The present experiment was perf'3rmed to investigate the protective effects of ginseng total saponin (GTS) and possible mechanisms on the hepatocytotoxicity induced by tert-butylhydroperoxide (t-BuOOH), 4-Bromo-calciumu ionophore A23187 (Br-A23187) and KCN. Hepatocytes were isolated by collagenase perfusion of livers from fasted male Sprague Dawley rats and cultured overnight. After various treatments in Krebs-Ringer-HEPES buffer at pH 7.4, cell viability was determined by propidium iodide using fluorocytometry. GTS (5-20 ${\mu}$M) inhibited cell killing induced by t-BuOOH, and KCN, dose-dependently. However, GTS did not inhibit Br-A23187-induced cell killing. These findings support that GTS could protect the hepatocytoxicity induced by some toxic chemicals. The mechanisms of these protective effects by GTS seem to be associated with antioxidant activity and increase of cellular ATP.
Oxidative decomposition of 2, 4, 6-trichlorophenol(TCP) was studied in aqueous solution. Iron and manganese protoporphyrin [or tetrakis(p-carboxyphenylporphyrin)] and their polymer supported derivatives were used as catalysts, and $KHSO_5$ and tert-butyldroperoxide(TBHP) as oxidants. Metalloporphyrin itself shows very poor catalytic activity in oxidative decomposition of TCP with oxidant. However, very high catalytic activity was observed when metalloporphyrin was chemically bound to newly synthesized polymers or XAD2 resin. Additionally, it revealed much higher catalytic activity in the presence of water-soluble polymers having a electron-donating axial ligand such as pyridine and immidazole. Maleic acid and chloromaleic acid were found in the resulting solution by ESI-MS. Especially, XAD2-supported metalloporphyrins can be reused as catalysts due to insolubility to solvent, and stability against oxidant.
Huma, Nuzhat;Rafiq, Saima;Sameen, Aysha;Pasha, Imran;Khan, Muhammad Issa
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.31
no.2
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pp.287-292
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2018
Objective: The aim of present study was to assess the anti-oxidant potential of water-soluble peptides (WSPs) extract derived from buffalo and cow milk Cheddar cheeses at different stages of ripening. Methods: The antioxidant potential of WSPs extract was assessed through 2,2'-azinobis-3-ethylbenzothiazoline-6sulfonic acid (ABTS)-radical scavenging activity. In addition, impact of WSPs extract on cell viability and production of reactive oxygen species (ROS) in human colon adenocarcinoma Caco-2 (tert-butylhydroperoxide-induced) cell lines was also evaluated. Results: The ABTS-radical scavenging activity increased progressively with ripening period and dose-dependently in both cheeses. However, peptide extract from buffalo milk Cheddar cheese demonstrated relatively higher activity due to higher contents of water-soluble nitrogen. Intracellular ROS production in Caco-2 cells decreased significantly (p<0.05) till 150th day of cheese ripening and remained constant thereafter. Additionally, dose-dependent response of WSPs extract on antioxidant activity was noticed in the Caco-2 cell line. Conclusion: On the basis of current in vitro study, the Cheddar cheese WSPs extract can protect intestinal epithelium against oxidative stress due to their antioxidant activity.
Objectives : Peroxynitrite (ONOO-), superoxide anion radical (?O2-) and nitric oxide (NO) are cytotoxic because they can oxidize several cellular components such as proteins, lipids and DNA. They have been implicated in the aging process, and age-related diseases such as Alzheimer's disease, rheumatoid arthritis, cancer and atherosclerosis. The aim of this study was to investigate Sabohwan's activity for scavenging ONOO- and its precursors. NO and ?02-. Methods : For this study, the fluorescent probes, namely 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA), 4.5-diaminofluorescein (DAF-2) and dihydrorhodamine 123 (DHR 123) were used. Results : Sabohwanblocked tert-butylhydroperoxide (t-BHP)-induced cell death in a dose-dependent fashion. It scavenged t-BHP-induced ONOO-, NO and ?O2- in YPEN cells. Sabohwan inhibited the generation of ONOO-, NO and ?O2- in the lipopolysaccharide (LPS)-treated mouse kidney postmitochondria both in vitro and in vivo. The lipid peroxide level increased and glutathione level decreased in the LPS-treated mice, whereas the ones in the Sabohwanadministered group among the LPS-treated mice reversed toward their natural levels. Conclusions : These results suggest that Sabohwanis an effective ONOO-, ?O2- and NO scavenger, and thereby it might have a potential role as a therapy against the aging process and age-related diseases.
Membrane lipid peroxidation processes yield products that may react with DNA and proteins to cause oxidative modifications. The oxyR gene product regulates the expression of enzymes and proteins that are needed for cellular protection against oxidative stress. Upon exposure to tert-butylhydroperoxide (t-BOOH) and 2,2'-azobis (2-amidinopropane) hydrochloride (AAPH), which induce lipid peroxidation in membranes, the Escherichia coli oxyR overexpression mutant was much more resistant to lipid peroxidation-mediated cellular damage, when compared to the oxyR deletion mutant in regard to growth kinetics, viability, and DNA damage. The deletion of the oxyR gene in E. coli also resulted in increased susceptibility of superoxide dismutase to lipid peroxidation-mediated inactivation. The results indicate that the peroxidation of lipid is probably one of the important intermediary events in free radical-induced cellular damage. Also, the oxyR regulon plays an important protective role in lipid peroxidation-mediated cellular damage.
Kim, Chung-Hyeon;Jung, Bong-Yong;Jung, Sun-Ki;Lee, Chul-Ho;Lee, Hyun-Sun;Kim, Bong-Hee;Kim, Sang-Kyum
Environmental Analysis Health and Toxicology
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v.25
no.1
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pp.85-94
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2010
Platycodon grandiflorum, Doraji as Korean name, is one of the most widely used traditional oriental medicine for bronchial diseases and also used as a folk remedy for geriatric diseases and inflammatory diseases. In recent studies, it has been reported that some effect of P. grandiflorum is derived from its antioxidant activity, although there is still a lack of evidence to establish its oxy-radical scavenging activity. In this study, total oxy-radical scavenging capacity (TOSC) assay was used to evaluate antioxidant activity of total extracts (T-PG), polysaccharide fraction (Po-PG), and saponin fraction (Sa-PG) isolated from P. grandiflorum against peroxyl radicals and peroxynitrites. And MTT assay was taken to assess cyto-protective effects of T-PG, Po-PG and Sa-PG in H4IIE cells treated with hydrogen peroxide and tert-butylhydroperoxide. In the TOSC assay, Sa-PG showed strong oxy-radical scavenging capacity compared with T-PG and Po-PG. In cell-based assay, T-PG and Po-PG protected cells from oxidative stress, but Sa-PG did not protect cells because of cytotoxicity of Sa-PG. These results suggest that the saponin components of P. grandiflorum have relatively strong antioxidant capacity and cytotoxicity in rat hepatoma cells.
Objectives : This study investigated whether the water extract of Spatholobi Caulis (SCE) has the ability to protect hepatocyte against oxidative stress induced by tert-butylhydroperoxide (tBHP) in vitro and $CCl_4$ in vivo. Methods : In vitro, HepG2 cells pre-treated with Spatholobi Caulis water extract (1, 3, 10, $30{\mu}g$/ml) for 12h and further incubated with tBHP ($100{\mu}M$) for the next 12h. Cell viability was assessed by MTT assay. In vivo, rats were orally administrated with the aqueous extract of Spatholobi Caulis (SCE; 50, 100 mg/kg) for 4 days and then, injected with $CCl_4$ 1 mg/kg body weight to induce acute liver damage. Results : Treatment with SCE inhibited cell death induced by tBHP, as evidenced by alterations in the levels of the proteins associated with apoptosis:SCE prevented a decrease in $Bcl_2$, and cleavage of poly(ADP-ribose)polymerase and pro-caspase-3. Moreover, SCE inhibited the ability of tBHP to generate $H_2O_2$ production, thereby restoring GSH content. Moreover, SCE treatments in rats effectively decreased liver injuries induced by a single dose of $CCl_4$, as evidenced by decreases in hepatic degeneration and inflammation as well as plasma alanine aminotransferase and lactate dehydrogenase activities. Consistently, treatments of SCE also protected liver in rats stimulated by $CCl_4$, as indicated by restoration GSH and prevention of MDA in the liver. Conclusions : SCE has the ability 1) to protect hepatocyte against oxidative stress induced by tBHP and 2) to prevent $CCl_4$-inducible acute liver toxicity. Present findings may be informative not only in elucidating the pharmacological mechanism of Spatholobi Caulis, but in determining its potential application for oxidative cellular damage in the liver.
Although animal and epidemiological studies have suggested oxidative stress as an etiological factor in pathogenesis including cancer, inflammation, sepsis, fibrosis, cardiovascularlneurodegenerative diseases and aging-related disorders, conflicting results have been obtained in clinical trial with antioxidants. The reason for this discrepancy remains unknown but may be due, in part, to the lack of a validated assay system for evaluating antioxidant capacity. The antioxidant activity of a series of sugar alcohols against peroxyl radicals, hydroxyl radicals and peroxynitrites was determined by the total oxy-radical scavenging capacity (TOSC) assay and cell-based assay using H4IIE cells. Specific TOSC values calculated from the slope of the linear regression for erythritol, xylitol, sorbitol or mannitol against peroxyl radicals was $2.1{\pm}0.2,\;3.7{\pm}0.3,\;9.1{\pm}0.3$ or $8.7{\pm}1.1$ TOSC/mM, respectively. Specific TOSC values for erythritol, xylitol, sorbitol or mannitol against peroxynitrite was $1.9{\pm}0.3,\;3.9{\pm}0.4,\;7.8{\pm}0.7$ or $7.7{\pm}0.5$ TOSC/mM, respectively. These results suggest that oxy-radical scavenging capacity is dependent on the number of aliphatic hydroxyl group in sugar alcohols of monosaccharide. Tert-butylhydroperoxide (t-BHP)-induced cell toxicity determined by MTT assay was marginally attenuated by 10 mM erythritol, but completely inhibited by 10 mM xylitol, 2 mM sorbitol or 0.75 mM maltitol, a disaccharide alcohol. Oxidative stress markers, such as glutathione (GSH) and malondial-dehyde (MDA) levels, were measured in t-BHP-treated cells using HPLC equipped with a fluorescence detector and a reverse phase column. Erythritol did not change the levels of GSH and MDA in H411E cells treated with t-BHP. The t-BHP-induced changes in cellular GSH and MDA levels were ameliorated by 10 mM xylitol and completely blocked by 10 mM sorbitol and maltitol. These results indicate that sugar alcohols protect cells against oxidative stress via scavenging oxy-radical and suggest that TOSC assay in conjunction with cell-based assay is a valid method for evaluating antioxidant capacity of natural and synthetic chemicals.
Kim, Soo-Chang;Song, Yeong-Min;Lee, Sung-Dae;Song, Seung-Hee;Koh, Phil-Ok;Kim, Jong-Su;Kim, Chung-Hui;Kang, Chung-Boo
Journal of Veterinary Clinics
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v.24
no.3
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pp.392-399
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2007
Scutellaria baicalensis Georgi. (SBGE) is known to be antioxidant effect. In addition of the effects, we further investigated the SBGE on the antioxidant effect on a renal cortical slices cell and kidney protecting effects. The results were as follows. 1 When renal cortical slices separated from a rabbit's kidney were treated with 1mM tert-Butylhydroperoxide (t-BHP) in the presence of SBGE. SBGE significant prevented t-BHP induced increase in lactate dehydrogenase (LDH) release and lipid peroxidation. 2. When renal cortical slices separated from a rabbit's kidney were treated with oxidant $300{\mu}M$ cisplatin in the presence of SBGE. SBGE significant prevented cisplatin-induced increase in LDH release and lipid peroxidation. 3. Pretreatment with 0.1g/kg SBGE for seven day and treatment with 5 mg/kg cisplatin by the intraperitoneal injection The results were that the pretreatment group with SBGE showed a significant decrease in lipid peroxidation, increase in clearance rate of blood urea nitrogen (BUN) and creatinine in the kidney than the administering single agent group of cisplatin. and pretreatment group with SBGE showed intact microvillus of proximal tubule and no contraction of rumen, it was a similar result with normal group. With the results SBGE showed to be highly effective on antioxidant effect and cellular protection activity against cisplatin that was a toxic agent on a kidney. Therefore, SBGE is considered to have protective effective on a disordered kidney or kidney diseases such as nephritis or renal failure that cause tissue damages in a kidney.
Oxidative stress induced by reactive oxygen intermediates has been implicated in a variety of human diseases including neurodegenerative disorders, cancer, cardiovascular and respiratory diseases, and mode of action of environmental toxicants. Tert-butylhydroperoxide (t-BHP) is an organic lipid hydroperoxide analogue, which is commonly used as a pro-oxidant for evaluating mechanisms involving oxidative stress in cells and tissues. In this study, the underlying mechanisms involved in the protective effects of Hwabuk 94 kiwifruit (Actinidia deliciosa cv. 'Hwabuk 94'), which is cultivated in Jeju, on the t-BHP-induced cytotoxicity in PC12 cell. The pretreatment of rat pheochromocytoma cell line PC12 with Hwabuk 94 extract ($1-100\;{\mu}g/ml$) resulted in a significant recovery from t-BHP-induced cell death and increased Bcl-2 and procaspase-3 expression, whereas the expression of Bax and cleaved PARP were decreased in a dose-dependent manner compared to the control. Furthermore, Hwabuk 94 inhibited the t-BHP-induced p38 MAP kinase and extracellular signal-regulated kinase 1/2, but not c-Jun N-terminal kinase activations. Finally, these findings suggest that Hwabuk 94 kiwifruit might attenuate t-BHP-induced PC12 cell cytotoxicity, at least in part, through the inhibition of signaling pathways mediated by the ERK1/2 and p38 MAP kinase.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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