• 미생물학회지
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• 제38권1호
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• pp.38-44
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• 2002

국내 분리 침습성 균주중선별된 S. pneumoniae KNIH1156 (type 19F)으로부터 페렴구균의 병원성 인자이며 항원학적으로 다양한 표면단백항원인 pneumococcal surface protein A (PspA)를 분리${\cdot}$정제하였다. 폐렴구균을 CDM-ET배지에서 배양하게 되면 배지내로 PspA가 방출된다는 점과 PspA가 인간의 lactoferrin에 특이적으로 결합한다는 사실을 이용하여 CDM-ET 배지에서 S. pneumoniae KNIH1156 을 배양한 후 배양액을 농축하여 lactoferrinaffinity chromatography에 통과시켜 PspA를 분리, 정제하였다. 정제 후 anti-PspA antiserum으로 PspA를 확인하여 순수분리, 정제되었음을 확인하였으며 또한 인간의 lactoferrin과의 결합능력을 유지하고 있음을 확인하였다. 순수하게 분리하여 정제된 PspA의 면역원성을 확인하기 위하여 ICR mice에 욕강주사하였을 때 $LD_{50}$ 가 $1{\times}10^{7.5}$ CFU/ml께서 $1{\times}10^{10}$ CFU/ml로 약 500배 중가함을 관찰하였다. 따라서 본 실험에서S. pneumoniae KNIH1156 으로부터 분리${\cdot}$ 정제한 PspA가 면역원성과 방어능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제21권7호
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• pp.734-738
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• 2011

Streptococcus pneumoniae is a major cause of invasive infection in young infants and older adults. There are currently 90 capsular serotypes identified and 23 serotypes (1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19F, 19A, 20, 22F, 23F, and 33F) are responsible for about 90% of invasive disease. Among the more than 90 different S. pneumoniae serotypes, serotype 19A is globally very prevalent. A simplified purification procedure including adjustment of cell lysate pH to 4.5, fractionation with 50. 80% ethanol, and dialysis rendered capsular polysaccharide (CPS) in a yield of $31.32{\pm}3.11$ mg from 1 l culture (75% recovery after lyses). The product contained only 69.6 ${\mu}g$ of protein (99.78% purity) and 0.8mg (sum of the precipitants from 50~60%, 60~70%, and 70~80%) of nucleic acid (97.45% purity). The purified CPS was conjugated with bovine serum albumin; the product size ranged from 100 to 180 kDa.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제49권3호
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• pp.235-241
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• 2006

Streptococus pneumoniae is an important cause of invasive infections as well as non-invasive infections such as acute otitis media and sinusitis both in children and adults. Resistance of S. pneumoniae to multiple antimicrobials is increasing and poses therapeutic challenges, and prevention became more important. 23-valent polysaccharide vaccine has been used for the last several decades, but is not effective in children <2 years of age, the highest risk group of invasive diseases. Recently, a 7-valent pneumococcal protein conjugate vaccine(PCV) which is effective in infants and young children has been developed. The efficacy of PCVs against invasive pneumococcal disease and pneumonia is well established and is documented in several well-conducted studies. However, the effect of PCVs on otitis media is less obvious and more complex. PCVs clearly reduce diseases caused by vaccine-type(VT) pneumococci, but replacement of VT serotypes by non-VT serotypes in nasopharyngeal carriage of S. pneumoniae is responsible for the increase in acute otitis media caused by non-VT serotypes. Three years after introduction of PCV in the US, some increase of invasive infections with serotype 19A possibly due to serotype switching within certain vaccine type strains has been noted. Since most antibiotic-resistance in S. pneumoniae is confined to VT serotypes, vaccine use also reduces antibiotic resistance. With development of PCV, there was a great advance in the prevention of pneumococcal diseases, but replacement with potential virulent organisms and development of antibiotic resistance in non-VT pneumococci is a possibility that needs careful monitoring.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제19권3호
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• pp.173-177
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• 1996

The Pneumococcus, Streptococcus pneumoniae, has an ample polysaccharide (PS) capsule that is highly antigenic and is the main virulence factor of the organism. The capsular PS is the source of PS vaccine. This investigation was undertaken to optimize the culture conditions for the production of capsular PS by type 4 pneumococcus. Among several culture media, brain heart infusion (BHI) and Casitone based medium were found to support luxuriant growth of pneumococcus type 4 at the same level. Therefore in this study, the Casitone based medium was used to study optimization of the culture condition because of BHI broth's high cost and complex nature. The phase of growth which accomodated maximum PS production was exponential phase. Concentrations of glucose greater than 0.8% did not enhance growth or PS production. Substitution of nitrogen sources with other resources or supplementation of various concentrations of metal ion (with the exception of calcium, copper, and magnesium ions) had adverse effects on growth and PS production. On the other hand, low level aeration and supplementation of 3 mg/l concentration of asparagine, phenylalanine, or threonine were beneficial for increased PS production. The synergistic effect of all the favorable conditions observed in pneumococcal growth assays provided a two-fold cumulative increase in capsular PS production.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제13권2호
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• pp.124-129
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• 2006

목 적 : 1996년부터 2005년까지 단일기관에서 발생한 세균성 수막염의 주요 원인균의 연령별 분포를 조사하였다. 방 법 : 1996년 1월부터 2005년 12월까지 세브란스병원 소아과에 입원하여 세균성 수막염이나 신생아 수막염으로 진단받은 환아들 중 뇌척수액 배양검사 및 라텍스응집반응검사에서 원인균이 확인된 증례들의 의무기록을 후향적으로 조사하였다. 결 과 : 원인균이 확인된 46례 중 신생아 수막염은 미숙아 4례를 포함하여 27례였고 신생아기 이후의 세균성 수막염은 19례였다. 신생아 수막염 환아 중 원인균이 혈액배양검사에서도 동정된 경우는 모두 15례(55.6%)였다. 신생아 수막염의 가장 흔한 원인균은 B군 연쇄상 구균이었다(44.4%). 또한 B군 연쇄상 구균에 의한 수막염의 75.0%가 지발형 감염이었다. 신생아기 이후의 세균성 수막염 환아들의 84.2%가 5세 미만에서 발생하여, 이들의 연령 중앙값은 23개월이었다. 신생아기 이후의 세균성 수막염의 원인균으로는 폐구균 8례(42.1%), 인플루엔자균 8례, 수막구균 3례 등이 있었으며, 이 중 인플루엔자균는 2001년 이후 최근 5년간 검출되지 않았다. 결 론 : 신생아 수막염의 가장 흔한 원인균은 B군 연쇄상 구균이고 신생아기 이후에는 폐구균과 인플루엔자균이 세균성 수막염의 가장 흔한 원인균이었다. 이 중 단백결합 백신의 도입으로 인플루엔자균에 의한 세균성 수막염은 감소되는 경향을 보였다.

• Journal of Microbiology
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• 제41권1호
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• pp.1-6
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• 2003

The genetic relatedness of multidrug-resistant pneumococcal isolates of serotypes 19F and 23F was investigated. The DNA fragments digested with Sma I were resolved by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). PFGE analysis of 365. pneumoniae isolates showed 13 different patterns. Among 22 isolates of serotype 19F, 9 different PFGE patterns were present and 14 isolates of serotype 23F isolates represented 5 distinct PFGE patterns. Two isolates of serotype 19F and six isolates of serotype 23F shared the same PFGE pattern (Pattern I). Based on the genetic relatedness within the strains (one genetic cluster was defined as having more than 85% homology), we divided the pneumococcal strains into genefic clusters (Ⅰ, II, III, IV, V, and VI). The 22 strains of serotype 19F belonged to five distinct genetic clusters (I, II, III, IV, V and VI) and 14 strains of serotype 23F represented two genetic clusters (I and II ). These results showed that strains of serotype 19F are genetically more diverse than those of serotype 23F, Serotype 19F isolates with PFGE patterns H and I appeared to be less related to those of the remaining PFCE patterns (A to G) (less than 60% genetic relatedness), but those strains were genetically closely related with serotype 23f. These results suggest that the latter isolates originated from horizontal transfer of the capsular type 19F gene locus to 23F pneumococcal genotypes. In conclusion, the multidrug-resistant pneumococcal isolates of serotype 19f and 23F isolated in Korea are the result of the spread of a limited number of resistant clones.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제50권2호
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• pp.157-162
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• 2007

목 적: 최근 5년간 대전충청 지역에서 세균성 수막염의 원인균과 역학, 임상 양상, 경과 및 예후에 대하여 알아보고자 하였다. 방 법: 2001년 1월부터 2005년 12월까지 만 5년간 대전충청 지역의 10개 종합병원 소아과에서 세균성 수막염으로 진단받았던 1개월부터 만 15세까지의 53례를 대상으로 하여 원인균을 중심으로 발생 빈도와 역학을 알아보았다. 결 과: 대전충청 지역에서 최근 5년간 발생한 소아 세균성 수막염 53례 중 40례에서 균이 배양되었고, 원인균은 S. pneumoniae(32.1%), H. influenzae(18.9%), N. meningitidis(5.7%) 등의 순서로 나타났다. 임상증상으로 발열이 전례에서 있었고, 뇌척수액 검사에서 대부분 백혈구 수는 $100/mm^3$ 이상(88.3%), 당량은 50 mg/dL 미만(79.2%), 단백량은 45 mg/dL 이상(92.4%)이었다. 53례 중 45례(84.9%)는 호전되어 퇴원하였고, 합병증은 경막하삼출(19.0%)과 청력장애(9.4%)가 가장 많았다. 결 론: 대전충청지역에서 최근 5년간 발생한 수막염의 가장 흔한 원인균은 S. pneumoniae로, 폐구균 단백 결합 백신 접종이 활성화되면 S. pneumoniae에 의한 수막염의 발생율은 감소할 것으로 보인다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제46권4호
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• pp.345-350
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• 2003

목 적 : 세균성 뇌수막염은 높은 사망률과 후유증을 가져오는 심각한 소아에서의 감염성 질환 중 하나이다. 본 연구에서는 이미 알려진 뇌척수액 latex 응집검사의 진단적 가치 외에도 추적검사에서 예후 예측 인자로서 유용성을 알아보고자 하였다. 방 법 : 1997년 1월부터 2002년 6월까지 세균성 뇌수막염으로 진단받고 이화의대 목동병원에서 입원치료 받았던 25명의 환아들중 뇌척수액 세균배양검사와 latex 응집검사가 모두 양성이었던 19명을 대상으로 하였다. 의무기록에서 임상증상, 뇌척수액 소견, 방사선학적 소견 그리고 신경학적 후유증에 대해 조사하였다. 뇌척수액 추적검사는 항생제 치료 후 3, 7, 14, 21일 그리고 28일에 시행하였고, 3일째 음성이 된 환아들을 I군으로, 3일 이후에도 지속적으로 양성으로 남아있는 환아들을 II군으로 나누었다. 결 과 : 대상 환아 19명의 평균 나이는 $10.6{\pm}12.3$개월(2-33개월)이었고, 원인균으로는 H. influenzae type b 11명(57.9%), Group B Streptococcus 4명(21.1%), S. pneumoniae 3명(15.7%), 그리고 E. coli 1명(5.3%)이였다. I군은 10명(52.6%), II군은 9명(47.4%)이였다. 뇌척수액 추적검사에서 세균배양검사는 3일째 모두 음성화되었고, latex 응집 추적검사는 3일째 9명(47.4%)에서 양성이었고, 7일째 31.6%, 14일째 26.3%, 21일째 10.5%에서 양성이었고, 28일째에 모두 음성이 되었다. I군에서는 2명(20.0%)에서 경막하삼출 소견을 보였다. II군에서는 9명(100.0%) 모두에서 경막하 삼출을 보였고, 이 중에서 44.4%에서 뇌수종 또는 뇌연화 소견을 보였다. 신경학적 후유증은 II군에서 감각신경성난청 1명, 경련성 질환 1명 그리고 우측반신마비 1명이 발생했고, I군에서는 발생하지 않았다. 결 론 : 세균성 뇌수막염 치료 시 뇌척수액 latex 응집 추적검사를 실시하는 것은 치료 초기에 신경학적 예후를 예측하는데 유용하였다.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제10권2호
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• pp.159-166
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• 2003

목 적 : 폐구균은 비인두에 존재하는 정상균주이나 중이염 등의 국소 감염 뿐 아니라 폐렴, 뇌수막염, 패혈증 등의 침습성 질환을 유발하는 것으로 알려져 있다. 최근 전 세계적으로 다제내성 폐구균이 증가하는 추세를 보여 큰 문제가 되고 있는바 이에 저자들은 폐구균의 혈청형과 항생제 감수성을 검사하고, 향후 시행될 폐구균 예방접종의 효용성 등을 예측해 보고자 하였다. 방 법 : 2001년 9월부터 2003년 1월까지 연세의료원에 내원한 환자 중 배양 검사상 폐구균이 검출된 116명을 대상으로 하였다. 폐구균의 혈청형 검사는 Quellung 반응을 통해 결정하였고, 페니실린 내성 여부는 oxacillin 디스크 확산법으로 판정하였다. 결 과 : 폐구균은 객담 76례(65.5%), 혈액 13례(11.2%), 이루 12례(10.3%), 인두 7례(6.0%), 비강 2례(1.7%), 뇌척수액, 안구분비물, 복수, 수술 후 창상부위, 두부 농양, 도관 각 1례(0.9%)로 총 116례에서 배양되었으며, 98례에서 혈청형 검사가 가능하였다. 분리된 혈청형을 살펴보면 19F 15례(15.3%), 19A 11례(11.2%), 11A 8례(8.2%), 6A, 14와 3이 각 7례(7.1%), 6B, 23F와 35가 각 6례(6.1%)의 순이었다. 총 116례 중 82례(70.7%)에서 페니실린 내성을 보였으며, 페니실린 내성균주의 혈청형은 19F, 19A, 11A, 23F, 6A, 9V등이 49례(59.8%)를 차지하였고, cotrimoxazole(74.4%), tetracycline(69.5%), erythromycin(90.3%) 등의 다른 항생제에도 높은 내성률을 보였다. 소아 환자 22례 중 20례에서 혈청형 분석이 가능하였고, 19A, 19F가 각 5례(25.0%), 6A, 6B, 23F가 각 2례(10.0%), 11A, 14, 19, 29가 각 1례(5.0%)를 차지하여 7가 폐구균 단백결합백신에 포함되는 혈청형이 50%(10/20), 백신관련 혈청형을 포함하여 85%(17/20)이었으며, 22례 중 86.4%(19/22)에서 페니실린 내성을 보였다. 결 론 : 이전의 보고에 비해 백신포함 혈청형의 빈도가 약간 낮은 소견을 보였으며, 최근 일부 폐구균 혈청형의 변화가 보고되고 있는 바 7가 폐구균 단백결합 백신의 상용화에 앞서 전국적인 폐구균 혈청형의 조사가 필요할 것으로 사료된다.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제10권1호
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• pp.81-86
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• 2003

목 적 : 폐구균은 중이염, 폐렴등의 흔한 원인이며 패혈증 및 뇌수막염 등 중증감염을 일으킬 수 있다. 최근 폐구균의 항균제 내성률이 증가하는 추세를 보이며, 예방접종이 개발되어 우리나라에서도 곧 시행될 전망이다. 이에 본 연구에서는 폐구균에 의한 질병분포 및 내성률에 대한 변화 등을 알아보고자 하였다. 방 법 : 1991년 1월부터 2000년 12월까지 연세대학교 신촌세브란스병원 소아과에서 시행한 배양검사상 폐구균이 확인된 환아 306명을 대상으로 임상양상과 진단명을 의무기록을 통해 후향적으로 조사하였고, 선천성 심질환이나 혈액종양질환을 앓고 있는 환아는 조사대상에서 제외하였다. 월별 빈도와 연도별 내성률의 변화 및 연령에 따른 중증감염의 정도를 비교하였다. 결 과 : 1) 검사 당시 연령은 2개월부터 15세까지의 분포를 보이며 평균연령은 7.9세이었고, 연령별로는 6세 미만이 77%로 대부분을 차지하고 2세 미만이 42%이었다. 남녀 비는 1.6 : 1이었다. 2) 월별 분포는 봄에 해당하는 3월과 4월이 42%로 높았고 여름에 해당하는 8월과 9월이 6%로 낮았다. 3) 질병별로는 폐렴 29.2%, 중이염 19.3%, 패혈증 17.6%, 뇌막염 9.5%순이었고, 연령별 차이는 없었다. 4) 페니실린에 대한 내성률은 1991년 65%에서 2000년에 84%로 점차 증가하는 추세였다. 다제내성의 경우도 1991년 10%에서 2000년 78.3%로 점차 증가하는 추세를 보였다. 결 론 : 6세 미만의 어린 소아에서 중증감염을 일으키는 원인의 하나인 폐구균은 점차 내성률 및 다제내성 빈도가 증가하는 추세로 전국적 조사가 필요하며, 이의 예방을 위해 폐구균의 예방접종에 대한 검토가 필요하다.