The time-course process by which spermatozoa penetrates through the micropvle apparatus into the egg cytoplasm of rainbow trout, Oncorhvnchus mvkiss, was examined with transmission and scanning electron microscopy. In the unfertilized egg, the ess surface beneath the inner opening of the micropylar canal did not differ distinctly from the rest of the animal pole area. A spermatozoon attached to the micropvle opening 20 seconds after insemination. In the initial stases of penetration, the spermatozoon still within the micropvlar canal attached perpendicularly at its apical tip to the ess surface, then the sperm head was rapidly engulfed by the folded egg surface with its manly microvilli. A large fertilization cone with microvillus-free surface appeared on the esS surface sutra-rounding the penetrating spermatozoon. The head portion of the penetrating spermatozoon was completely wrapped by the ess surface with only the tail portion visible externally 30 seconds after insemination. The fertilization cone displayed the tail portion of the penetrating spermatozoon on the central portion of its surface 60 seconds after insemination. 150 seconds after insemination, breakdown of the cortical granules elevation were initiated at the animal pole, then completed at the vegetable pole area. The spermatozoon disappeared from the outer surface of the ess before the fertilization cone completely retracted 250 seconds after insemination. In result, the block to polvspermv to permit entry of a sin81e sperm is considered to be mechanical by the rnorpholoSical design of the micropvle and fertilization cone.
Fine structural changes of the germ cells during spermatogenesis in the goldeye rockfish, Sebastes thompson; were examined by means of the transmission and scanning electron microscopy. A spermatogonium has a large nucleus with a single nucleolus in the interphase. Primary spermatocytes are characterized by the formation of chromatin clumps and presence of the synaptonemal complex in the nucleus. The nucleoplasm of secondary spermatocytes is more condensed than that of primary spermatocytes, and the cytoplasm contains numerous mitochondria, endoplasmic reticulum and Golgi complex. The nuclei of spermatids in metamorphosis show sickle-like shape as the nucleoplasm becomes more condensed. In the cytoplasm of spermatids, the proacrosomal granules are not found at all. A spermatozoon consists of head, neck and tail. The acrosome is absent in the head. Four to five cytoplasmic collars are observed in the posterior portion of the head of spermatozoon. The well developed axonemal lateral fins are observed in the flagellum of spermatozoon.
We demonstrated, for the first time, pronuclear formation and apposition in porcine ooc-ytes following intracytoplasmic injection of porcine, human, bovine and mouse spermatozoon. Microtubule organization and chromatin configuration were investigated in these oocytes during pronuclear apposition. Following intracytoplasmic injection of porcine spermatozoon, the microtubular aster was organized from the neck of spermatozoon, and filled the whole cytoplasm. This male derived microtubules appear to move both pronuclei to the center of oocytes. In contrast, following injection of spermatozoa from different species such as human, bovine and mouse, microtubules were organized from the cortex of the oocytes and concentrated to the pronuclei, which seems to move both male and female pronuclei to the center of oocyte. This organization is similar to what has been shown in the parthenogenetically activated por-cine oocytes. These results suggested that the porcine, human, bovine and mouse sperm chromatin can be formed pronucleus and apposited in the center of oocytes in the absence of male derived microtubule when they were injected into porcine oocytes.
Spermatogenesis and the reproductive cycle in male Spisula sachalinensis were investigated by cytological and histological observations. The morphology of the spermatozoon has a primitive type and is similar to those of other bivalves in that it contains a short midpiece with four mitochondria surrounding the centrioles. But spermatozoon of this species has not axial rod and satellite body in the midpiece. The morphologies of the sperm nucleus type and the acrosome shape of this species have a globe-shape type and modified cap-like shape, respectively. The spermatozoon is approximately $40-45{\mu}m$ in length including the sperm nucleus length (about $1.35{\mu}m$), acrosome length (about $1.50{\mu}m$) and tail flagellum. The axoneme of the sperm tail flagellum consists of nine pairs of microtubules at the periphery and a pair at the center. The axoneme of the sperm tail shows a 9+2 structure. The spawning period of these species lasts from June to July, and the main spawning occurs in July when seawater temperatures are greater than $20^{\circ}C$. The male reproductive cycle of this species can be categorized into five successive stages: early active stage (October to January), late active stage (February to April), ripe stage (April to June), partially spawned stage (June and July), and spent/inactive stage (August to September).
Spermatogenesis and fine structure of the spermatozoon of the marbled sole, Limanda yokohamae were examined by means of the scanning and transmission electron microscopy. The process of spermatogenesis of the marbled tole is similar to that of other teleost with external fertilization. During the spermiogenesis, chromatin that has been became fine]y granular progressively condenses into many large globules and that homogeneously condensed in the spermatozoan head. A spermatozoon consists of head and tail, and the acrosome is absent. The cytoplasmic collar contained eight mitochondria is observed in the posterior part of the head. The well -developed axonemal lateral fins are observed in the tail. In the TEM observation, the cross section of the axial filament shows '9+2' axonemal structure of microtubules, and the numerous vesicles are observed in the cytoplasm.
The spermatogenesis of Korean slug, Incilaria fruhstorferi are observed by electron microscope. The results are as follows: The spermatogenesis of Korean slug, Incilaria fruhstorferi, is processed through the five stages; Spermatogonia, primary spermatocyte, secondary spematocyte, spermatid and spermatozoon. The spermiogenesis, the differentiation of the spermatid, is also processed through the five stages. In stage 1, the numerous and round mitochomdria in the cytoplasm are moved around the nucleus of spermatid. In stage 2, the nucleus of spermatid transformed into the oval shape, and the oval nucleus is surrounded by many rough endoplasmic reticulum. In stage 3, the oval nucleus of spermatid is changed to be curved as an arrow, and then two centrioles appeared behind nucleus. The centriole is sucked into the cytoplasm. and almost all the chromatins are changed into heterochromatins. In stage 4, the nucleus of spermatid are transformed into the oval shape, when the lamella plate chromatin of spermatid form in the nucleoplasm. In stage 5, the oval nucleus is then transformed into the stream-line shape when the lamella plate chromatin of spematid gradually concentrated in the nucleus, and long axoneme ($65{\mu}m$ in length) form from the distal centriole. Two long mitochondria in the middle piece and the main piece of spermatozoon array spirally along a long axoneme, and the mitochondria matrix is gradually filled with electron-dense glycogen particles ($0.1{\mu}m$ in size). The axoneme of spermatozoon consists of typical 9+2 microtubular pattern.
Comparative study on the spermatogenesis of two kinds of Korean planarias, Dugesia japonica and Phagocata vivida, were studied with light and electron microscope. Observation results were as follows. Except following details, fine structure and morphogenesis of the spermatogonia, primary spermatocyte, secondary spermatocyt spermatid and spermatozoon were consistant between the two species. The nucleus of primary spermatocyte of Dugesia japonica was surrounded with 36-38 microtubules, while that of Phagocata vivida with 40-42 microtubules. The C-shaped lamellar Golgi complex appeared in the spermatid cytoplasm of the former, while Straight-shaped lamellar Golgi complex in that of the latter. The four white spots were observed only in the nucleoplasm of matured spermatozoon in the latter, not in the former.
The spermatogenetic process in the edible giant snail is similar to those in the other snails, except for the axoneme formation process. In this study, the axoneme formation process in the giant snail was mainly examined by means of electron microscopy. The tail portion of a spermatozoon is about $160{\mu}m$ long, and extends straight to the rear, surrounded by two large and long mitochondria in spiral forms. A number of glycogen particles $(40\sim70nm)$ are found in the swollen matrix of the mitochodria. The axoneme which composes the tail of a spermatozoon is surrounded by $7\sim10$ lamella-form fibrous sheaths of about $0.2{\mu}m$ in thickness. Most of the mature spermatozoa are found to be clustered into a group of $5\sim7$ ea in syncytial bridges formed by cytoplasmic processes. Sertoli cells contain glycogen particles, endoplasmic reticulum, a lot of mitochondria, and lipids in their cytoplasm. They protrude their filiform pseudopodia and phagocytize abnormal spermatids or spermaozoa.
The fine structure of spermatozoa of Pungtungia herzi was examined with scanning and transmission electron microscopies. The spermatozoa of p. herzi are approximately 37.4 ${\mu}{\textrm}{m}$ in length and a relatively simple cell with a spherical nucleus, a short midpiece and a tail. The acrosome is not present as in most teleost fishes. The ultrastructure of spermatozoa represents typical characteristics of cyprinid spermatozoa including the lateral insertion of flagellum, the organization of centriolar complex in shallow nuclear fossa, and the occurrence and asymmetrical arrangement of mitochondria. In the nuclear envelope and mitochondrion, however there were some morphological differences for their ultrastructure. The nuclear envelope is severely undulated and the shallow nuclear fossa contains two centrioles which are at the angle of some 130$^{\circ}$ each other. The most significant feature can be observed with the mitochondrion; five or more mitochondria, which are shown in primary spermatocyte, fuse to form a single one in the mature spermatozoon. The mitochondrial aspect is different from that of other cyprinid spermatozoa, where their mitochondria have a conventional aspect and never fuse to form a mitochondrial derivative. In terms of sperm evolution the fused mitochondria are regarded as the apomorphic character in comparison with the separate mitochondria. The single mitochondrion is not reported in cyprinid spermatozoon except the case of Rhodeus.
The roundnose flounder's (Eopsetta grigorjewi) spermiogenesis and fine structure of the spermatozoon were examined by means of the scanning and transmission electron microscopy, During the spermiogenesis, the chromatin of the spermatid became fine granular form, and progressively condensed into many large globules, finally homogeneously condensed in the spermatozoan head. The main characteristics of the spermiogenesis were the disappearanre of Golgi complex, the appearance of microfilament the reduction of mitochondria and the appearance of Iysosome in the cytoplasm. A spermatozoon consisted of head and tail, but the acrosome was absent. The cytoplasmic collar containing seven mitochondria was observed in the posterior part of the head. The well-developed axonemal lateral fins were observed in the tail. The cross section of the axial filament showed '9+2' axonemal structure of microtubules, and the numerous vesicles were observed in the cytoplasm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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