Superoxide dismutase (SOD) 고생산세포주로 선발된 토마토(Lycopersicun esculentum) 배양세포를 사용하여 현탁배양에 따른 SOD 활성과 isoenzyme변화를 조사하고 토마토 식물체의 것과 비교하였다. 현탁배양은 세포생중량 2 g을 1 mg/L 2,4-D, 30 g/L sucrose를 함유한 MS 배지 50 mL과 함께 mL flask에서 $25^{\circ}C$암상태로 배양(100 rpm)하였다. 세포생장은 계대배양후 20일에 최고점에 도달한 후, 급격히 감소하며 배양 후 23일부터 세포가 검게 변하였다. 세포 단위무게당 SOD활성(unit/g dry cell wt)은 배양 후 23일부터 증가하여 28일째에 최고활성(52,400 unit)을 나타낸 후 급격히 감소하였다. 세포 밖으로 분비되는 extracellular SOD활성은 배양 후 25일에 최고치(27,800 unit/so mL medium)를 나타낸 후 감소하였다. Flask 전체의 SOD활성은 배양 후 25일에 최대치(35,700 unit)를 나타내었으며 extracellular SOD 활성이 약 75%을 차지하였다. 토마토 배양세포에는 4개의 SOD isoenzyme이 존재하며, isoenzyme의 패턴변화는 세포생장에 따른 효소활성의 변화와 일치하였다. 토마토 식물체는 배양세포에 없는 CuZnSOD가 존재하며 배양세포와 식물체 조직사이에는 서로 다른 isoenzyme 패턴이 존재함을 알 수 있었다.
Using superoxide dismutase (SOD)-deficient mutants of Saccharomyces cerevisiae, the oxidative stresses induced by 0.1 mM of copper ion $(Cu^{++})$ was studied. In aerobic culture condition, yeasts lacking MnSOD (mitochondrial SOD) showed more significant growth retardation than CuZnSOD (cytoplasmic SOD)-deficient yeasts. However, not so big differences in growth pattern of those mutants compared withwild type were observed under anaerobic condition. It was found that, under aerobic condition, the supplementation of 0.1 mM copper ioh:(Cu") into culture medium caused the remarkable increase of CuZnSOD but not so significant change in MnSOD. It was also observed that catalase activities appeared to be relatively high in the presence of copper ion in spite of the remarkable reduction of glutathion peroxidase in CuZnSOD-deficient yeasts, but the slight increments of catalase and glutathion peroxidase were detected in MnSOD-deficient strains. It implies that the lack of cytoplasmic SOD could be compensated mainly by catalase. However, these phenomena resulted in the significantincrease of cellular lipid peroxides content in CuZnSOD-deficient yeasts and the slight increment of lipid peroxides in MNSOD-deficient cells. In anaerobic cultivation supplementing copper ion, the cellular enzyme activities of catalase and glutathion peroxidase in SOD-deficient yeasts were slightly increased without any significant changes of lipid peroxides in cell membrane. It suggests that a little amount of free radicals generated by copper ion under anaerobic condition could be sufficiently overcome by catalase as well as glutathion peroxidase.dase.
$SO_2$에 대한 양버즘나무의 내성을 증대시키고자 생장왜화제인 uniconazole을 토양주입하고, 그 내성 기작을 superoxide dismutase와 peroxidase의 역할과 관련하여 조사했던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Uniconazole은 농도가 높아질 수록 간장, 엽면적 및 T/R율(率)을 현저하게 감소시키고, 엽록소 농도와 superoxide dismutase 및 peroxidase활성을 현저하게 증가시켜 $SO_2$ 처리에 의한 가시피해를 유의성있게 경감시켰다. Diethyldithiocarbamate를 엽면살포하였을때, superoxide dismutase와 peroxidase 활성이 현저하게 불활성화되어 $SO_2$ 처리에 의한 가시피해(可視被害)가 증가되었으며 uniconazole 처리에 의해 증대되었던 $SO_2$ 내성은 diethyldithiocabamate 처리에 의하여 다시 감소되었다. 이상과 같이 uniconazole은 식물생장의 왜화(矮化)에 의한 조직의 치밀화 이외에 SOD와 POD의 활성증대를 통해 $SO_2$에 대한 내성을 증대시킨 것으로 판단된다.
To evaluate the effect of antioxidant on the cytotoxicity induced by oxidative stress of reactive oxygen species (ROS) in cultured human skin melanocytes, colorimeric assay of XTT and tyrosinase activity assay were adopted after human skin melanocytes were preincubated for 2 hours in the media containing various concentrations of superoxide dismutase (SOD) before the treatment of hydrogen peroxide. Light microscopic study was carried out in same cultures. The results of this study were as follows 1. Cell viability of human skin melanocytes was significantly decreased by 30 and $40{\mu}M$ of hydrogen peroxide($H_2O_2$), respectively. 2. XTT50 was determined at $30{\mu}M$ after human skin melanocytes were treated with $10{\sim}40{\mu}M$ of hydrogen peroxide for 6 hours. 3. The cell viability of cultured human skin melanocytes pretreated with SOD was increased than that of cultured human skin melanocytes treated with $H_2O_2$ dose-dependently. 4. In tyrosinase activity of human skin melanocytes, the cell treated with SOD showed brown stain compared with $H_2O_2$ treated cells, dark stain. 5. In light microscopy, cultured human skin melanocytes exposed to $H_2O_2$ showed morphological changes such as the decreased cell number and cytoplasmic processes, compared with control. 6. In light microscopy, cultured human skin melanocytes pretreated with SOD showed the increase of cell number and cytoplasmic processes compared with $H_2O_2-treated$ group. From these results, it is suggested that oxidative stress of ROS such as $H_2O_2$ has cytotoxicity by showing the decreased cell viability, the increased tyrosinase activity and mophological changes of the decreased cell number and cytoplasmic processes. While, antioxidant like SOD was effective in the prevention of oxidative stress-mediated cytotoxicity by the increased cell viability, decreased tyrosinase activity and the protection of degenerative morphological changes in cultured human skin melanocytes.
The reactive oxygen species (ROS) are considered to be an important mediator in pancreatic ${\beta}$ cell destruction, thereby triggering the development of insulin-dependent diabetes mellitus. In the present study, HIV-1 Tat-mediated transduction of Cu,Zn-superoxide dismutase (SOD) was investigated to evaluate its protective potential against streptozotocin (STZ)-induced cytotoxicity in insulin-producing MIN6N cells. Tat-SOD fusion protein was successfully delivered into MIN6N cells in a dose-dependent manner and the transduced fusion protein was enzymatically active for 48 h. The STZ induced-cell destruction, superoxide anion radical production, and DNA fragmentation of MIN6N cells were significantly decreased in the cells pretreated with Tat-SOD for 1 h. Furthermore, the transduction of Tat-SOD increased Bcl-2 and heat shock protein 70 (hsp70) expressions in cells exposed to STZ, which might be partly responsible for the effect of Tat-SOD. These results suggest that an increased of free radical scavenging activity by transduction of Tat-SOD enhanced the tolerance of the cell against oxidative stress in STZ-treated MIN6N cells. Therefore, this Tat-SOD transduction technique may provide a new strategy to protect the pancreatic ${\beta}$ cell destruction in ROS-mediated diabetes.
Kang, Kyu-Tae;Sullivan, Jennifer C.;Pollock, Jennifer S.
Toxicological Research
/
제34권4호
/
pp.363-370
/
2018
Many studies reported reduced antioxidant capacity in the vasculature under hypertensive conditions. However, little is known about the effects of antihypertensive treatments on the regulation of vascular antioxidant enzymes. Thus, we hypothesized that antihypertensive treatments prevent the reduction of antioxidant enzyme activity and expression in the small vessels of angiotensin II-induced hypertensive rats (ANG). We observed the small mesenteric arteries and small renal vessels of normotensive rats (NORM), ANG, and ANG treated with a triple antihypertensive therapy of reserpine, hydrochlorothiazide, and hydralazine (ANG + TTx). Systolic blood pressure was increased in ANG, which was attenuated by 2 weeks of triple therapy (127, 191, and 143 mmHg for NORM, ANG, and ANG + TTx, respectively; p < 0.05). Total superoxide dismutase (SOD) activity in the small mesenteric arteries of ANG was lower than that of NORM. The protein expression of SOD1 was lower in ANG than in NORM, whereas SOD2 and SOD3 expression was not different between the groups. Reduced SOD activity and SOD1 expression in ANG was not restored in ANG + TTx. Both SOD activity and SOD isoform expression in the small renal vessels of ANG were not different from those of NORM. Interestingly, SOD activity in the small renal vessels was reduced by TTx. Between groups, there was no difference in catalase activity or expression in both the small mesenteric arteries and small renal vessels. In conclusion, SOD activity in the small mesenteric arteries decreased by angiotensin II administration, but not by hypertension, which is caused by decreased SOD1 expression.
The superoxide anion radical$(O_2)$ poses a threat to macromocules and cell organelles of the living cells. This toxicity damage to all groups of proteins results in loss of enzyme function concerned with metabolism and ion transport, and peroxidation of unsaturated fatty acids and cholesterol results in a change of permeability characteristics of the membrane, and oxidative of nucleic acids results in genomic damage and thereby cause mutation, potential carcinogenesis and somatic damage that produce cellular aging Superoxide dismutase(SOD) has received substantial attention as a potential therapeutic agent. It has been investigated as a possible agent for the prevention of ontogenesis, the reduction of cytotoxic effect of anticancer drugs, and protection against damage in ischemic tissue. It is suggest that $O_2$ is concerned with cellular aging, thereafter we need to investigate herb that activated to SOD.
글루코오스 산화효소와 수피옥사이드 디스뮤타제가 유지의 산화를 억제할 수 있는지 여부를 알아보기 위하여 이들 효소와 기질을 어유에 직접 용해시키고 시료를 vial에 담아 저장하면서 상부공간의 산소함량과 어유의 과산화물값의 변화를 측정하였다. GO 첨가구의 경우 산소의 감소속도는 대조구와 비슷하였으나 과산화물값은 훨씬 낮은 수준이었다. 이러한 결과는 산소의 일부가 GO의 기질로 소모되어 유지의 산화에 공급된 산소가 제한되었기 때문으로 풀이된다. SOD를 첨가하였을 때에도 유지의 산화가 억제되었는데 이는 SOD가 반응성이큰 일중항 산소를 기저상태의 산소로 전환시킬 수 있었기 때문으로 생각된다.
Expression of human Cu.Zn-superoxide dismutase (SOD) with activity comparable to human erythrocyte enzyme was achieved in E. coli B21(DE3) by using the pET-17b expression vector containing a T7 promoter. Recombinant human SOD was found in the cytosol of disrupted bacterial cells and represented > 25% of the total bacterial proteins. The protein produced by the E. coli cells was purified using a combination of ammonium sulfate precipitation, Sephacryl S-100 gel filtration and DEAE-Sephacel ion exchange chromatography. The recombinant Cu,Zn-SOD and human erythrocyte enzyme were compared using dismutation activity, SDS-PAGE and immunoblotting analysis. The mass of the subunits was determined to be 15,809 by using a electrospray mass spectrometer. The copper specific chelator. diethyldithiocarbamate (DOC) reacted with the recombinant Cu,Zn-SOD. At $50{\mu}M$ and $100{\mu}M$ concentrations of DOC, the dismutation activity was not inhibited for one hour but gradually reduced after one hour. This result suggests that the reaction of DOC with the enzyme occurred in two distinct phases (phase I and phase II). During phase I of this reaction, one DOC reacted with the copper center, with retention of the dismutation activity while the second DOC displaced the copper, with a loss of activity in phase II.
Cu,Zn-superoxide dismutase (SOD) was purified from horseradish by using Mono Q and Superose 12 FPLC column chromatography. The native molecular mass of the purified enzyme was approximately 33 kDa, as determined by gel filtration. The subunit molecular weight, as estimated by SDS-PAGE, was 16 kDa. These results indicated that the native enzyme is a homodimer. We investigated the free radical-generating function of horseradish Cu,Zn-SOD by using a chromogen, 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonate) (ABTS) which reacts with ${\cdot}OH$ radicals to form $ABTS^{+{\cdot}}$ The formation of $ABTS^{+{\cdot}}$ was required for both active Cu, Zn-SOD and $H_2O_2$. The optimal pH for the free radical-generating activity of this enzyme was 6.0-8.0, and it retained about $40^{\circ}C$ of its maximum activity when exposed at $40^{\circ}C$ for 15 min. A neutral scavenger, ethanol, inhibited the $ABTS^{+{\cdot}}$ formation by horseradish Cu, Zn-SOD more effectively than that by the mammalian enzyme. These results suggest that the active channel of horseradish enzyme is slightly larger than that of the mammalian enzyme.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.