• Journal of Microbiology
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• 제44권6호
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• pp.649-654
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• 2006

A standard type II polyketide synthase (PKS) gene cluster was isolated while attempting to clone the biosynthetic gene for lipstatin from Streptomyces toxytricini NRRL 15,443. This result was observed using a Southern blot of a PstI-digested S. toxytricini chromosomal DNA library with a 444 bp amplified probe of a ketosynthase (KS) gene fragment. Four open reading frames [thioesterase (TE), $\beta$-ketoacyl systhase (KAS), chain length factor (CLF), and acyl carrier protein (ACP)], were identified through the nucleotide sequence determination and analysis of a 4.5 kb cloned DNA fragment. In order to confirm the involvement of a cloned gene in lipstatin biosynthesis, a gene disruption experiment for the KS gene was performed. However, the resulting gene disruptant did not show any significant difference in lipstatin production when compared to wild-type S. toxytricini. This result suggests that lipstatin may not be synthesized by a type II PKS.

• 미생물학회지
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• 제42권3호
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• pp.172-176
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• 2006

Streptomyces toxytricini로부터 lipstatin생산을 최적화하기 위해, 배지 성분이 lipstatin생산에 미치는 영향을 조사하였다. 이를 위해 tryptic soy broth (TSB) 배지를 기본 배지로 하여 $28^{\circ}C$, 200 rpm 으로 3일간 배양하여 총 배양액(seed culture) 을 만들고, 여기에 다양한 탄소원, 질소원, 지질 및 지방산등을 함유한 TSB 배지에 2% 접종한 후 60시간 동안 주 발효를 실시한 후, 배지 중의 lipstatin양을 측정하였다. 탄소원 중에서 glucose와 glycerol을 첨가한 배지에서 균체가 가장 잘 성장하였지만, lipstatin생산에는 lactose나 sucrose가 가장 우수한 것으로 나타났다. 한편, 질소원으로는 yeast extract가 균체 성장에 가장 좋았지만, 1.7% casitone과 0.3% soytone으로 구성된 TSB 배지에서 lipstatin생산량이 가장 높게 나타났다. 또한 lipstatin생산을 증가시키기 위해 triolein을 발효 배지에 첨가한 결과, 균체 성장은 증가하였지만, lipstatin의 생산은 현저히 감소하는 경향을 보였다. 한편, lipstatin의 생합성 원료로 추정되는 지방산들을 발효 배지에 0.5% 첨가하여 발효를 실시한 결과, 불포화 지방산인 linoleic acid나 oleic acid를 첨가한 경우 S. toxytricini의 성장이 억제되었으나, 포화 지방산인 stearic acid를 첨가한 경우에는 균체성장 뿐만 아니라 lipstatin 생산량도 증가하였다.