• 제목/요약/키워드: Tc8.2 expression

검색결과 19건 처리시간 0.032초

Molecular Characterization of Trypanosoma cruzi Tc8.2 Gene Indicates Two Differential Locations for the Encoded Protein in Epimastigote and Trypomastigote Forms

  • Kian, Danielle;Lancheros, Cesar Armando Contreras;Damiani, Igor Alexandre Campos;Fernandes, Tamiris Zanforlin Olmos;Pinge-Filho, Phileno;dos Santos, Marcia Regina Machado;da Silveira, Jose Franco;Nakamura, Celso Vataru;da Silva, Joao Santana;Yamada-Ogatta, Sueli Fumie;Yamauchi, Lucy Megumi
    • Parasites, Hosts and Diseases
    • /
    • 제53권4호
    • /
    • pp.483-488
    • /
    • 2015
  • This report describes the molecular characterization of the Tc8.2 gene of Trypanosoma cruzi. Both the Tc8.2 gene and its encoded protein were analyzed by bioinformatics, while Northern blot and RT-PCR were used for the transcripts. Besides, immunolocalization of recombinant protein was done by immunofluorescence and electron microscopy. Analysis indicated the presence of a single copy of Tc8.2 in the T. cruzi genome and 2-different sized transcripts in epimastigotes/amastigotes and trypomastigotes. Immunoblotting showed 70 and 80 kDa polypeptides in epimastigotes and trypomastigotes, respectively, and a differential pattern of immunolocalization. Overall, the results suggest that Tc8.2 is differentially expressed during the T. cruzi life cycle.

TC1 (C8orf4) is involved in ERK1/2 pathway-regulated G1- to S-phase transition

  • Wang, Yi-Dong;Bian, Guo-Hui;Lv, Xiao-Yan;Zheng, Rong;Sun, Huan;Zhang, Zheng;Chen, Ye;Li, Qin-Wei;Xiao, Yan;Yang, Qiu-Tan;Ai, Jian-Zhong;Wei, Yu-Quan;Zhou, Qin
    • BMB Reports
    • /
    • 제41권10호
    • /
    • pp.733-738
    • /
    • 2008
  • Although previous studies have implicated a role for TC1 (C8orf4) in cancer cell proliferation, the molecular mechanism of its action is still largely unclear. In this study, we showed, for the first time, that the mRNA levels of TC1 were upregulated by mitogens (FBS/thrombin) and at least partially, through the ERK1/2 signaling pathway. Interestingly, the over-expression of TC1 promoted the $G_1$- to S-phase transition of the cell cycle, which was delayed by the deficiency of ERK1/2 signaling in fibroblast cells. Furthermore, the luciferase reporter assay indicated that the over-expression of TC1 significantly increased Cyclin D1 promoter-driven luciferase activity. Taken together, our findings revealed that TC1 was involved in the mitogen-activated ERK1/2 signaling pathway and positively regulated $G_1$- to S-phase transition of the cell cycle. Our results may provide a novel mechanism of the role of TC1 in the regulation of cell proliferation.

Characterization of a Recombinant Thermostable Xylanase from Hot Spring Thermophilic Geobacillus sp. TC-W7

  • Liu, Bin;Zhang, Ningning;Zhao, Chao;Lin, Baixue;Xie, Lianhui;Huang, Yifan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제22권10호
    • /
    • pp.1388-1394
    • /
    • 2012
  • A xylanase-producing thermophilic strain, Geobacillus sp. TC-W7, was isolated from a hot spring in Yongtai (Fuzhou, China). Subsequently, the xylanase gene that encoded 407 amino acids was cloned and expressed. The recombinant xylanase was purified by GST affinity chromatography and exhibited maximum activity at $75^{\circ}C$ and a pH of 8.2. The enzyme was active up to $95^{\circ}C$ and showed activity over a wide pH range of 5.2 to 10.2. Additionally, the recombinant xylanase showed high thermostability and pH stability. More than 85% of the enzyme's activity was retained after incubation at $70^{\circ}C$ for 90 min at a pH of 8.2. The activity of the recombinant xylanase was enhanced by treatment with 10 mM enzyme inhibitors (DDT, Tween-20, 2-Me, or TritonX-100) and was inhibited by EDTA or PMSF. Its functionality was stable in the presence of $Li^+$, $Na^+$, and $K^+$, but inhibited by $Hg^{2+}$, $Ni^{2+}$, $Co^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Pb^{2+}$, $Fe^{3+}$, and $Al^{3+}$. The functionality of the crude xylanase had similar properties to the recombinant xylanase except for when it was treated with $Al^{2+}$ or $Fe^{2+}$. The enzyme might be a promising candidate for various industrial applications such as the biofuel, food, and paper and pulp industries.

Effects of Arsenic Trioxide Alone and in Combination with Bortezomib in Multiple Myeloma RPMI 8266 Cells

  • Elmahi, Aadil Yousif;Niu, Chao;Li, Wei;Li, Dan;Wang, Guan-Jun;Hao, Shan-Shan;Cui, Jiu-Wei
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
    • /
    • 제14권11호
    • /
    • pp.6469-6473
    • /
    • 2013
  • The aim of this study was to detect the efficiency of arsenic trioxide (ATO) alone or together with bortezomib to inhibit proliferation and induce apoptosis in a multiple myeloma (MM) RPMI 8266 cells. Mechanisms of action were also investigated. RPMI 8266 cells were treated with ATO alone and in combination with bortezomib for 24 hours, and cell viability was assessed by modified MTT. Annexin V-F1TC and PI staining was used to detect the apoptosis rate and cell cycling was investigated by flow cytometry, along with expression of cell surface death receptor-4(DR4) and death receptor-5 (DR5). Western blotting was applied to detect the expression of bcl-2, caspase-3, caspase-8, and caspase-9. As a result, the ATO combined with bortezomib group showed more inhibition of RPMI 8266 cell viability than theATO group. Expression of DR4 and DR5 on the cell surfaces, and the apoptosis rate were increased after treatment by ATO alone or combined with bortezomib. The cells appeared to arrest in G2/M phase after treatment. Expression of bcl-2 was more significantly decreased in the combination group, and that of caspase-3, caspase-8 and caspase-9 was significantly increased as well. Therefore, bortezomib can enhance ATO actions to induce apoptosis in RPMI 8266 cells, with decrease in expression of bcl-2 and increase of caspase-3, caspase-8 and caspase-9 proteins.

저항성 운동이 알츠하이머 형질전환 생쥐 뇌의 베타 아밀로이드 대사와 인지기능에 미치는 영향 (The effect of resistance exercise on β-amyloid metabolism and cognitive function in a mouse model of Alzheimer's disease)

  • 장용철;구정훈
    • 한국응용과학기술학회지
    • /
    • 제37권3호
    • /
    • pp.418-428
    • /
    • 2020
  • 본 연구는 알츠하이머(Alzheimer's disease: AD) 형질전환 생쥐를 대상으로 저항성 운동(resistance exercise: RE)이 해마의 베타 아밀로이드(β-amyloid: Aβ) 단백질 대사, 신경세포사멸 및 인지기능에 미치는 영향을 확인하는데 목적이 있다. AD 비 형질전환 생쥐(non-transgenic: non-tg, n=14)와 형질전환 생쥐(transgenic: Tg, n=14)를 무선 배정하여 비 형질전환 생쥐 대조군 (non-tg-control: NTC, n=7), 비 형질전환 생쥐 저항성 운동군(non-tg-RE: NTRE, n=7), 형질전환 대조군(tg-control: TC, n=7) 및 형질전환 저항성 운동군(tg-RE: TRE, n=7)으로 구분하였다. RE는 특수 제작한 사다리 저항성 운동 기구를 사용하여 점진적으로 set 수를 증가시켜 총 8주간 실시하였다. 운동 후 인지기능 능력을 평가하기 위한 수중미로검사와 Aβ 단백질 대사, 신경세포사멸 지표 및 SIRT1/PGC-1α 단백질 발현 수준을 확인하였다. 수중미로검사 결과 거리와 시간 모두 TC 집단에서 유의하게 증가 되었지만 RE를 실시한 TRE 집단에서 거리와 시간이 감소 되어 인지능력이 개선된 것으로 확인되었다. 또한, TC 집단에서 증가된 Aβ 단백질 발현은 RE를 통해 감소하는 것으로 나타났다. 신경세포사멸 관련 단백질인 Bcl-2/Bax ratio는 TC 집단에서 유의하게 감소되어 신경세포사멸이 증가 된 것으로 나타났지만 RE는 Bcl-2/Bax ratio을 증가시켜 신경세포사멸을 감소시킨 것으로 확인되었다. TC 집단에서 증가된 BACE1 및 ROCK1과 감소된 ADAM10과 RARβ 단백질 발현은 RE를 통해 감소되거나 증가 된 것으로 나타났고, SIRT1/PGC-1α 단백질 발현은 TC 집단에서 감소 되었지만 RE를 통해 증가 된 것으로 나타났다. 따라서 8주간의 RE는 AD의 병리학적 특징인 Aβ 단백질 발현을 감소시키고 관련 생성 기전들을 조절하여(SIRT1/PGC-1α 기전 활성, 아밀로이드 생성기전 억제, 비-아밀로이드 생성기전 활성) 신경세포사멸 억제시키고 결과적으로 인지기능을 개선 시킬 수 있는 효과적인 운동 방법이라고 생각된다.

다약제내성 발현 암세포에서 $^{99m}Tc-sestamibi$$^{99m}Tc-tetrofosmin$ 섭취의 비교 (Comparison of the Uptakes of $^{99m}Tc-sestamibi\;and\;^{99m}Tc-tetrofosmin$ in Cancer Cell Lines Expressing Multidrug Resistance)

  • 유정아;정신영;서명랑;곽동석;안병철;이규보;이재태
    • 대한핵의학회지
    • /
    • 제37권3호
    • /
    • pp.178-189
    • /
    • 2003
  • 목적: 다약제내성이 유발된 암세포에서 $^{99m}Tc-sestamibi$$^{99m}Tc-tetrofosmin$의 암세포 내 섭취정도를 비교하고 다약제내성 극복제로 잘 알려진 verapamil 과 cyclosporin A 처리에 의한 두 방사성 의약품의 암세포 내 섭취정도를 비교해 보았다. 재료 및 방법: Doxorubicin으로 다약제내성이 유발된 HCT15/CL02 대장암 세포와 doxorubicin과 vincristine으로 다약제내성을 유발시킨 K562(Adr)과 K562(Vcr) 백혈병 세포를 사용하였다. 다약제내성의 발현은 RT-PCR로 증명하였으며, verapamil은 1, 10, 50, 100, 200 ${\mu}M$의 농도로, cyclosporin A는 0.1, 10, 50, 100 ${\mu}M$의 농도로 각각 사용하였다. MIBI와 tetrofosmin의 암세포내 섭취는 $37^{\circ}C$에서 $1{\times}10^{6}cells/ml$ 농도의 단일세포 부유상태에서 1, 15, 30, 45, 60분 간격으로 배양하여 각 시간대별로 상층액과 침전물을 분리하여 각각의 방사능을 감마 계수기로 측정하였다. 결과: 다약제내성이 발현된 암세포에서는 모세포에 비하여 MIBI와 tetrofosmin의 섭취가 감소되었다. 두 방사성약품의 섭취정도는 HCT15/CL02세포와 K562(Adr)세포에서는 유의한 차이가 없었으나, K562(Vcr)세포에서는 MIBI가 tetrofosmin보다 다소 높았다. Verapamil과 cyclosporin A를 처리하였을 때 MIBI와 tetrofosmin의 섭취율은 기저치보다 모두 증가하였고, verapamil 에 의한 MIBI와 tetrofosmin의 섭취율(30분)을 기저치(30분)와 비교해 본 결과 HCT15/CL02 세포에서($100{\mu}M$)는 각각 11.9배와 6.8배, K562(Adr) 세포에서($50{\mu}M$)는 각각 14.3배와 8배, K562(Vcr) 세포에서($10{\mu}M$)는 각각 7배와 5.7배 증가하였다. Cyclosporin A에 의한 MIBI와 tetrofosmin의 섭취율(30분)을 기저치(30분)와 비교해 본 결과 HCT15/CL02세포에서($50{\mu}M$)는 각각 10배와 2.4배, K562(Adr)세포에서($50{\mu}M$)는 각각 44배와 13배, K562(Vcr)세포에서($10{\mu}M$)는 각각 18.8배와 11.8배 증가하여, MIBI의 섭취율이 tetrofosmin보다 1.2배에서 4배정도 높게 나타났다. 결론: 이러한 결과로 보아 MIBI와 tetrofosmin은 다약제내성의 발현을 평가할 수 있는 방사성의약품으로 판단되며, 다약제내성 극복제의 효능평가에는 MIBI가 tetrofosmin보다 더 우수할 것으로 사료되나, 세포추에 따른 차이가 있을 수 있으므로 보다 많은 세포주에서의 추가적인 연구가 필요할 것이다.

고지방/고콜레스테롤 식이를 섭취한 마우스에서 자색고구마 열수추출물 보충이 지방간 저항성에 미치는 영향 (Effects of an aqueous extract of purple sweet potato on nonalcoholic fatty liver in high fat/cholesterol-fed mice)

  • 이유진;양윤경;김유진;권오란
    • Journal of Nutrition and Health
    • /
    • 제48권1호
    • /
    • pp.1-8
    • /
    • 2015
  • 자색고구마 열수추출물의 간 보호 기능을 확인하기 위해 C57BL/6 마우스를 사용하여 시험하였다. 지방간 유도를 위해 8주간 고지방/콜레스테롤 식이를 급여하였으며, 자색고구마 열수추출물은 1.25, 2.5, 5%의 수준으로 식이에 함께 넣어 같은 기간 동안 제공하였다. 간 조직의 병리학적 분석, 혈장 ALT 활성도, 간 및 혈장의 TC 수준을 바탕으로 비알콜성 지방간 모델이 형성되었음을 확인하였다. 고지방/콜레스테롤 식이의 급여는 식이섭취량을 감소시켜 총 에너지 섭취량은 시험군간 차이가 없었으나, 포화지방을 급원으로 하였을 때 지방세포의 비대와 혈장 TC, 간 TC, 간의 지방구를 증가시키는 것으로 관찰되었다. 한편 자색고구마 열수추출물을 고지방/콜레스테롤 식이와 함께 섭취시킨 결과, 고지방/콜레스테롤 식이로 인한 지질대사 이상을 유의하게 변화시키지 못해 혈액 및 간 손상 지표를 개선시키지 못하였으나, 지방조직의 크기는 작게 유지하고 간의 지방구 형성은 억제하는 것으로 관찰되었다. 이상의 결과로 자색고구마 열수추출물은 지질대사 개선을 통해 간 보호 효과를 갖음을 알 수 있었다. 향후에는 자색고구마 열수추출물이 지방세포-간의 상호 지질대사에 미치는 영향을 추가적으로 연구해야 할 것으로 사료된다.

Hypocholesterolemic effects of curcumin via up-regulation of cholesterol 7a-hydroxylase in rats fed a high fat diet

  • Kim, Min-Ji;Kim, Yang-Ha
    • Nutrition Research and Practice
    • /
    • 제4권3호
    • /
    • pp.191-195
    • /
    • 2010
  • There is an increasing interest in curcumin (Curcuma longa L.) as a cardiovascular disease (CVD) protective agent via decreased blood total cholesterol and low-density lipoprotein-cholesterol (LDL-cholesterol) level. The aim of this study was to investigate further the potential mechanism in the hypocholesterolemic effect of curcumin by measuring cholesterol 7a-hydroxylase (CYP7A1), a rate limiting enzyme in the biosynthesis of bile acid from cholesterol, at the mRNA level. Male Sprague-Dawley rats were fed a 45% high fat diet or same diet supplemented with curcumin (0.1% wt/wt) for 8 weeks. The curcumin diet significantly decreased serum triglyceride (TG) by 27%, total cholesterol (TC) by 33.8%, and LDL-cholesterol by 56%, respectively as compared to control group. The curcumin-supplemented diet also significantly lowered the atherogenic index (AI) by 48% as compared to control group. Hepatic TG level was significantly reduced by 41% in rats fed with curcumin-supplemented diet in comparison with control group (P < 0.05). Conversely, the curcumin diet significantly increased fecal TG and TC. The curcumin diet up-regulated hepatic CYP7A1 mRNA level by 2.16-fold, compared to control group p (P < 0.05). These findings suggested that the increases in the CYP7A1 gene expression may partially account for the hypocholesterolemic effect of curcumin.

신생아 담즙 정체증에서 무담즙변의 유무와 $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 결과간의 상관성과 생화학적 검사의 차이에 관한 연구 (The Correlation between Acholic Stool and the Result of $Tc^{99m}$ DISIDA Hepatobiliary Scintigraphy and Biochemical Test in Neonatal Cholestasis)

  • 주은영;안연모;김용주;문수지;최윤영
    • Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
    • /
    • 제5권1호
    • /
    • pp.51-61
    • /
    • 2002
  • 목적: 신생아 담즙 정체증 환아의 감별을 위해 $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 검사 상 신생아 간염과 간외 담도 폐쇄증 의증의 임상증상, 이학소견, 생화학 검사 등을 비교하고, 무담즙변과 $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 검사의 관련성을 비교함으로서 진단에 도움을 얻고자 하였다. 방법: 1993년 6월부터 2001년 1월까지 한양대학병원 소아과 및 소아외과에 직접반응형 고빌리루 빈혈증을 주소로 입원했던 4개월 미만의 환아 중 $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사를 시행한 29명의 환아들을 대상으로 하였다. 이 중 간외 담도 폐쇄증 의증은 9명이고 신생아 간염은 20명으로 임상증상 및 이학적 소견, 생화학적 검사, $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 결과를 조사하였다. 결과: 1) 간외 담도 폐쇄증 의증 환아가 신생아 간염보다 더 빨리 진단되고, 두 집단 모두 정상체중, 만삭아가 대부분이고, 남아에서 호발했다. 황달은 두집단 모두에게, 무담즙변은 간외 담도 폐쇄증 의증환아 모두에게 나타났으며 신생아 간염은 무담즙 변이 10%에서만 나타났다. 2) 내원 당시 검사상 direct bilirubin이 간외 담도 폐쇄증 의증일 때는 $6{\pm}2.6$ mg/dL, 신생아 간염은 $4.0{\pm}2.5$ mg/dL로 간외 담도 폐쇄증 의증에서 유의하게 증가되었고, 간외 담도 폐쇄증 의증은 소변 bilirubin이 더 많이 나타났다. 3) 간외 담도 폐쇄증 의증에서 direct bilirubin, total bilirubin, ALT, AST, ALP의 정상화되는 기간이 좀 더 오래 걸렸다. bilirubin 수치의 호전을 보이는 비율은 비슷했고 간외 담도 폐쇄증 의증이 심화되는 경우가 22.2%로 더 많았고 주로 수술 후 부작용에 의한 것이었다. 4) 무담즙변 환아 중에 $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 상 소장 내 방사활성이 있는 환아가 18.2%였고, 방사활성이 없는 환아가 81.8%로 나타났고, 간외 담도 폐쇄증 의증으로 판단되어 수술한 환아가 63.6%로 나타났다. 5) 무담즙변 여부와 $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 결과간의 상관계수에서 r 값은 -0.858로서 절대값이 1에 가깝고 음수로 이는 역상관 관계가 높아 무담즙변 환아와 방사활성이 없을 경우, 담즙변 환아와 방사활성이 있는 경우간 상관관계가 높게 나타났다. 6) 무담즙변 환아 중$Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 검사 상 소장 내 방사활성이 없는 환아에서 total bilirubin이 유의하게 증가되어 있고, direct bilirubin, total bilirubin, ALT, AST도 증가되어 있었으나 유의하지는 않았다. 7) $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 검사 상 소장 내 방사활성이 있는 환아 중 무담즙변이 없는 경우에 ALT가 유의하게 높았고, direct bilirubin, total bilirubin, AST는 유의하지 않게 높았으며 무담즙변일 경우에는 ALP, 소변 bilirubin 양성률이 더 높았지만 유의하지는 않았다. 그러나 이에 대해서는 더 많은 환자에 대한 검사가 필요하리라 생각된다. 결론: 간외 담도 폐쇄증 의증 환아는 무담즙변, direct bilirubin 4 mg/dL 이상, 소변 bilirubin 양성, $Tc^{99m}$ DISIDA 간담도 주사 검사 상 방사활성이 없을 때 가능성이 높다. 간외 담도 폐쇄증 의증에서 수술 후 검사결과의 정상화되는 기간이 좀 더 오래 걸리고, 호전되는 경우는 간외 담도 폐쇄증 의증, 신생아 간염이 각각 66.7%, 70%로 두 군이 비슷했다. 심화되는 경우는 간외 담도 폐쇄증 의증에서 더 많았고 주로 수술 후 부작용에 의한 것으로 생각되며 오히려 수술하지 않은 2명에서 특별한치료 없이 호전 양상을 보이기도 했다. 무담즙변 환아 중 방사활성이 없는 환아에서 total bilirubin이 유의하게 증가되었고, 방사활성이 있는 환아 중 무 담즙변이 없는 경우에 ALT가 오히려 유의하게 증가되었으나 더 많은 환자군에 대한 연구가 필요하리라 본다. 무담즙변과 소장 내 방사활성이 없는 경우간에는 유의한 상관관계가 있지만 무담즙변 11명 중 2명(18.2%)에서 소장 내 방사활성이 관찰되었다는 점, 소장 내 방사활성이 없는 환아 9명중 수술 없이도 호전된 환아가 2명(22.2%)으로 관찰되었다는 점등은 무담즙변이 있다는 것과 소장 내 방사활성이 없다는 것만으로 간외 담도 폐쇄증으로 판단될 수 없으며 경피 간침 생검이나 시험 개복술로 확진하여야 한다는 것을 말해 준다.

  • PDF

Escherichia coli의 pBR322 DNA 형질전환에 관여하는 인자에 관한 연구 (Studies on the Factors Influencing the Transformation in Escherichia with pBR322 DNA)

  • 유한상;마점술
    • 대한수의학회지
    • /
    • 제24권1호
    • /
    • pp.40-49
    • /
    • 1984
  • To investigate the factors influencing the artifical transformation in Escherichia coli, E. coli C600 was transformed by pBR322 DNA with tetracycline and ampicillin resistant gene purified by CsCl-Etbr equilibrium density gradient centrifugation from E.coli HB 101. The influencing factors in the transformation such as concentration of calcium chloride, time of ice incubation, temperature and time of heat shock, time of gene expression, effects of plasmid DNA concentration and adding time were examined in these experiments. The results obtained were as follows; 1. The highest transformation frequency was observed in the treatments of 100 mM $CaCl_2$ before heat shock and the treatment of $CaCl_2$ was essential step in the process of E. coli transformation. 2. The highest transformation frequency was observed in the treatment of heat shock at $42^{\circ}C$ for 4 min. or $37^{\circ}C$ for 6 min., but the prolonged heat shock resulted a decreased transformation frequency. 3. Treatments of ice incubation at $0^{\circ}C$ for 45 min. before heat stocks or at $0^{\circ}C$ for 30min. after heat shock resulted an increased transformation frequency. 4. There was a linear relationship between DNA concentration and transformation frequency at the concentration of $8{\times}10^3$ recipient cells. The highest transformation frequency reached in carte of 7 mcg of donor DNA, but above 1 mcg of DNA concentration, transformation frequency was not remarkably increased. Addition of donor DNA just after the treatment of $CaCl_2$ was the best. 5. The best condition of gene expression at $37^{\circ}C$ were 40min. for TC-resistant gene and 100min. for AP-resistant gene. TC-resistant gene was higher in the transformation frequency and faster in the gene expression time than AP-resistant gene. In these results, the best conditions for the transformation of E. coli C 600 with pBR322 DNA were: treatment with 100mM $CaCl_2$, ice incubation at $0^{\circ}C$ for 45 min, heat shock at $42^{\circ}C$ for 4 min., 30 min. of ice incubation and incubation at $37^{\circ}C$ for 100min. for gene expression in that order.

  • PDF