As an efffort ot construct LAB (latice acid bacteria), capable of utilizing starch as fermentation substrate without the aid of externally supplied enzymes, plasmid vectors containing the amyL($\alpha$-amylase/pullulansase gene) from Clostridium thermophydrosulfuricum, and glucoamylase cDNA from Asperigillus shirousamii were constructed and introduced itno E. coli and L. lactis. For expression in procaryotes , 1.9kb glucoamylase cDNA encoding the mature form of enzyme was PCR amplified and translationaly fused to a PCR amplified 260 bp fragment containing the promotor and secretion signals of amyl in the same reading frame. The production of $\alpha$-amylase, Apu, and glucoamlase in E. coli and L. lactis was confirmed by enzyme assay and zymography . Enzymeswere detected in both cellpellets and supernatants, indicating theworking of scretion signals in heterologous hosts. The efficiencies of secretion were varibale depending on the gene and host. The highest $\alpha$- amylase acitivity observed was 1.1 units and most activiity was detected from thecell pellets. The degree of gene expression in both hosts and the effect on the growth of hosts were examined.
The nucleotide sequence of the TRP1 gene encoding phosphoribosyl anthranilate isomerase in yeast Saccharomycopsis fibuligera was determined by degenerate polymerase chain reaction and genome walking. Sequence analysis revealed the presence of an uninterrupted open-reading frame of 759 bp, including the stop codon, encoding a 252 amino acid residue. The deduced amino acid sequence of Trp1 in S. fibuligera was 43.5% homologous to that of Komagataella pastoris. The cloned TRP1 gene (SfTRP1) complemented the trp1 mutation in Saccharomyces cerevisiae, suggesting that it encodes a functional TRP1 in S. fibuligera. A new auxotrophic marker to engineer starch-degrading yeast S. fibuligera is now available. The GenBank Accession No. for SfTRP1 is KR078268.
This study was an attempt to use arrowroot, a common plant in Korea used as food to relieve famine, for making noodles and to set up a standard formulation for arrowroot-starch-containing noodle. Arrowroot starch was mixed with wheat flour at a different ratio and used to make noodles. Cooking quality and texture were measured, and sensory evaluation was performed with the noodles prepared. Water binding capacity of arrowroot starch was higher than that of wheat flour. Maximum viscosity of the composite arrowroot-wheat flours was increased as the arrowroot starch content increased as measured by amylograph. Addition of arrowroot starch at 10% level improved the quality of noodles. Texture measurement showed that the noodles of the composite flour containing 10% or 20% arrowroot starch were superior to those of wheat flour alone; however, the scores of arrowroot-con-taming noodles were similar to those of wheat flour alone in sensory evaluation.
A number of Saccharomycopsis fibuligera strains that can hydrolyse and utilize starch as a carbon source were isolated from nuruk, a traditional Korean starter for rice wine fermentation, and their specific growth rates on starch-containing medium were compared to choose the prominent strain. S. fibuligera strain MBY1320 showed a higher growth rate at $42^{\circ}C$ than that of strain S. fibuligera KCTC7806, indicating that S. fibuligera MBY1320 has more thermo-tolerant machinery for starch hydrolysis and utilization than KCTC7806. Although the activity of ${\alpha}$-amylase at $30^{\circ}C$ was significantly lower for S. fibuligera MBY1320 than KCTC7806 (3,812.5 U vs. 14,878.5 U), S. fibuligera MBY1320 showed a much higher glucoamylase activity at $42^{\circ}C$ than S. fibuligera KCTC7806 (5,048.9 U vs. 13,152.3 U). Thus, a new S. fibuligera strain, with a higher starch-hydrolysing activity at elevated temperatures than that of other types of strain, this study reports.
Wild yeasts on the surface of various fruits including grapes were surveyed to obtain yeast strains suitable for fermenting a novel wine with higher alcohol content and supplemented with rice starch. We considered selected characteristics, such as tolerance to alcohol and osmotic pressure, capability of utilizing maltose, and starch hydrolysis. Among 637 putative yeast isolates, 115 strains exhibiting better growth in yeast-peptone-dextrose broth containing 30% dextrose, 7% alcohol, or 2% maltose were selected, as well as five ${\alpha}$-amylase producers. Nucleotide sequence analysis of the 26S rDNA gene classified the strains into 13 species belonging to five genera; Pichia anomala was the most prevalent (41.7%), followed by Wickerhamomyces anomalus (19.2%), P. guilliermondii (15%), Candida spp. (5.8%), Kodamaea ohmeri (2.5%), and Metschnikowia spp. (2.5%). All of the ${\alpha}$-amylase producers were Aureobasidium pullulans. Only one isolate (NK28) was identified as Saccharomyces cerevisiae. NK28 had all of the desired properties for the purpose of this study, except ${\alpha}$-amylase production, and fermented alcohol better than commercial wine yeasts.
About 7.7% of the total anaerobic bacteria in pig feces grew with clear zone around the colonies on the agar medium containing inulin as a sole carbon source. Among these bacteria, a strain with the strongest inulin-utilizing activity was isolated and identified as Bacteroides sp. based on its morphological and taxonomical characteristics. The isolate grew well with inulin, fructooligosaccharides or glucose as a sole carbon source, while its growth dropped to 50% of that obtained with glucose when soluble starch or sucrose are used. Since the inulase activity was found only when fructooligosaccharides or inulin was added to the growth medium, but not when glucose, sucrose or soluble starch was applied, the inulase production was considered to be induced by fructooligosaccharides or inulin. The highest inulase activity, 0.42 U/ml was detected with the inulin medium and 0.25 U/ml with fructooligosaccharides medium. The cell growth of the isolated strain increased with the amounts of inulin up to 2%(w/v) and maximum production of inulase was found in the cells fed 1% inulin. The inulase of the isolated Bacteroides sp. showed its maximum activity at pH $7.0{\sim}7.5\;and\;50{\sim}50^{\circ}C$ and was found to be an exoinulase judging by its mode of action.
To meet the need of protein feed and fine more efficient ways of returning waste to resources, we have carried out the study of the production of yeast for foods and feeds from the corn starch cake. The present study includes the method for acid-hydrolysis, the selection of yeast capable of utilizing hydrolyzate of the corn starch cake, and culture condition of Candida tropicalis under the liquid culture and the semisolid culture. Obtained results were as follows. 1. Hydrochloric acid was more excellent on the hydrolysis of the corn starch cake than sulfuric acid, and the yield of sugar was maximum, 57.2%, when the corn starch cake was hydrolyzed with 1.0% of hydrochloric acid at 2.0kg/cm for 30 minutes. 2. As the acid solution content was increased, more sugar was liberatedfrom the mixture, until the acid solution-substrate ratio reached 10:1. Beyond this point, no further increase was observed. To prepare the cultural medium of semisolid fermentation, a acid solution to substrate ratio of 3:1 appeared to be optimum. 3. Out of 6 yeast strains, Candida tropicalis had excellent growth on the hydrolyzate of the corn starch cake, and optimum temperature and initial pH were $30^{\circ}C$ and 6.0 respectively. 4. Optimum liquid medium of Candida tropicalis is ures 0.3%, potassium phosphate monobasic 0.15g and magnesium sulfate 0.04g in 100ml of the hydrolyzate of the corn starch cake, while optimum semisolid medium is ammonium chloride 0.4g, potassium phosphate monobasic 0.1%, magnesium sulfate 0.04%. 5. Candida tropicalis could assimilate the sugar in the hydrolyzate up to more than 88.75%, and a yield of dry yeast reached 19.13% to the corn starch cake under the liquid culture. 6. Compared to the that of the untreated corn starch cake, the cellulose content of the semisolid fermented cake decreased by 3.76% to 14.7%, whereas dry yeast contents increased by 13.89%.
A potential fungal lipid producer from starch, which was identified as Muror plumbeus, was isolated from natural sources and its optimum cultivation condition for lipid production was investigated. The Mucor plumbeus FRI 0007 showed the highest felt weight and lipid content which were 2.09 $\pm$ 0.24g per 50$m\ell$ of medium and 37.43% on dry weight basis respectively after 20 days incubation on the medium containing 21% of starch as a carbon source. The urea was the best nitrogen source as compared with sodium nitrate, potassium nitrate, magnesium nitrate, ammonium nitrate and ammonium acetate and its optimum concentration was 2.14g/$\ell$, showing 2.39 $\pm$ 0.07 g felt/50$m\ell$ of medium and 50.73% lipid content on dry weight basis after 25 days incubation. Besides the starch as a carbon source and urea as a nitrogen source, the Mucor plumbeus FRI 0007 utilized ZnSO$_4$, MgSO$_4$, NaH$_2$PO$_4$, $K_2$SO$_4$and FeCl$_3$as mineral sources. However, it did not require ail the above 5 minerals in group in-dispensably for its growth and lipid accumulation. The lipid and economic coefficient of Mucor plumbeus FRI 0007 grown on the medium containing 0.44g $K_2$SO$_4$or 5.00g MgSO$_4$/$\ell$solely were 14.96 and 15.37 and 31.12 and 26.10 which was higher than those on the medium containing the above 5 minerals.
Park, Wan-Soo;Koo, Young-Jo;Shin, Dong-Hwa;Min, Byong-Yong
Korean Journal of Food Science and Technology
/
v.15
no.1
/
pp.51-55
/
1983
It was investigated under several cultural conditions to produce biomass directly from starch by an strictly aerobic and amylolytic yeast, Sporobolomyces holsaticus FRI Y-5. Its optimal temperature and initial pH of medium for growth were $23^{\circ}C$ and 6.9, respectively. Activation energy, Ea, for growth was calculated to be 17.33 Kcal/mole from the Arrhenius relationship. When each of 13 nitrogen sources was added to the basal medium, $(NH_2)_2CO$ had the best effect, on which concentration of cell after 3 day incubation was 10.6 g/l and cell yield was 0.451. The yeast growth was affected by $MgSO_4,\;K_2SO_4\;and\;ZnSO_4$ as a mineral source and was best on the medium containing all of them. The addition of yeast extract (5g/l) could enhance the production of biomass and cell yield to 77% and 32%, respectively.
The objectives of this study were to evaluate the physico-chemical and sensory characteristics of a Korean traditional alcoholic beverage (yakju) prepared using different nuruk (Korean-style koji) concentrations and yeasts such as the fusant FA776 and Saccharomyces cerevisiae KOY-1, respectively. The fusant FA776, which has alcohol-fermenting and starch-utilizing properties, was formed by Saccharomyces cerevisiae KOY-1 and Saccharomyces diastaticus KCTC1804. The fermentation trial was conducted in a 5 L lab-scale jar at $25^{\circ}C$. The maximum alcohol production of the K-100 and F-50 reached levels of 135.0 mg/mL and 119.4 mg/mL, respectively. The pH values were in a range of 4.3-4.5. Total acidity was in a range of 0.47-0.60%. Organic acids and amino acids were analyzed in order to evaluate variations in its composition and content via HPLC analysis. Organic acids including lactic acid, citric acid, malic acid, and pyruvic acid, and 16 kinds of amino acids, including aspartic acid, were detected in all treatments. K-100 showed the highest amino acid contents, whereas F-50 exhibited the lowest amino acid contents. Volatile flavor components such as phenylethyl alcohol, isoamyl alcohol, 2-methylthiophane, isobutyl alcohol, and ethyl succinate were detected as a major component in all treatments, as determined via gas chromatography. The results of our sensory evaluation demonstrated that Yakju fermented by the FA776 fusant yielded more favorable results than S. cerevisiae KOY-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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