ES mouse technology can be considered as a useful tool to produce transgenic mouse for the rapid analysis of gene function in vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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