• Title/Summary/Keyword: Sucrose gradient

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오존에 의한 bacteriophage f2의 살균작용(殺菌作用) (Ozone Inactivation of Bacteriophage f2)

  • 김치경
    • Applied Microscopy
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    • 제11권1호
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    • pp.29-38
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    • 1981
  • Bacteriophage f2 were treated with ozone at various concentrations for 20 minutes. The inactivation kinetics of f2 phage were examined during ozonation. In order to study the mode of action of ozone on the phage f2, absorption of the phage to the host pili was meassured by utilyzing radioactivity of tritium incorporated into the phage RNA. Sucrose density gradient analysis and electron microscopy were also used to prove the mechanism of ozone inactivation of the phage. Strucural proteins of the phage were broken by ozonation into many protein subunits. The extent of phage breakage was proportional to ozone concentration and reaction time. Percent decrease of the phage absorption to the host pili was coincident with the rate of ozone inactivation of the phage. Ozone inactivation of bacteriophage f2 was shown to be caused by the breakage of the structural protein and blockage of the phage absorption to the host pili.

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Bacteriophage Sigma FA1의 치사활성과 구조특성 (Killing Activity and Molecular Properties of Bacteriophage Sigma FA1 of Bacillus circulans)

  • 김철호;김동수
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.553-560
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    • 1991
  • Bacillus circulans로부터 mitomycin C처리에 의해 유발되는 Bacteriophage Sigma FA1을 서당밀도균배 원심법 (sucrose gradient centrifugation)에 의해 분리, 정제하였다. Sigma FA1의 감수성숙주에 대한 치사작용은 single-hit 방식이었다. 한편, 세포에 감여된 후 phage DNA는 천천히 분해되기 시작했으며, 본 연구의 결과는 Sigma FA1의 세포에 대한 치사작용이 기존의 것과는 다른 것임을 입증시켰으며, 이는 단 백질분해기능에서 유래되는 듯 했다.

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한국에서 분리된 Ustilago maydis 바이러스의 유전자의 변이와 독소의 특이성 (Genomic Variation and Toxin Specificity of Ustilago maydis Virus Isolated in Korea)

  • Hee, Hwang-Seon;Yie, Se won
    • 미생물학회지
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    • 제31권3호
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    • pp.184-188
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    • 1993
  • Novel Ustilagomaydis strains, designated as SH1 to 14 containing new types of ds RNA segments, are identified from corn smut in Korea. Among 14 isolates, 7 isolates appear to posses virus particles and the other isolates may contain dsRNA as a plasmid form. The pattern of dsRNA is highly diverse form a typical P-type containing one or more of H, M, and L dsRNAs to the one containing one or move M dsRNAs. It is likely that the strains containing H dsRNA posses virus particles which were confirmed by sucrose density gradient followed with different range of specificity and the activity of the strain (SH14) is stronger than A4 toxin. The sensitivity of 14 isolates is also very diverse and two strains (SH10, SH11) appear tobe universal sensitve strains against 5 tested toxin samples.

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Sensitization Effects of Hyperthermia on Bleomycininduced DNA Strand Breaks and Replication Inhibition in CHO-$K_1$ Cells in Vitro

  • Kim, Chan-Gil;Kim, Hyeon-Suk;Park, Sang-Dai
    • 한국환경성돌연변이발암원학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.88-93
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    • 1995
  • Effects of hyperthermia on the induction of DNA single strand breaks and replication inhibition were studied in bleomycin-treated CHO-K$_1$ cells by alkaline elution and alkaline sucrose gradient sedimentation. Bleomycin-induced DNA single strand breaks of DNA were dose-and time-dependently increased, and these strand breaks of DNA were gradually rejoined as post-incubation time passed. Treatment with hyperthermia alone did not affect the induction of DNA single strand breaks. However, pre-exposure of cells to hyperthermia followed by bleomycin treatment greatly increased the single strand breaks, and also reduced the rejoining processes of bleomycin-induced DNA single strand breaks. Bleomycin selectively inhibited the replicon initiation. The combined treatment with hyperthermia and bleomycin markedly potentiated the nonspecific inhibition of replication.

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가잠의 연화병바이러스에 관한 연구 I. 연화병바이러스의 정제 (Studies on Flacherie and Ina-flacherie Viruses of the Silkworm, Bombyx mori I. Purification of Viruses)

  • 강석권
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.25-32
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    • 1977
  • 1. 종내의 보고된 FV의 체제법을 비교검토한 결과, 어느방법도 정제도 및 정제효률에 문제가 있음을 지적하였다. 2. 종내의 정제방법을 개량하여 정제도.정제효율이 뛰어난 FV의 정제법을 확립하였다. 3. 새로운 정제법을 이나주바이러스의 정제에 적용한 결과, 본바이러스의 정제에도 유효함이 구명되었으며 동시에 최초로 본 바이러스를 정제하는데 성공하였다. 4. 새로운 정제법으로 정제한 FV 및 이나주바이러스 입자를 전자현미경으로 관찰한 결과, 이들 바이러스입자는 구형입자이고, 그 직경은 전자는 27nm, 후자는 20nm이었다. 또 이나주바이러스 입자의 침강정수는 80S였다.

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농도분배에 따라 분리한 사람 적혈구 막에 관한 연구 (Studies of Density-Fractionated Human Ervthrocvte Membranes)

  • 정종문
    • 한국동물학회지
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    • 제37권4호
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    • pp.597-604
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    • 1994
  • Membranes obtained from the normal human RBC population were separated by continuous sucrose density gradient centrifugation and the density-fractionated membranes were then examined for changes in molecular markers. This study focuses on changes of (i) the membrane protein profile, (ii) differences in membrane-associsted enzyme activities, and (iii) the amount of autologous IgG bound. The following observations were made: (i) ratios for band 4. la over the sum of bands (4. la + 4.Ib) ranged from 0.58 to 0.79 for membranes of lowest density; (ii) significant changes in bound glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and acetvlcholinesterase activities were found; (iii) the amounts of autolosous IgG's attached to the red blood cells was highest in the membrane fraction of lowest density.

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Identification of novel $Ca^{2+}$ binding proteins in junctional sarcoplasmic reticulum of rabbit skeletal muscle

  • Jung, Dai-Hyun;Mo, Sang-Hyun;Kim, Do-Han
    • 한국생물물리학회:학술대회논문집
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    • 한국생물물리학회 2002년도 제9회 학술 발표회 프로그램과 논문초록
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    • pp.56-56
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    • 2002
  • Muscle contraction and relaxation are regulated by the sarcoplasmic reticulum (SR)-mediated $Ca^{2+}$ release and $Ca^{2+}$ uptake. The SR functions are closely related with the proteins residing in the SR such as ryanodine receptor, $Ca^{2+}$-ATpase, calsequestrin, triadin and junctin. In an effort to further identify important functional SR proteins, experiments of sucrose-density gradient of SR fractionation, concanavalin A treatment, 2D gel electrophoresis, $^{45}$ Ca$^{2+}$ overlay, Strains-all staining, and peptide finger printing (PFP) were carried out.(omitted)d)

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사람 적혈구막 Band 3의 정제 및 Liposome으로의 도입 (Purification of Band 3 from the Human Erythrocyte Membrane and its Incorporation into Liposome)

  • 김재룡;김정희;이기영
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제3권1호
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    • pp.41-48
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    • 1986
  • 사람의 적혈구막으로부터 Band 3를 분리정제하고 이를 liposome 내로 도입시켜 그 결과를 관찰하였다. 적혈구를 약알칼리 저장액으로 용혈시켜 막을 분리한 후, 저이온강도 용액으로 처리하여 Band 4를 추출하였다. Triton X-100 추출액에 p-chloromercuribenzoate를 가하고 sucrose density gradient ultracentrifugation후 fractionation하여 Band 3를 정제하였다. phosphatidyl L-serine과 cholesterol을 1 : 1 molar ratio로 섞고 진공회전 증발기를 사용하여 chloroform을 제거한 후 Triton X-100을 제거한 Band 3용액을 가하고 sonication함으로 liposome(reverse-phase evaporation vesicle)을 만들면서 Band 3를 도입 시켰다 Band 3의 분리정제 및 liposome에 도입되었음은 sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel 전기영 동 후 coomassie brilliant blue 염색으로 확인할 수 있었다.

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계혈청(鷄血淸)에 들어 있는 뇌염(腦炎)바이러스에 대한 비특이물질 및 거위 혈구(血球)에 대한 응집소의 성상(性狀)에 관한 연구(硏究) (The nature of non-specific inhibitor and natural agglutinin for goose erythrocytes in chicken serum)

  • 정영석
    • 대한수의학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.123-136
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    • 1971
  • 이 실험(實驗)은 계혈청(鷄血淸)에 들어 있는 뇌염(腦炎)바이러스에 대한 비특이억제물질(非特異抑制物質)(NSI)의 성상(性狀)과 이의 Acetone-ether와 Kaolin 처리(處理)에 의한 NSI의 제거효력(除去效力)등을 Gel filtration 및 Zonal Centrifugation technique를 이용하여 시험 하였다. 그 결과(結果) (1) 계혈청(鷄血淸)에 들어 있는 비특이 억제물질은 Group A arbovirus 보다 Group B arbovirus에 대하여 더 예민하였다. (2) 연령(年齡)에 의한 NSI의 역가(力價)차이는 없었다. (3) NSI를 제거(除去)하기 위한 Acetone-ether 및 Kaolin 처리는 그 효력면에서 차이가 없었다. (4) 계혈청(鷄血淸)을 일정한 온도(溫度)로 가열(加熱)하면 NSI의 역가(力價)가 상승(上昇) 하였다. (5) NSI의 성분(成分)은 Gel filtraction에서 주로 첫 Peak (IgM)에 있었고, Zonal Centrifugation에서는 원심관의 상층(上層)에 있는 것으로 보아, 이것은 분자량(分子量)은 크고 Density는 낮은 지질단백(脂質蛋白)으로 생각된다. (6) 거위 적혈구에 대한 응집소(NA)는 acetone-ether 처리에 의하여 부분적(部分的)으로 파괴 되었으나 Kaolin 처리에서는 그렇지 못하였고, 10% 거위혈구액으로써 완전 제거할 수 있었다. (7) NA는 Gel filtration 및 Zonal Centrifugation에서 첫 peak (IgM)에 나타났다.

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Cymbidium mild mosaic virus의 분리동정 (Isolation of Cymbidium mild mosaic virus)

  • 장무웅
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제17권3호
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    • pp.131-138
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    • 1978
  • Cymbidium의 mild mosaic 병주로부터 각종 초본식물에 즙액접종되는 소구형 바이러스를 분리하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 본 바이러스를 즙액접종하였을 때 C. amaranticlor, C. quinoa, Cymbidium spp., Dianthus caryophyllus는 전신감염, C.ficifolium, Gomphrean globosa는 국부감염되었다. 2. 본 바이러스는 Myzus persicae로 전반되지 않고, 영양번식기관에 의하여 전반되었다. 3. 조즙액중의 불활성화한계는 내열성이 $90^{\circ}C$ (10분)이고 내희석성이 $10^{-6}$, 내보존성이 60일 $(20^{\circ}C)$이였다. 4. 본 바이러스는 C. amaranticolor병엽을 동결후, chlorform으로 청등하여 분획원심분리와 sucrose density gradient 원심분리법으로 순화하였다. 5. 순화시료의 자외선흡수곡선은 최고 261nm, 최저 243nm이고 260/280=1.72, 최고/최저=1.26의 핵단백에 의한 흡수곡선을 나타냈다. 침강계수는 $S_{20,w}=126$의 수치가 얻어졌다. 6. 本 바이러스의 항혈청은 침강반응혼합법에 의해 2,025배의 역가를 나타냈고, 한천내확산법에 의한 시험에서 CarMV와 혈청학적관계가 있는 것으로 나타났다. 7. 本 바이러스의 형태는 직경 약 28nm의 소구형(다면체) 입자이고, empty particles도 소수 관찰되었다. 5. 본 바이러스에 감염된 C. amaranticolor, C. ficifolium, Cymbidium spp.의 병엽초박절편을 전자현미경으로 관찰하였든 바, 각종 세포의 세포질, 액포 및 도관내에 소구형 입자가 산재 또는 집괴의 소재양식으로 확인되었다. 9. 이상의 결과를 종합해서 본 바이러스를 Cymbidium mild mosaic virus로 명명한다.

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