It has been established that a graft of fibroblasts is able to improve wound healing. However, there has been no research on the effect of a graft of bone marrow stromal cells on wound healing. The wound healing process requires cell proliferation and production of extracellular matrix and various growth factors. The purpose of this study was to compare the abilities of human fibroblasts and bone marrow stromal cells, which contains mesenchymal stem cells, to proliferate and to produce collagen. Human bone marrow stromal cells and fibroblasts were isolated from bone marrow and dermis of the same patients and grown in culture respectively. Cell proliferation and production of type I collagen by human bone marrow stromal cells and dermal fibroblasts were examined by MTT method and by ELISA of cell culture media on day 1, 3, and 5 days post-incubating. The human bone marrow stromal cells showed 11-17% higher cell proliferation than fibroblasts at each time interval. The levels of type I collagen in the human bone marrow stromal cell group was also significantly higher than those in the fibroblast group. The results indicate that the grafts of human bone marrow stromal cells can show more promising effect than that of fibroblasts for healing of chronic wounds.
Objective: To investigate the stem cell-like characteristics of human periodontal ligament (PDL) stromal cells outgrown from orthodontically extracted premolars and to evaluate the potential for myogenic differentiation. Methods: PDL stromal cells were obtained from extracted premolars by using the outgrowth method. Cell morphological features, self-replication capability, and the presence of cell-surface markers, along with osteogenic, adipogenic, and chondrogenic differentiation, were confirmed. In addition, myogenic differentiation was induced by the use of 5-aza-2'-deoxycytidine (5-Aza) for DNA demethylation. Results: PDL stromal cells showed growth patterns and morphological features similar to those of fibroblasts. In contrast, the proliferation rates of premolar PDL stromal cells were similar to those of bone marrow and adipogenic stem cells. PDL stromal cells expressed surface markers of human mesenchymal stem cells (i.e., CD90 and CD105), but not those of hematopoietic stem cells (i.e., CD31 and CD34). PDL stromal cells were differentiated into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic lineages. Myotube structures were induced in PDL stromal cells after 5-Aza pretreatment, but not in the absence of 5-Aza pretreatment. Conclusions: PDL stromal cells isolated from extracted premolars can potentially be a good source of postnatal stem cells for oromaxillofacial regeneration in bone and muscle.
Mouse malignant T-lymphoma CS21 cells can grow when cocultured with CAl2 lymph node stromal cells, but they undergo apoptotic cell death with DNA fragmentation when separated from CA12 stromal cells. In the course of examining the effects of the soluble factor (s) secreted by CAl2 stromal cells on CS2l cell growth, we found that thiols including cysteine promoted CS2l cell growth. P388 cell growth was also promoted by various thiols. These results suggest that thiols including cysteine participate in CA12 and P388 cell growth.
Seo, Dong-lin;Han, Seung-Kyu;Chun, Kyung-Wook;Kim, Woo-Kyung
Archives of Plastic Surgery
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v.35
no.6
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pp.653-658
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2008
Purpose: Skin and soft tissue defect is one of the major challenges faced by plastic surgeons. Adipose derived stromal cells, which can be harvested in large quantities with low morbidity, display multilineage mesodermal potential. Therefore, adipose derived stromal cells have been met with a great deal of excitement by the field of tissue engineering. Recently, Adipose derived stromal cells have been isolated and cultured to use soft tissue restoration. In order to apply cultured cells for clinical purpose, however, FDA approved facilities and techniques are required, which may be difficult for a clinician who cultures cells in a laboratory dedicated to research to utilize this treatment for patients. In addition, long culture period is needed. Fortunately, adipose derived stromal cells are easy to obtain in large quantities without cell culture. The purpose of this study is to present a possibility of using uncultured adipose derived stromal cells for wound coverage. Methods: Seven patients who needed skin and soft tissue restoration were included. Five patients had diabetic foot ulcers, 1 patient got thumb amputation, and 1 patient had tissue defect caused by resection of squamous cell carcinoma. The patients' abdominal adipose tissues were obtained by liposuction. The samples were digested with type I collagenase and centrifuged to obtain adipose derived stromal cells. The isolated adipose derived stromal cells were applied over the wounds immediately after the wound debridement. Fibrin was used as adipose derived stromal cells carrier. Occlusive dressing was applied with films and foams and the wounds were kept moist until complete healing. Results: One hundred to one hundred sixty thousand adipose derived stromal cells were isolated per ml aspirated adipose tissue. All patients' wounds were successfully covered with the grafted adipose derived stromal cells in a 17 to 27 day period. No adverse events related to this treatment occurred. Conclusion: The use of uncultured adipose derived stromal cells was found to be safe and effective treatment for wound coverage without donor site morbidity.
Background: Bone marrow stromal cells (BMSCs) express many cell surface molecules, which regulate the proliferation and differentiation of immune cells within the bone marrow. Methods: To identify cell surface molecules, which can regulate cell proliferation through cell interaction, monoclonal antibodies (MoAbs) against BMSCs were produced. Among them, 1H8 MoAb, which recognized distinctly an 80 kDa protein, abolished myeloma cell proliferation that was induced by co-culturing with BMSCs. Results: IL-6 gene expression was increased when myeloma or stromal cells were treated with 1H8 MoAb. In addition, the expression of IL-6 receptor and CD40 was up-regulated by 1H8 treatment, suggesting that the molecule recognized by 1H8 MoAb is involved in cell proliferation by modulating the expression of cell growth-related genes. Myeloma cells contain high levels of reactive oxygen species (ROS), which are related to gene expression and tumorigenesis. Treatment with 1H8 decreased the intracellular ROS level and increased PAG antioxidant gene concomitantly. Finally, 1H8 induced the tyrosine phosphorylation of several proteins in U266. Conclusion: Taken together, 1H8 MoAb recognized the cell surface molecule and triggered the intracellular signals, which led to modulate gene expression and cell proliferation.
The purpose of this study was performed to investigate the mineralization and differentiation of osteobalsts for bone regeneration in vitro and the effect of rate of the composition in periodontal cells on mineralization. For this study, healthy gingival tissues were surgically obtained from the patients during 1st premolar extraction for the purposes of orthodontic treament. Gingival tissue was washed several time with Phosphate buffered saline contained high concentration of antibiotics and antifungal agent, and cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM, Gibco, U.S.A.). Every cell were cultured in state at $37^{\circ}C$, 100% of humidity, 5% of $CO_2$ incubator. Bone marrow stromal cells were isolated from 5-clay-old rat femur with using medium irrigation mathod by syringe. Cell suspension medium were centrifuged at 1500 rpm for 5 min and then cultured in the petri dish. Two kinds of cell were freezed and stocked in the liquid nitrogen tank until experiment. Cell were incubated into the 24 multi-well plate with $5{\times}10^4$cell/well of medium at $37^{\circ}C$, 100% of humidity 5% $CO_2$ incubator for 24 hours. After discarded of the supernatent of medium, O.5ml of medium were reapplied and incubated. And counted the number of cell using the hemocytometer and inverted light microscope. We have measured the number of mineralized nodule with using Alizarin red S. staining in microscope. Furthermore every cell were observed the morphological change between every rate of co-culture of the two kinds of cell. The results were as follows; The rate of proliferation of co-culture cell revealed high rate tendency compared the bone marrow stromal cell only and low growth rate to compared with gingival fibroblast only. The tendency of formation of the mineralized nodule were observed dose-depend pattern of bone marrow stromal cell. It is concluded that the gingival fibroblast may inhibit the formation of mineralized nodule in the culture of the bone marrow stromal cell.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.32
no.4
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pp.327-333
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2006
Future cell-based therapies such as tissue engineering will benefit from a source of autogenous pluripotent stem cells. There are embryonic stem cells (ESC) and autologous adult stem cells, two general types of stem cells potentilally useful for these applications. But practical use of ESC is limited due to potential problems of cell regulation and ethical considerations. To get bone marrow stem cells is relatively burden to patients because of pain, anesthesia requirement. The ideal stem cells are required of such as the following advantages: easy to obtain, minimal patient discomfort and a capability of yielding enough cell numbers. Adipose autologus tissue taken from intraoral fatty pad or abdomen may represent such a source. Our study designed to demonstrate the ability of human adipose tissue-derived stromal cells (hATSC) from human abdominal adipose tissue diffentiating into osteocyte and adipocyte under culture in vitro conditions. As a result of experiment, we identified stromal cell derived adipose tissue has the multilineage potentiality under appropriate culture conditions. And the adipose stromal cells expressed several mesenchymal stem cell related antigen (CD29, CD44) reactions. Secondary, we compared the culture results of a group of hATSC stimulated with TGF-${\beta}$1, bFGF with a hATSC group without growth factors to confirm whether cytokines have a important role of the proliferation in osteogenic differentiation. The role of cytokines such as TGF-${\beta}$1, bFGF increased hATSC's osteogenic differentiation especially when TGF-${\beta}$1 and bFGF were used together. These results suggest that adipose stromal cells with growth factors could be efficiently available for cell-based bone regeneration.
CS-2l lymphoma cells that preferentially metastasize to lymph nodes after s.c. inoculation into BALB/c mice were grown in vitro in the presence of CA- 12 stromal cells isolated from lymph nodes. In order to obtain fundamental data on the identification and characterization of the soluble factors produced by CA-12 stromal cells, the conditioned medium of CA-12 stromal cells that inhibited apoptosis of CS-21 cells was examined. Various analytical treatments revealed that the soluble factors in CA-12 conditioned medium are very sensitive to heat treatment and trypsinization. Moreover CA-12 conditioned medium has an affinity with heparin but not with Con-A. In addition to these, the activity of CA-12 conditioned medium was blocked by H-7, a PKC inhibitor, but the conditioned medium could not induce the differentiation of thymocytes. We concluded that CA-12 conditioned medium contains stromal cell-derived apoptosis-inhibitory molecules that play an important role in proliferation of CS-2l cells by suppressing cell apoptosis.
Spear, Rose L.;Symeonidou, Antonia;Skepper, Jeremy N.;Brooks, Roger A.;Markaki, Athina E.
Biomaterials and Biomechanics in Bioengineering
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v.2
no.3
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pp.143-157
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2015
Successful integration of cementless femoral stems using porous surfaces relies on effective periimplant bone healing to secure the bone-implant interface. The initial stages of the healing process involve protein adsorption, fibrin clot formation and cell osteoconduction onto the implant surface. Modelling this process in vitro, the current work considered the effect of fibrin deposition on the responses of human mesenchymal stromal cells cultured on ferritic fibre networks intended for magneto-mechanical actuation of in-growing bone tissue. The underlying hypothesis for the study was that fibrin deposition would support early stromal cell attachment and physiological functions within the optimal regions for strain transmission to the cells in the fibre networks. Highly porous fibre networks composed of 444 ferritic stainless steel were selected due to their ability to support human osteoblasts and mesenchymal stromal cells without inducing untoward inflammatory responses in vitro. Cell attachment, proliferation, metabolic activity, differentiation and penetration into the ferritic fibre networks were examined for one week. For all fibrin-containing samples, cells were observed on and between the metal fibres, supported by the deposited fibrin, while cells on fibrin-free fibre networks (control surface) attached only onto fibre surfaces and junctions. Initial cell attachment, measured by analysis of deoxyribonucleic acid, increased significantly with increasing fibrinogen concentration within the physiological range. Despite higher cell numbers on fibrin-containing samples, similar metabolic activities to control surfaces were observed, which significantly increased for all samples over the duration of the study. It is concluded that fibrin deposition can support the early attachment of viable mesenchymal stromal cells within the inter-fibre spaces of fibre networks intended for magneto-mechanical strain transduction to in-growing cells.
Thymic stromal lymphopoietin (TSLP) is a novel interleukin (IL)-7-like cytokine and was originally discovered in the supernatant of a murine thymic stromal cell line. TSLP signal initiates via complex of the TSLP receptor and the IL-7 receptor α chain. TSLP expression is closely connected with many diseases such as atopic dermatitis, allergic rhinitis, asthma, inflammatory arthritis, eosinophilic esophagitis, rheumatoid arthritis, inflammatory bowel diseases, and cancer. In this review, I discussed biological roles of TSLP on mast cell-mediated allergic responses. In addition, this review summarizes the effective drugs in allergic-inflammatory reactions induced by TSLP on mast cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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