Bone morphogenetic protein-2/4 (BMP-2/4) are members of Transforming Growth $Factor-{\beta}\;(TGF-{\beta})$ superfamily and they may differentiate the osteoprogenitor cell and induce formation of cartilage and bone in vivo. This study was performed to investigate the effects of bone morphogenetic protein-2/4 on the characteristics of rat periodontal ligament cells(RPDL) and rat calvaria cells(RCV). In the control group, the cells were cultured alone with Dulbeco's Modified Eagle's Medium contained with 20% fetal bovine serum, $100{\mu}/ml$ penicillin, $100{\mu}/ml$ streptomycin. In the experimental groups, recombinant human bone morphogenetic protein-2/4 (25ng, 100ng, 250ng/ml) were added into the above culture condition. And then each group was characterized by examing the cell proliferation at 1, 2, 3, 5, 7th day, the amount of total protein synthesis and alkaline phosphatase activity at 2, 5, 7th day. And also, the calcified nodule was examed. The results were as follows ; 1 . Both RCV and RPDL cells in both control and experimental groups proliferated during the entire experimental period, but there is no stastically significant difference according to the BMP-2/4 concentration. 2 . Amount of total protein synthesis of both cells in both groups was steadily increased until 5th day, but all experimental groups were significantly different from the control group at 7th day. 3. Alkaline phosphatase activity of both cells in both groups was increased during the entire experiment period. In RCV cells, the experimental group treated with 100ng/ml and 250ng/ml BMP-2/4 were significantly different from the control group at 7th day. In RPDL cells, the experimental group treated with 100ng/ml and 250ng/ml BMP-2/4 were significantly different from the control group at 5th day, and all experimental groups were significantly different from the control group at 7th day. 4. In the both of the cultured Rat Periodontal ligament and calvaria cell treated with BMP-2/4 to compared with control group, it revealed more rapid cell polarization, cell aggregation and hyperchromatic stained on HE agent, and even though only 1 day treated with BMP-2/4 both RPDL and RCV showed more rapid cell reaction than control group. More sensivitve cell reaction of RCV were observed than RPDL in this experiment. From the above results, we could conclude that BMP-2/4 influenced the induction, proliferation and differentiation of bone forming cells
Wished to examine closely effect that SoPungDoJeokTang-KaMi (SPDJTK) medicines used to atopy dermatitis disease patient get in atopy eruption control experimentally. SPDJTK medicines controlled $CD4^+/IFN-\gamma$, and $CD4^+/CD25^+/foxp3^+$ revelation that an experiment that motive allergy immune reponse because an in vitro experiment stimulates T cells of a NC/Nga mouse same time by anti-CD40/rmIL-4, and interleukin-$1{\beta}$, IL-6, TNF-$\alpha$, and TGF-$\beta$ mRNA outturn that bear in T and B cells decreased remarkably by SPDJTK medicines. Intracellular staining of splenocytes anti-CD40/rmIL-4 plus rmIL-4 stimulated as described in a, assessed after 24 h, SPDJTK exerts a mainly immunosuppressive effect that acts at least partially through suppression of the transcription factor GATA3 expression in $CD4^+$ T cells. Atopic dermatitis (AD) usually develops in patients with an individual or family history of allergic diseases, and is characterized by chronic relapsing inflammation seen specially in childhood, association with IgE hyperproduction and precipitation by environmental factors. However, the exact etiology of AD has been unclear. To further explore the pathogenesis and treatment of AD, a suitable animal model is required. We found that skin lesions, which were clinically and histologically very similar to human AD, mite antigen-induced dermatitis on the face, neck, ears and dorsal skin of inbred NC/Nga mice. Result that Th1 cell and Th2 cell observe to be shifted by cytokine expression with $CD4^+/CD25^+/foxp3^+$ Treg cells induction by SPDJTK medicines could know that SPDJTK medicines can use usefully in allergy autoimmnune diease.
Park, Jae-Heung;Jang, Kyung-Jun;Kim, Cheol-Hong;Kim, Jung-Hee;Kim, Young-Kyun;Yoon, Hyun-Min
대한약침학회지
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제18권1호
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pp.72-78
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2015
Objectives: The stomach is a sensitive digestive organ that is susceptible to exogenous pathogens from the diet. In response to such pathogens, the stomach induces oxidative stress, which might be related to the development of both gastric organic disorders such as gastritis, gastric ulcers, and gastric cancer, and functional disorders such as functional dyspepsia. This study was accomplished to investigate the effect of Ganoderma lucidum pharmacopuncture (GLP) on chronic gastric ulcers in rats. Methods: The rats were divided into 4 groups of 8 animals each: the normal, the control, the normal saline (NP) and the GLP groups. In this study, the modified ethanol gastritis model was used. The rats were administrated 56% ethanol orally every other day. The dose of ethanol was 8 g/kg body weight. The normal group received the same amount of normal saline instead of ethanol. The NP and the GLP groups were treated with injection of saline and GLP respectively. The control group received no treatment. Two local acupoints CV12 (中脘) and ST36 (足三里) were used. All laboratory rats underwent treatment for 15 days. On last day, the rats were sacrificed and their stomachs were immediately excised. Results: Ulcers of the gastric mucosa appeared as elongated bands of hemorrhagic lesions parallel to the long axis of the stomach. In the NP and GLP groups, the injuries to the gastric mucosal injuries were not as severe as they were in the control group. Wound healings of the chronic gastric ulcers was promoted by using GLP and significant alterations of the indices in the gastric mucosa were observed. Such protection was demonstrated by gross appearance, histology and immunehistochemistry staining for Bcl-2-associated X (BAX), B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) and Transforming growth factor-beta 1 (TGF-${\beta}1$). Conclusion: These results suggest that GLP at CV12 and ST36 can provide significant protection to the gastric mucosa against an ethanol induced chronic gastric ulcer.
House dust mite (HDM) as a major allergen and damage-associated molecular pattern (DAMP) such as S100A8 and S100A9 trigger the pathogenesis and severity of allergic disease such as asthma. Regulation of neutrophil apoptosis is an important immune response and its dysregulation is involved in pathogenesis of allergic diseases. In this study, we examined the effects of HDM, S100A8 and S100A9 on spontaneous apoptosis of normal neutrophils. We considered the importance of the difference between in vitro and in vivo results and developed a new in vitro system consisting of a combination of immune cells and T helper (Th) cytokines. Extract of Dermatophagoides pteronyssinus (DP), S100A8, and S100A9 inhibited neutrophil apoptosis in culture of neutrophils alone without other leukocytes. DP and S100A8 more strongly suppressed neutrophil apoptosis in combinations of neutrophils, eosinophils, lymphocytes or monocytes than in a culture of neutrophils alone. Anti-apoptotic effect of S100A9 in the mixture of immune cells was similar to that in neutrophils. DP, S100A8, and S100A9 blocked neutrophil apoptosis, regardless of pretreatment with a T helper (Th) 1 cytokine (IFN-$\gamma$), Th2 cytokines (IL-4 and IL-10), a Th9 cytokine (IL-9), a Th17 cytokine (IL-17), a Treg-producing cytokine (TGF-$\beta$). These findings may enable elucidation of allergy pathogenesis due to HDM and DAMP.
Purpose: The study to pulsed ultrasound effects of diabetes mellitus fracture model in rat. Methods: We used 36 Sprague-Dawely rats which were divided into 3 groups; the animals were divided into group of 4 rats each 4th, 14th and 28th days. All animal was induced diabetes mellitus model to used streptozotocin with 45 mg/kg. Pulsed wave were divided into $50\;mW/cm^2$ and $100\;mW/cm^2$. Results: T-ALP value was significantly change from group II, III on 14th, 28th days (p<0.05). Especially T-ALP value to between groups was significantly change from group II on 14th days (p<0.05). Osteocalcin value was significantly change from group II on 28th days(p<0.05). At fracture site, osteoblast, osteoclast expression was observed from 4th days after treatment and it reached its maximum intensity at 28th days. At fracture site, $TGF-{\beta}_1$ expression was observed from 4th days after treatment and it reached maximum intensity at 14th days. Conclusion: According to this study, diabetes mellitus fracture model to the more effective is divided into $50m\;W/cm^2$ pulsed ultrasound.
한국미생물생명공학회 2000년도 Proceedings of 2000 KSAM International Symposium and Spring Meeting
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pp.178-181
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2000
In order to develop the novel gene expression system, we introduced new control elements which could influence the foreign gene expression in animal cells. When the foreign genes are introduced into the genome of higher eukaryotic cells, the expressions from these integrated genes are often low and can vary greatly depending on the positions of the integration sites due to the complex nature of the chromatin structures (1). First we screened the various DNA sequence elements which can function as an insulator of gene expression from these position effects and can cooperate with the SV40 enhancer/promoter. Among the several DNA elements from the various sources, we identified the particular DNA element which confers the increased frequency of the positive colonies, assayed by the reporter gene from stable selections indicating significantly reduced position effects. This element also showed the several fold-increased expression level as well as the copy-number dependent expression with host cell specificity. Second we modified the transcription termination element where we introduced the specific terminator in combination with SV40 polyA signal. This modified terminator showed the increased efficiency and the level of the gene expression. By combining these two elements, we made the animal cell expression system and tested successfully for the recombinant protein productions of TGF ${\beta}$-soluble receptor, Antithrombin III, and single chain Pro-Urokinase. [Supported by grants from MOCIE]
Objective: This study aimed to evaluate the effect of an intentionally created socket on bone remodeling with orthodontic tooth movement in rabbits. Methods: Eighteen male rabbits weighing 3.8 - 4.25 kg were used. An 8-mm deep and 2-mm wide socket was drilled in the bone 1 mm mesial to the right mandibular first premolar. The left first premolar was extracted to serve as an extraction socket. A traction force of 100 cN was applied to the right first premolar and left second premolar. Sections were obtained at the middle third of the moving tooth for both the drilled and extraction sockets and evaluated with hematoxylin and eosin staining and immunohistochemical analyses. The amount of tooth movement and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive cell count were compared between the 2 groups using the Mann-Whitney U test. Results: At week 2, the distance of tooth movement was significantly higher in the intentional socket group (p < 0.05) than in the extraction socket group. The number of TRAP-positive cells decreased in week 2 but increased in week 3 (p < 0.05). However, there were no significant differences between the groups. Furthermore, results of transforming growth factor (TGF)-${\beta}$ staining revealed no significant differences. Conclusions: The intentional socket group showed greater distance of tooth movement than did the extraction socket group at week 2. Osteoclast counts and results of immunohistochemical analyses suggested elevated bone remodeling in both the groups. Thus, osteotomy may be an effective modality for enhancing tooth movement in orthodontic treatment.
Subimerb, Chutima;Wongkham, Chaisiri;Khuntikeo, Narong;Leelayuwat, Chanvit;McGrath, Michael S.;Wongkham, Sopit
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권10호
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pp.4217-4224
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2014
Cholangiocarcinoma (CCA), a slow growing but highly metastatic tumor, is highly prevalent in Northeast Thailand. Specific tests that predict prognosis of CCA remain elusive. The present study was designed to investigate whether peripheral blood leukocyte (PBL) transcriptional profiles might be of use as a prognostic test in CCA patients. Gene expression profiles of PBLs from 9 CCA and 8 healthy subjects were conducted using the Affymetrix HG_U133 Plus 2.0 GeneChip. We indentified informative PBLs gene expression profiles that could reliably distinguish CCA patients from healthy subjects. Of these CCA specific genes, 117 genes were up regulated and 60 were down regulated. The molecular and cellular functions predicted for these CCA specific genes according to the Gene Ontology database indicated differential PBL expression of host immune response and tumor progression genes (EREG, TGF ${\beta}1$, CXCL2, CXCL3, IL-8, and VEGFA). The expression levels of 9 differentially expressed genes were verified in 36 CCA vs 20 healthy subjects. A set of three tumor invasion related genes (PLAU, CTSL and SERPINB2) computed as "prognostic index" was found to be an independent and statistically significant predictor for CCA patient survival. The present study shows that CCA PBLs may serve as disease predictive clinically accessible surrogates for indentifying expressed genes reflective of CCA disease severity.
호흡기 바이러스 감염은 모든 연령층의 천식에 상당한 영향을 미치는 데 영아에서 RSV는 천명을 야기하고 대부분 일시적이나 재발성 일수도 있다. 어릴 때 바이러스 감염은 면역체계 형성에 영향를 미쳐 알러지와 천식의 위험을 완하할 수있다고 한다. 또한 소아와 성인 천식에서 RV같은 감기 바이러스는 천식의 급성 증상을 유발한다. 호흡기 바이러스 감염에 대한 면역반응이, 기관지로 부터 바이러스 제거 기능외에 기도수축과 호흡기 증상에 관여한다고 한다. 이러한 변화가 일어나는 기전은 호흡기 바이러스가 proinflammatory 사이토카인과 매개체 생성을 유도하는 능력과 연관성이 있는 것 같고 이들이 상하기도 호흡기 증상 및 기도반응 변화에 관여하는 것으로 생각된다. 호흡기 바이러스 감염에 대한 면역반응을 요약하면 바이러스 감염으로 상피세포, 내피세포, 과립백혈구가 활성화되며, 상피세포는 사이토카인, 키모카인, 매개체들을 분비하여 항 면역 반응를 주도하다. 이와 같은 상피세포와 다른 기관지 세포들의 조기 활성화로 내피 세포에 유착분자 표현을 증가시켜 백혈구 동원 증가 및 혈관 투과성을 증가시켜 부종과 분비물을 증가시킨다. 바이러스 또는 바이러스 유발 사이토카인에 의해 활성화된 과립 백혈구, 대식세포, T세포들도 기도염증 증가, 기도폐쇄를 야기하고 기도반응을 증가시킨다. 세포독성 임파구에 의한 바이러스 감염세포의 분해, TGF-$\beta$ IL-10 같은 사이토카인에 의해 부분적으로 염증억제, 기도 remoldeling에 의한 기도구조의 재생등이 바이러스 감염후 기관지 기능의 지속적 변화를 결정한다. 끝으로 천식환자에서 RV 감염의 병인에 관한 기본적 문제는 RV감염이 정상인에서는 경한 증상을 나타내는 데 천식환자에서는 왜 심한 임상증상을 나타내는지 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 항 바이러스에 대한 면역반응이 천식환자에서 손상되었는지 또는 천식환자에서 RV감염에 의한 중증의 임상증상은 어떤 다른 세포가 관여하는지? 이들에 대한 답은 기도염증이 천식에서 어떻게 조절되는지 또한 바이러스 감염에 의한 악화된 증상을 어떻게 치료할 것인가에 대한 방향을 제시해줄 것이다.
Human Hertwig's epithelial root sheath/epithelial rests of Malassez (HERS/ERM) cells are epithelial remnants of teeth residing in the periodontium. Although the functional roles of HERS/ERM cells have yet to be elucidated, they are a unique epithelial cell population in adult teeth and are reported to have stem cell characteristics. Therefore, HERS/ERM cells might play a role as an epithelial component for the repair or regeneration of dental hard tissues; however, they are very rare population in periodontium and the primary isolation of them is considered to be difficult. To overcome these problems, we immortalized primary HERS/ERM cells isolated from human periodontium using SV40 large T antigen (SV40 LT) and performed a characterization of the immortalized cell line. Primary HERS/ERM cells could not be maintained for more than 6 passages; however, immortalized HERS/ERM cells were maintained for more than 20 passages. There were no differences in the morphological and immunophenotypic characteristics of HERS/ERM cells and immortalized HERS/ERM cells. The expression of epithelial stem cell and embryonic stem cell markers was maintained in immortalized HERS/ERM cells. Moreover, immortalized HERS/ERM cells could acquire mesenchymal phenotypes through the epithelial-mesenchymal transition via TGF-${\beta}1$. In conclusion, we established an immortalized human HERS/ERM cell line with SV40 LT and expect this cell line to contribute to the understanding of the functional roles of HERS/ERM cells and the tissue engineering of teeth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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